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您身边的透析专家--透析袋知识详解

2020-04-11 来源:易榕旅网
透析袋相关知识

原理:

透析的动力是扩散压,扩散压是由横跨膜两边的浓度梯度形成的。是利用小分子能够通过而大分子不能够通过半透膜的原理将分子分离。通常是将小分子和大分子的混合物放进用半透膜制成的透析袋并浸入大量的缓冲液中,袋内小分子就不断通过膜,大分子则被截留。

透析袋选择:

1. 材质选择,多考虑蛋白吸附性:CE纤维素酯化学耐受性及热稳定性,顺序CE 分离的集中分子的分子量差至少5倍,才能使用透析有效达到分离的目的。目前RC膜分子量规格较少,不过能满足大部分用户需求。CE膜的分子量较为齐全,从0.1 KD到1000KD都有。

3. 前处理类型:廉价的膜出厂时都会有甘油并含有极微量的硫化物、重金属和一些具有紫外

吸收的杂质,对蛋白及其他活性物质有害,使用前需去除。即用型的膜生产工艺改进后基本不含上述杂质,可纯水浸泡活化后直接使用。

4. 品牌选择:建议选择专业的能提供支持的厂商,要是一问三不知那就不好了,有些商家连

自己卖的品牌都不清楚,更别提什么认证之类的了。实际上膜的材料并不值钱,制作工艺比较重要。不同厂家生产的膜孔径均一性差别很大,样品截留效率相应不同,而这些并不是肉眼所能观察出来的,如若选择不当,很浪费时间,样品如果珍贵就后悔莫及。

Some tips助您提高透析效率:

1. 采用直径较小的透析膜:透析速度正比于透析浓度梯度差及膜比表面积。同样长度的膜,

扁平宽小的比表面积大。

2. 透析温度升高可加快透析:根据布朗运动原理,温度越高,液体分子运动越剧烈,分子的

扩散速度也越快。此条仅限于对温度不敏感的膜及样品。

3. 搅拌加速:使用搅拌棒或者磁力搅拌器,加速膜两侧的分子浓度差,能有效提高透析效率。 4. 增加透析液更换次数:原理同上面第三条,具体不再重复。

5. 此外,也可以增加透析液与样品的体积比或者采用动态透析可将透析时间缩减为几小时。

透析常见问题:

1. 透析缓冲液选择:常用的透析液为水、PBS、TBS、HEPES、氨基酸缓冲液。若为了保证样品

不被稀释,最好选择不含杂质样品溶剂为透析液。

2. 高盐样品透析:使用盐度逐渐降低的溶液作为缓冲液防止膜管膨胀。

3. 透析膜夹选择:膜夹长度比膜扁平宽多5-10 mm为宜。密封性能很重要,市面上挺多回收

塑料材质的膜夹,样品敏感的尽量选择好一点的夹子以免溶出污染物。

4. 预留空间:预留1/3~1/2的空间防止水进入袋中将袋撑破(尤其是盐分高的蛋白溶液透析过

夜时,体积增加50%是正常的)。 5. 化学耐受性:参考化学兼容性表。

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