白酒中甲醇的测定品红亚硫酸比色法

一、实验目的

1．巩固分光光度计的使用和标准曲线的绘制方法。 2．掌握品红亚硫酸比色法的原理。 二、实验原理

酒中甲醇在磷酸溶液中被高锰酸钾氧化成甲醛，过量的高锰酸钾及在反应中产生的二氧化锰用硫酸草酸溶液除去，甲醛与品红亚硫酸作用生成蓝紫色醌型色素，与标准系列比较定量。 三、实验试剂

1. 高锰酸钾－磷酸溶液 称取3g高锰酸钾，加入15m1 85％磷酸溶液及70mL水的混合液中，待高锰酸钾溶解后用水定容至100mL。贮于棕色瓶中备用。

2. 草酸－硫酸溶液 称取5g无水草酸（H2C2O4）或7g含2个结晶水的草酸（H2C2O2·2H2O），溶于1：1冷硫酸中，并用1：1冷硫酸定容至100mL。混匀后，贮于棕色瓶中备用。

3．品红亚硫酸溶液 称取0.lg研细的碱性品红，分次加水（80℃）共60mL，边加水边研磨使其溶解，待其充分溶解后滤于100mL容量瓶中，冷却后加10mL（10％）亚硫酸钠溶液，lmL盐酸，再加水至刻度，充分混匀，放置过夜。如溶液有颜色，可加少量活性炭搅拌后过滤，贮于棕色瓶中，置暗处保存。溶液呈红色时应弃去重新配制。

4. 甲醇标准溶液 准确称取1.000g甲醇（相当于1.27mL）置于预先装有少量蒸馏水的100mL容量瓶中，加水稀释至刻度，混匀。此溶液每毫升相当于10mg甲醇，置低温保存。

5．甲醇标淮应用液 吸取10.0mL甲醇标准溶液置于100mL容量瓶中，加水稀释至刻度，混匀。此溶液每毫升相当于1mg甲醇。

6. 无甲醇无甲醛的乙醇制备 取300mL无水乙醇，加高锰酸钾少许，振摇后放置24小时，蒸馏，最初和最后的1／10蒸馏液弃去，收集中间的蒸馏部分即可。

7. 10％亚硫酸钠溶液 称取10g亚硫酸钠固体溶于少量水中，并定容至100mL。

8.白酒 四、实验仪器

分光光度计、25mL具塞比色管、（1mL、2mL、5mL）移液管 五、操作方法

1. 根据待测白酒中含乙醇多少适当取样（含乙醇30％取1.0mL；40％取

0.8mL；50％取0.6mL；60％取0.5mL）于25mL具塞比色管中。

2．精确吸取0.0、0.20、0.40、0.60、0.80、1.00mL甲醇标准应用液（相当于0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mg甲醇）分别置于25mL具塞比色管中，各加入0.3mL无甲醇无甲醛的乙醇。

3．于样品管及标准管中各加水至5mL，混匀，各管加入2mL高锰酸钾－磷酸溶液，混匀，放置10min。

4. 各管加2mL草酸－硫酸溶液，混匀后静置，使溶液褪色。 5. 各管再加入5mL品红亚硫酸溶液，混匀，于20℃以上静置0.5h。 6．以0管调零点，于590nm波长处测吸光度，与标准曲线比较定量。 六、结果计算

七、注意事项

1. 亚硫酸品红溶液呈红色时应重新配制，新配制的亚硫酸品红溶液放冰箱中24～48小时后再用为好。

2. 白酒中其他醛类以及经高锰酸钾氧化后由醇类变成的醛类（如乙醛、丙醛等），与品红亚硫酸作用也显色，但在一定浓度的硫酸酸性溶液中，除甲醛可形成经久不褪的紫色外，其他醛类则历时不久即行消退或不显色，故无干扰。因此操作中时间条件必须严格控制。

3．酒样和标准溶液中的乙醇浓度对比色有一定的影响，故样品与标准管中乙醇合量要大致相等。