HLA-DRB1基因多态性与咳嗽变异型哮喘关系的研究

临床肺科杂志２０１１年３月　第１６卷第３期　３７１　ＨＬＡ．ＤＲＢ１基因多态性与咳嗽变异型哮喘关系的研究　朱淑芬　【摘要】　目的探讨人类白细胞抗原ＨＬＡ—ＤＲＢ１基因多态性与咳嗽变异型哮喘的关系。方法型哮喘患者进行比较，计算各个位点的基因频率，结果进行卡方检验，筛选有意义基因。结果选用序列特异性引物聚合　酶链反应（ＰＣＲ．ＳＳＰ）方法对内蒙古地区咳嗽变异型哮喘患者３５例进行ＨＬＡ－ＤＲＢ１等位基因的检测，并与４６例健康人、４５例典　咳嗽变异型哮喘组、支气管哮喘　组ＨＬＡ—ＤＲＢ１　０９０１基因频率分别为（１７．１４％、１６．６７％）均较健康组（５．４３％）增高（Ｐ＜０．Ｏ１）；ＨＬＡ—ＤＲＢ１　０７０１－０７０２基因频　率分别为（１．４３％、１．１１％）较健康组（１Ｏ．８７％）降低（Ｐ＜０．Ｏ１）。咳嗽变异型哮喘组与支气管哮喘组各基因频率比较无统计学　意义。结论ＨＬＡ　ＤＲＢ１　０９０１基因与咳嗽变异型哮喘、支气管哮喘的发病相关，是内蒙古地区咳嗽变异型哮喘、支气管哮喘患　者的共有易感基因；ＨＬＡ—ＤＲＢＩ　０７０１－０７０２基因位点是咳嗽变异型哮喘、支气管哮喘患者共有的抗性基因。　【关键词】　咳嗽变异型哮喘；支气管哮喘；ＨＬＡ—ＤＲＢ１；ＰＣＲ—ＳＳＰ　Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ　ｂｅｔｗｅｅｎ　Ｈｕｍａｎ　Ｌｅｕｋｏｃｙｔｅ　ａｎｔｉｇｅｎ　ＤＲＢ１（ＨＬＡ－ＤＲＢ１）ｇｅｎｅ　ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍｓ　ａｎｄ　Ｃｏｕｇｈ　ｖａｒｉａｎｔ　ａｓｔｈｍａ　ＺＨＵＳｈｕ－ｆｅｎ．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ　ｏｆＩＣＵ，Ａｆｉｌｆｉａｔｅｄ　ｈｏｓｐｉｔａｌ，ＩｎｎｅｒＭｏｎｇｏｌｉａＭｅｄｉｃａｌＣｏｌｌｅｇｅ，Ｈｏｈｈｏｔ　０１００５０，Ｃｈｉｎａ　【Ａｂｓｔｒａｃｔ】０ｂｊｅｅｔｉｖｅ　Ｔｏ　ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ　ｔｈｅ　ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ　ｂｅｔｗｅｅｎ　Ｈｕｍａｎ　Ｌｅｕｋｏｃｙｔｅ　ａｎｔｉｇｅｎ　ＤＲＢ１（ＨＬＡ—ＤＲＢ１）ｇｅｎｅ　ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍｓ　ｎｄ　Ｃｏｕｇｈ　ｖａｒｉａａｎｔ　ａｓｔｈｍａ（ＣＶＡ）．