植物叶片解剖结构必须用石蜡切片法吗
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发布时间：2022-04-23 14:10
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时间：2023-11-04 10:50
不。
植物实验中常用的几种制片方法
一、 撕剥法：
剥下一片新鲜的洋葱鳞叶，用镊子从其内表面撕下一条透明的薄膜状内表皮，再用剪刀或刀片剪成3~5mm的小块，迅速置于载玻片上已准备好的水滴内，如发生卷曲，应细心地用解剖针将它展平，并盖上盖玻片，即可进行观察。在放盖玻片时，先以盖玻片的一边缘与材料左边水滴的边缘相接触，然后慢慢向下挤出来，以免产生气泡，如果盖玻片下水分过多时，需用吸水纸从盖玻片的侧面吸去多余的水分。水分不足不能充满盖玻片时，容易产生气泡，可从盖玻片的一侧再滴入清水，将气泡驱走，若气泡仍难以驱走，则可用铅笔的橡皮轻轻击打盖玻片除去气泡。
二、 组织离析法
取松树或鹅掌楸茎一小段，将皮和木质部剥离，分别纵剖为火柴棍粗细的小条，各放在平底或小号量瓶中，再加入铬酸——*离析液（用量为材料的20倍），盖好瓶盖置于40℃左右温箱中解离，约1~2天，检查细胞彼此能够分开时，可将已离析的材料用清水浸洗，然后转入70%酒精中分别保存备用。
三、 徒手切片法
用左手的三个指头夹材料，并使其稍高于手指之上，以免刀口切伤手指，右手持双面刀片，然后以均匀的动作，自左前方向右后方拉刀滑行切片。注意切时要用整个右臂的力量而不要用腕力，动作敏捷，材料要一次切下，切片时只动右臂，左手不动。如此连续动作，切下许多薄片后，用湿毛笔或直接用刀片把这些薄片轻轻地移入盛水的培养皿中备用。
永久切片的制作程序
1、材与固定：应选取有代表性的部位，及时用相应的固定液固定。
2、脱水：洗去固定液用不同浓度的酒精逐级脱水，关键是脱水一定要彻底，否则因二甲苯不溶于水，将影响下一步操作。
3、透明：常用二甲苯透明材料，逐级到纯二甲苯。9、
4、透蜡：石蜡溶于二甲苯不溶于酒精，所以在透明时不能残留酒精，否则透蜡不彻底。透蜡时也逐级至纯蜡，不然，残留的二甲苯挥发后会形成空洞。
5、包埋：把材料放在方形纸船内，注入蜡液，冷却后成方形蜡块，将材料包在里面。
6、切片：用切片机连续切片成一蜡带，厚度常取10~20um。
7、粘片：将洁净的载玻片上薄薄地涂上一小块黏合剂，滴上一滴蒸馏水，切取1~2片切好的蜡片，轻放在上，使蜡片展平，阴干。
8、脱蜡、染色：用二甲苯脱去玻片上的蜡质，再逐级退回到纯酒精或其他浓度的酒精时，放入相应浓度的染色液中进行染色。
酒精脱水：分别用不同浓度酒精依次脱水，最后用无水乙醇二次彻底脱水。
9、二甲苯透明：除去无水乙醇，经1/2二甲苯和1/2纯酒精再换纯二甲苯中透明。
10、封固：经过镜析，符合要求，立即取一滴加拿大树胶或中性胶，滴于材料之上，轻轻盖上盖玻片。最后在盖玻片右侧贴上标签，平置托盘中，放入30~35℃恒温箱中烘干或于无尘处风干，待树胶干固后，放可使用。