Ｍｅｔｈｏｄｓ　Ｓｅｑｕｅｎｃｅ—ｓｐｅｃｉｆｉｃ　ｐｒｉｍｅｒ　ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ　ｃｈａｉｎ　ｒｅａｃｔｉｏｎ（ＰＣＲ－ＳＳＰ）ＷａＳ　ｕｓｅｄ　ｔｏ　ｄｅｔｅｃｔ　ｇｅｎｅ　ｆｒｅ—　ｑｕｅｎｃｉｅｓ　ｏｆ　ＨＬＡ　ＤＲＢ１　ａｌｌｅｌｅｓ　ｉｎ　３５　ｃａｓｅｓ　ｏｆ　Ｃｏｕｇｈ　ｖａｒｉａｎｔ　ａｓｔｈｍａ（ＣＶＡ）ｐａｔｉｅｎｔｓ．４６　ｈｅａｌｔｈ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｐｅｏｐｌｅ．４５　ａＳｔｈｍａ　ｐａｔｉｅｎｔｓ．Ｔｈｅ　ｇｅｎｅ　ｆｒｅｑｕｅｎｃｉｅｓ　ｏｆ　ｅａｃｈ　ｓｉｔｅ　ｉｎ　ＨＬＡ—ＤＲＢ１　ｗｅｒｅ　ｃａｌｃｕｌａｔｅｄ．ｔｈｅ　ｄａｔａ　ｗｅｒｅ　ａｎａｌｙｚｅｄ　ｂｙ　Ｃｈｉ－ｓｑｕａｒｅ　ｔｅｓｔ．Ｒｅｓｕｌｔｓ　ＨＬＡ—ＤＲＢ１　０９０１　ａｌｌｅｌｅｓ　ｗｅｒｅ　ｈｉｉｈｅｒ　ｉｇｎ　ＣＶＡ（１７．１４％）ａｎｄ　ａｓｔｈｍａｔｉｃ　ｐａｔｉｅｎｔｓ（１６．６７％）ｃｏｍｐａｒｅｄ　ｗｉｔｈ　ｈｅａｌｔｈ　ｐｅｏｐｌｅ（５．４３％）ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ（Ｐ＜０．Ｏ１）；ＨＬＡ—　ＤＲＢ１￥０７Ｏ１－０７０２　ｉｎ　ＣＶＡ（Ｉ．４３％）ａｎｄ　ａｓｔｈｍａｔｉｃ　ｐａｔｉｅｎｔｓ（１．１１％）ｗｅｒｅ　ｌｏｗｅｒ　ｔｈａｎ　ｈｅａｌｔｈ　ｐｅｏｐｌｅ（１０．８７％）（Ｐ＜０．Ｏ１）．Ｉｔ　ｉｓ　ｎｏ　ｓｉｇｎｉｉｃａｆｎｔ　ｔｏ　ｃｏｍｐａｒｅ　ｗｉｔｈ　ｔｈｅ　ｇｅｎｅ　ｆｒｅｑｕｅｎｃｙ　ｏｆ　ＣＶＡ　ａｎｄ　ｔｈｅ　Ｓｔａｈｍａｔｉｃ　ｐａｔｉｅｎｔｓ．Ｃｏｎｄｕｓｉｏｎｓ　ＨＬＡ－ＤＲＢ１｛０９０１　ａｌｌｅｌｅｓ　ａｒｅ　ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ　ｗｉｔｈ　ｔｈｅ　ｓｕｓｃｅｐｔｉｂｉｌｉｔｙ　ｏｆ　ｂｒｏｎｃｈｉａｌ　ａｓｔｈｍａ　ａｎｄ　ＣＶＡ．ＨＩＪＡ—ＤＲＢＩ｝０７０１－０７０２　ｉｓ　ａ　ｐｒｏｔｅｃｔｉｎｇ　ｇｅｎｅ　ｏｆ　ｂｒｏｎｃｈｉｌ　ａｓｔａｈｍａ　ａｎｄ　ＣＶＡ。　【Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ】　Ｃｏｕｇｈ　ｖａｒｉａｎｔ　ａｓｔｈｍａ；ＨＬＡ—ＤＲＢ１；ＰＣＲ—ＳＳＰ；Ｈａｎ　ｐｅｏｐｌｅ　咳嗽变异型哮喘（简称ＣＶＡ）是以慢性咳嗽为主要或唯　一的一个亚区ＨＬＡ—ＤＲ基因与支气管哮喘的发病关系甚为密　切，而咳嗽变异型哮喘的易感基因、抗性基因研究报道罕见。　因此本课题引入序列特异性引物聚合酶链反应（ＰＣＲ—ＳＳＰ）技　术，对内蒙古地区咳嗽变异型哮喘患者与ＨＩＡ．ＤＲＢ１基因多　态性关系进行研究，进一步从免疫遗传学角度探讨咳嗽变异　型哮喘发病的遗传学特征。　材料与方法　一的一种特殊类型的哮喘，临床上主要表现为咳嗽持续或反　复发作超过一个月，常伴有夜间或清晨咳嗽、痰少、运动后加　重，临床无感染表现，或经较长时间抗生素治疗无效，用支气　管扩张剂可使咳嗽发作减缓，往往有个人或家族过敏症。大　多数学者认为ＣＶＡ与典型支气管哮喘的发病机制相似，在遗　传学上属于多基因遗传病，是遗传和环境因素共同作用的结　果。国际上在对支气管哮喘易感基因的研究中，ＨＬＡ一Ⅱ类基　因与哮喘关系的研究备受关注。现已发现，ＨＩＡ一Ⅱ类基因上　作者单位：０１００５０内蒙古呼和浩特，内蒙古医学院附属医院　）　、研究对象选择祖籍三代居住在内蒙古地区无血缘　关系、异族通婚史，无高血压病、糖尿病、免疫系统疾病、炎性　肠病等与ＨＬＡ相关疾病及家族史的咳嗽变异型哮喘患者３５　）　ｑ　＼　）　巴细胞浸润，缓解哮喘气道炎症。因此下调气道ＮＦ—ＫＢ胞核　阳性淋巴细胞的数量，促进淋巴细胞凋亡，可能是孟鲁司特钠　阻滞哮喘气道炎症的一个重要机制。本实验研究发现哮喘组　大鼠肺组织气管黏膜下层及周围间质中淋巴细胞浸润增多，　肺泡隔增宽。脾脏白髓淋巴细胞区中度增生。同时肺组织、　脾脏组织、胸腺组织冰冻切片后示淋巴细胞中ＮＦ．ＫＢ胞核阳　浸润，缓解哮喘气道的炎症。因此通过抑制ＮＦ—ＫＢ的表达，　减少炎症细胞、炎症介质的释放可能是孟鲁司特钠阻滞哮喘　气道炎症的一个机制。　参考文献　［１］　谢庆玲，温志红，胡琼燕，等．白三烯受体拮抗剂盂鲁司特治疗　儿童哮喘的疗效研究［Ｊ］．中国综合临床，２００５，２１（１２）：１１４４—　１１４５．　性率增高，与正常对照组比较差异明显，这有可能是导致哮喘　气道炎症的重要机制之一。用孟鲁司特钠干预后大鼠的肺组　织气管黏膜下层及周围间质中淋巴细胞浸润减少，肺泡隔增　宽不明显。脾脏白髓淋巴细胞区轻中度增生。肺组织、脾脏　组织、胸腺组织冰冻切片后淋巴细胞中ＮＦ—ＫＢ胞核阳性率下　［２］Ｔａｎｇ　ＭＬＫ，Ｆｉｓｃｕｓ　ＬＣ．Ｉｍｐｏｒｔａｎｔ　ｒｏｌｅｓ　ｆｏｒ　Ｌ—ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ　ａｎｄ　ＩＣＡＭ・１　ｉｎ　ｔｈｅ　ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ　ｏｆ　ａｌｌｅｒｇｉｃ　ａｉｒｗａｙ　ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ　ｉｎ　ａｓｔｈｍａ［Ｊ］．　Ｐｕｌｍ　Ｐｈａｒｍａｃｏｌ　Ｔｈｅｒ，２００１，１４（３）：２０３—２１０．　降，与正常对照组相比差异明显。　［３］　Ｂｏｕｓｑｕｅｔ　Ｊ，Ｄｅｍｏｌｙ　Ｐ，Ｈｕｍｂｅｒｔ　Ｍ．Ｍｏｎｔｅｌｕｋａｓｔ　ｉｎ　ｇｕｉｄｅｌｉｎｅｓ　ａｎｄ　ｂｅｙｏｎｄ［Ｊ］．Ａｄｖ　Ｔｈｅｒ，２００９，２６（６）：５７５—８７．　综上所述，白三烯受体阻滞剂孟鲁司特钠能够抑制哮喘　大鼠气道淋巴细胞ＮＦ－ＫＢ的激活，从而减轻气道淋巴细胞的　［收稿日期：２０１０—１０—０８］　３７２　ｆ临床肺科杂志２０１１年３月　第１６卷第３期　例，支气管哮喘患者４５例，同时选择４６名健康志愿者为正常　设定ＰＣＲ反应程序：９４℃预变性５　ｍｉｎ；９４ｏＣ变性３０　Ｓ；５４ｏＣ退　对照组。研究对象年龄、性别构成比较，差异无显著性（Ｐ＜　火４０　Ｓ；７２℃延伸１　ｍｉｎ，其中变性、退火、延伸共循环３０次，　０．０５）。入选病例均为门诊或住院患者，收集病例分别符合中　最后７２℃过延伸１０　ｍｉｎ。　华医学会呼吸病学分会哮喘组２００５年制定的《咳嗽的诊断与　４、ＰＣＲ产物鉴定：取８　Ｉｘｌ扩增产物，经２％琼脂糖凝胶电　治疗指南》中ＣＶＡ的诊断标准　，２００１年中华结核和呼吸学　泳（４．５　Ｖ／ｃｍ，４０　ｍｉｎ），用多通道凝胶成像系统观察结果，与　会制订的支气管哮喘诊断标准。以上三组成员均为内蒙古籍　标准分子量比较带形的位置。　汉族人群。　三、质量控制　假阴性和假阳性控制：每次ＰＣＲ反应的　二、方法　ＤＮＡ基因型别的判定，必须在有清晰的阳性对照（内对照）扩　１、标本采集：每一研究对象均取静脉血３　ｍｌ，密闭于ＥＤ—　增产物带和阴性对照孔无任何带型出现的前提下进行。　ＴＡ抗凝管中，一８０℃冰箱保存备用。　四、统计处理统计分析应用ＳＰＳＳ　１３．０版本统计软件。　２、ＤＮＡ提取：将上述抗凝静脉血室温解冻后，按照北京　基因频率的计算采用直接计数法。ＨＬＡ—ＤＲＢ１基因频率＝阳　天根生化科技有限公司血液ＤＮＡ提取试剂盒的说明，进行　性基因数／样本数×２，各组间等位基因分布比较选用）（２（卡　ＤＮＡ提取。　方）检验或Ｆｉｓｈｅｒ精确检验，Ｐ＜０．０５有统计学意义。　３、ＨＬＡ．ＤＲＢ１各位点的扩增：①引物：根据参考文献　Ｊ，　设计１０对ＨＬＡ．ＤＲＢ１等位基因的引物，由上海生工生物工程　结　果　技术服务有限公司合成，引物序列及扩增产物大小见表１。　通过对３组人群提取的ＤＮＡ进行ＰＣＲ检测，共检出以　②内对照引物：＿２　在ＨＬＡ—ＤＲＢ１第３内含子内设计，该引物　下１０个等位基因，并在上述人群中呈不同的分布，图１显示　无位点序列特异性，可以作为内对照，序列为：５　一ＴＧＣＣＡＡＧＴ．　１０个不同大小的ＰＣＲ扩增产物。　ＧＧＡＧＣＡＣＣＣＡＡＡ，３　ＧＣＡＴＣＴＦＧＣＴＣＴＧＴＧＣＡＧＡＴ，产生７９６　咳嗽变异型哮喘组、支气管哮喘组ＨＩＡ—ＤＲＢ１　０９０１基　ｂｐ的产物。③配制ＰＣＲ反应体系：每个ＰＣＲ反应体系（总　因频率分别为（１７．１４％、１６．６７％）较健康对照组（５．４３％）增　体积１０　１）包括：２×Ｔａｑ　ＰＣＲ　ＭａｓｔｅｒＭｉｘ　５　ｌ、基因组ＤＮＡ　高（Ｐ＜０．０１）；ＨＬＡ—ＤＲＢ１　０７０１．－０７０２基因频率分别为　（２５　ｎ　１）１　、ＨＬＡ—ＤＲＢ１上、下游引物（１．０　Ｍ）各１　ｌ，　（１．４３％、１．１１％）较健康对照组（１０．８７％）降低（Ｐ＜０．０１）。　内对照引物２　，将反应液在２００　ＰＣＲ管中充分混匀。④　其余各基因频率比较，差异均无统计学意义（见表２）。　表１　ＩｔＬＡ・ＤＲＢ１等位基因的引物序列及产物大小　表２　ＩｔＬＡ．ＤＲＢ１等位基因频率在咳嗽变异型哮喘与支气管哮喘人群及健康人群中的分布　注：　Ｐ＜０．０１　临床肺科杂志１　２　３　４　５　６　７　８　９　１０　Ｍ　２０１１年３月　第１６卷第３期　３７３　０９０１基因频率分别为（１７．１４％、１６．６７％）较健康对照组　（５．４３％）增高（Ｐ＜０．Ｏ１）；ＨＬＡ—ＤＲＢ１　０７０１－０７０２基因频率　分别为（１．４３％、１．１１％）较健康对照组（１０．８７％）降低（Ｐ＜　０．０１）。我们推测ＨＬＡ—ＤＲＢ１　０９０１基因位点是咳嗽变异型　哮喘、支气管哮喘者共有的易感基因；ＨＩＡ—ＤＲＢ１　０７０１—　０７０２基因位点是咳嗽变异型哮喘、支气管哮喘的抗性基因。　从本研究结果来看，咳嗽变异型哮喘与典型支气管哮喘存在　相同的易感基因及抗性基因，考虑咳嗽变异型哮喘是哮喘的　一种特殊类型，进一步证实它们之间存在相同的免疫遗传机　图１　ＨＬＡ－ＤＲＢ１基因电泳图谱　１：ＨＬＡ—ＤＲＢ１｝０１０１－０１０３（２５５ｂｐ）；２：ＨＩ　Ａ－ＤＲＢ１　０８０１－０８０４　制，但在临床上ＣＶＡ以慢性咳嗽为主要或唯一临床表现，而　（２１４ｂｐ）；３：ＨＬＡ—ＤＲＢ１　１２０１－１２０２（２４８ｂｐ）；４：ＨＬＡ－ＤＲＢ１｝０７０１－　０７０２（２３２ｂｐ）；５：ＨＬＡ—ＤＲＢＩ｝１１０１—１１０４（１７６ｂｐ）；６：ＨＬＡ—ＤＲＢ１｝　０９０１（２３６ｂｐ）；７：ＨＬＡ—ＤＲＢ１　１００１（２０４ｂｐ）；８：ＨＬＡ—ＤＲＢ１｝０３０１－　０３０２（１５１ｂｐ）；９：ＨＬＡ・ＤＲＢＩ｛０４０１　ｌ１（２６０ｂｐ）；１０：ＨＬＡ—ＤＲＢ１｝　１５０１—１５０２（１９７ｂｐ）　支气管哮喘以发作性喘息为主要临床症状，是否由于哮喘为　多基因遗传病，ＣＶＡ存在特殊的遗传学特征，需进一步研究　证实。　参考文献　［１］　中华医学会呼吸病学分会哮喘组．《咳嗽的诊断与治疗指南》　［Ｊ］．中华结核和呼吸杂志，２００５；２８（１１）：７３８—７３９．　讨　论　［２］　Ｏｌｅｒｕｐ　ＯＬ，Ｚｅｔｔｅｒｑｕｉｓｔ　Ｈ．ＨｌＪＡ—ＤＲ　ｔｙｐｉｎｇ　ｂｙ　ＰＣＲ　ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ　ｗｉｔｈ　ｓｅｑｕｅｎｃｅ－ｓｐｅｃｉｉｆｃ　ｐｒｉｍｅｒｓ（ＰＣＲ—ＳＳＰ）ｉｎ　２　ｈｏｕｒｓ：ａｎ　ａｌｔｅｒｎａｔｉｖｅ　ｔｏ　ｓｅｒｏｌｏｇｉｃａｌ　ＤＲ　ｔｙｐｉｎｇ　ｉｎ　ｃｌｉｎｉｃａｌ　ｐｒａｃｔｉｖｅ　ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ　ｄｏｎｏｒ－－ｒｅｃｉｐｉ－・　咳嗽变异性哮喘（ＣＶＡ）发病机制尚未完全阐明，多数学　者认为它与典型哮喘的发病机制相同，是以慢性气道变应性　炎症及气道高反应为本质　。在遗传学上属多基因遗传病，　呈现明显的家族聚集现象，其发病机制复杂，涉及免疫、遗传、　环境等诸多因素，但免疫遗传学的机制是其内因　。ＨＬＡ一Ⅱ　类基因是一组免疫应答基因，具有高度多态性，其基因多态性　决定了ＨＬＡ抗原分子的多态性，也就决定了ＨＩＪＡ系统参与　的免疫反应的多样性和复杂性。ＨＬＡⅡ类基因中以ＤＲＢ１最　具多态性，它包括１６０个以上的等位基因，对于免疫应答起着　决定性作用　，许多研究表明ＨＬＡ—ＤＲＢ１与支气管哮喘的发　病最为密切，如２００６年Ｋｉｍ　ＳＨ。。　等人报导在韩国异氰化物　ｅｎｔ　ｍａｔｃｈｉｎｇ　ｉｎ　ｃａｄａｖｅｒｉｃｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｔｉｓｓｕｅ　Ａｎｔｉｇｅｎｓ，　１９９２，３９（４）：２２５—２３５．　［３］　张帆，苏晓林．信必可都保治疗咳嗽变异性哮喘临床疗效观察　［Ｊ］．中国医药导刊，２００９，１ｌ（５）：７８５—７８６．　［４］　韩爱萍．人类白细胞抗原基因与哮喘的遗传易感性及研究进展　［Ｊ］．中国实用儿科杂志，２００６，２１（１２）：９４９—９５１．　［５］　鲁继荣，焦立新，王承训．小儿哮喘与ＨＬＡ的相关性研究［Ｊ］．　临床儿科杂志，２００６，２４（１）：１６—１８．　［６］Ｋｉｍ　ＳＨ，ｅｔ　ａ１．ＨＬＡ　ＤＲＢ１　１５－ＤＰＢ１￥０５　ｈａｐｌｏｔｙｐｅ：ａ　ｓｕｓｃｅｐｔｉｂｌｅ　ｇｅｎｅ　ｍａｒｋｅｒ　ｆｏｒ　ｉｓｏｃｙａｎａｔｅ—ｉｎｄｕｃｅｄ　ｏｃｃｕｐａｔｉｏｎａｌ　ａｓｔｈｍａ［Ｊ］．Ａｌｌｅｒ－　ｇＹ，２００６　Ｊｕｌ；６１（７）：８９１—４．　导致的哮喘病人中ＨＬＡ　ＤＲＢ１　１５是易感基因。吉林大学第　一医院鲁继荣等　提出ＨＬＡ—ＤＲＢ１　９、ＨＬＡ—ＤＲＢ１　１０为　［７］　王家蔚．支气管哮喘儿童ＨＩ』Ａ－ＤＲＢ１、ＤＱＢ１免疫遗传学分析　［Ｊ］．浙江实用医学，２００７，１２（４）：２４０—２４１．　［８］谢庆玲；秦岭．广西壮、汉族哮喘儿童人类白细胞抗原一Ｂ、一　汉族小儿支气管哮喘的易感基因，ＨＬＡ—ＤＲＢ１　１为保护性　基因。湖州市王家蔚等　经实验表明，ＨＬＡ—ＤＲＢ１　０９０１为　支气管哮喘患者的易感基因，ＨＬＡ—ＤＲＢ１　１５０１为保护基　ＤＲ基因的多态性［Ｊ］．实用儿科临床杂志，２００８；２３（４）：２５３—　２５６．　因。２００８年谢庆玲、秦岭　等研究广西壮、汉族哮喘儿童人　类白细胞抗原ＤＲ基因的多态性发现：ＨＬＡ—ＤＲＢ１　０７０Ｘ和　ＨＬＡ—ＤＲＢ１　１１ＸＸ等位基因在汉族哮喘与健康对照组比较　［９］　Ｍｏｖａｈｅｄｉ　Ｍ，Ｍｏｉｎ　Ｍ．Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ　ｏｆ　ＨＬＡ　ｃｌａｓｓ　ＩＩ　ａｌｌｅｌｅｓ　ｗｉｔｈ　ｃｈｉｌｄ—　ｈｏｏｄ　ａｓｔｈｍａ　ａｎｄ　Ｔｏｔａｌ　ＩｇＥ　ｌｅｖｅｌｓ［Ｊ］．Ｉｒａｎ　Ｊ　Ａｌｌｅｒｇｙ　Ａｓｔｈｍａ　ｌｍｍｕ—　ｎｏ１．２００８　Ｄｅｃ；７（４）：２１５—２０．　有显著差异（Ｐ＜０．０５）。同年伊朗Ｍｏｖａｈｅｄｉ　Ｍ　等报导　ＨＬＡ—ＤＲＢ１　１２在哮喘组中显著增高。２００９年韩国Ｃｈｏｉ　ＪＨ　研究发现：ＨＩＪＡ　ＤＲＢ１　１５０１是甲苯二异氰酸盐获得性　哮喘中的致病基因。Ｍｏｆｆａｔｔ…　、　报道罕见。　［１０］Ｃｈｏｉ　ＪＨ，Ｌｅｅ　ＫＷ．Ｔｈｅ　ＨＬＡ　ＤＲＢ１　１５０１一ＤＱＢ１　０６０２－ＤＰＢ１　０５０１　Ｈａｐｌｏｔｙｐｅ　Ｉｓ　ａ　Ｒｉｓｋ　Ｆａｃｔｏｒ　ｆｏｒ　Ｔｏｌｕｅｎｅ　Ｄｉｉｓｏｃｙａｎａｔｃ—Ｉｎｄｕｃｅｄ　Ｏｃｃｕｐａｔｉｏｎａｌ　Ａｓｔｈｍａ［Ｊ］．Ｉｎｔ　Ａｒｃｈ　Ａｌｌｅｒｇｙ　Ｉｍｍｕｎｏ１．２００９　Ｍａｙ　１２；　１５０（２）：１５６—１６３．　等没有发现ＨＬＡ．ＤＲ　与哮喘有相关性。但目前关于ＣＶＡ与ＨＬＡ基因多态性研究　本课题针对已知有表达的１０种ＨＩＡ—ＤＲＢ１等位基因，　设计了１０对引物，采用具有灵敏度高、准确性强的ＰＣＲ—ＳＳＰ　技术，在ＤＮＡ分子水平上研究咳嗽变异性哮喘患者与ＨＬＡ—　ＤＲＢ１的关联性。通过对咳嗽变异性哮喘３５例，支气管哮喘　患者４５例、健康汉族４６例，进行ＨＩ　Ａ—ＤＲＢ１等位基因频率的　［１１］Ｍｏｆｆａｔｔ　Ｍ　Ｆ，Ｆａｕｘ　Ｊ　Ａ，Ｌｅｓｔｅｒ　Ｓ，ｅｔ　ａ１．Ａｔｏｐｙ，ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ　ｆｕｎｃｔｉｏｎ　ａｎｄ　ＨＬＡ—ＤＲ　ｉｎ　Ａｂｏｆｉｉｇｎａｌ　Ａｕｓｔｒｌｉａａｎ［Ｊ］．Ｈｕｍ　Ｍｏｌ　Ｇｅｎｅｔ，２００３，　１２（６）：６２５．　［１２］Ｌｉ　ＰＫ，Ｌａｉ　ＣＫ，Ｐｏｏｎ　ＡＳ，ｅｔ　ａ１．Ｌａｃｋ　ｏｆ　ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ　ｂｅｔｗｅｅｎ　ＨＬＡ—ＤＱ　ａｎｄ—ＤＲ　ｇｅｎｏｔｙｐ－ｅｓ　ａｎｄ　ａｓｔｈｍａ　ｉｎ　ｓｏｕｔｈｅｒｎ　Ｃｈｉｎｅｓｅ　ｐａｔｉｅｎｔｓ［Ｊ］．　Ｃｌｉｎ　Ｅｘｐ　Ａｌｌｅｒｇｙ，１９９５，２５（４）：３２３．Ｊ，１９９６，９（２）：２０７．　［收稿日期：２０１０—０７—０６］　检测，发现咳嗽变异型哮喘组、支气管哮喘组ＨＬＡ—ＤＲＢ１