桔梗皂苷提取及桔梗质量控制新进展

综　述　ＣＨＩＮＡ　ＦｏＲＥＩＧＮ　ＭＥＤＩＣＡＬ　桔梗皂苷提取及桔梗质量控制新进展①　周永妍程秀民　于海英　（山东大学药学院山东济南２５００１２）　【摘要】本文对近１Ｏ年来国内外有关桔梗的研究情况进行文献调研，综述桔梗皂苷的提取方法及桔梗质量控制的新进展，为桔梗的开　发利用和质量研究提供参考。　【关键词】桔梗　桔梗皂苷　提取　质量控制　【中图分类号】Ｒ　２　８　２　【文献标识码】Ａ　【文章编号】１　６７４一Ｏ７４２（２ＯＯ９）０２（ｂ）一Ｏｌ５７－０３　桔梗Ｐｌａｔｙｃｏｄｏｎ　ｇｒａｎｄｉｆｌｏｒｕｍ（Ｊａｃｑ．）Ａ．Ｄ　Ｃ．为桔梗科　于桔梗皂苷提取的新技术新方法主要有：超声波法、大孔吸附树脂　Ｃａｍｐａｎｕｌａｃｅａｅ桔梗属植物桔梗的根。始载于　神农本草经》，列为下　法、超临界ｃｏ，萃取法等。　品，为我国传统常用中药材。《神农本草经》记载，桔梗性平，味苦，辛。　１．１超声波法　具有化痰止咳、利咽开音、宣畅肺气、排脓消痈的功效。现代药理学　超声波是一种高频机械波，频率范围在１５－６０ＭＨｚ的超声，常被　研究表明桔梗有免疫调节、抗炎、祛痰、保肝等作用ｌ１】。桔梗中主要　用于过程强化和引发化学反应。超声波在有　含有皂苷、黄酮、甾醇、多聚糖、酚类、聚炔、脂肪油、脂肪酸、氨　成分提取等方面已有了一定的应用。吴敬涛　等采用水作为溶剂，利用　基酸、无机元素、挥发油等成分ｌ２Ｊ。其主要活．陛成分为皂苷类，桔梗　超声波法制备桔梗总皂苷，建立了超声波一水提法制备桔梗总皂苷的方　的皂苷类成分均属于齐墩果烷型五环三萜衍生物，可分为３类：桔梗酸　法，该法提取桔梗总皂苷，快速、高效，结合甲醇、乙醚纯化，采用比色　类、桔梗二酸类、远志酸类【］Ｉ。　中国药典》２００５版一部以总皂苷　法测定其纯度，经测定其产率为４．２％，纯度为５８．９％。和传统方法相　含量作为桔梗的质量评价标准。本文就目前桔梗总皂苷的提取及桔梗　比，不仅产率倍增，还能大大减少工作量、节约成本，是一种适合工业　质量控制的最新进展进行了综述。　提取的方法。　１桔梗皂苷的提取　１．２　大孔吸附树脂法　桔梗的主要活性成分为皂苷类成分，易溶于甲醇、乙醇、水　大孔吸附树脂是一种不含交换基团，具有大孔结构的高分子　饱和的正丁醇等溶剂，桔梗皂苷的提取方法很多，但传统的桔梗　吸附剂，其本身由于范德华力或氢键的作用具有吸附性；又因其　皂苷制备方法溶剂消耗大、生产周期长、产品纯度低，难以满足　具有网状结构和很高的比表面积而有筛选性能Ｉ　。大孔吸附树脂　现代化生产的需求，亟待研究应用新的快速有效的提取方法。目前用　技术在皂苷类化学成分分离纯化方面的应用比较成熟１６１。杨献文等Ｉ７１　ｂｏｌｙｔｉｃ　ｔｈｅｒａｐｙ［Ｊ】．Ｉｎ　Ｒｕｔｈｅｒｆｏｒｄ　ＲＢ：Ｖａｓｃｕｌａｒ　ｓｕｒｇｅｒｙ．５ｔｈ　［１１］Ｔａｔｅｉｓｈｉ－Ｙｕｙａｍａ　Ｅ，Ｍａｔｓｕｂａｒａ　Ｈ，Ｍｕｒｏｈａｒａ　Ｔ，ｅｔ　ａ１．Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ　ｅｄ．Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ：ＷＢ　Ｓａｕｎｄｅｒｓ　Ｃｏ，２０００，４５７～４７５．　ａｎｇｉｏｇｅｎｅｓｉｓ　ｆｏｒ　ｐａｔｉｅｎｔｓ　ｗｉｔｈ　ｌｉｍｂ　ｉｓｃｈａｅｍｉａ　ｂｙ　ａｕｔｏｌｏｇｏｕｓ　ｔｒａｎｓ・　［６】张培华，蒋米尔，黄英．超声消融血栓【Ｊ】．外科理论与实践，１９９８，　ｐｌａｎｔａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｂｏｎｅ—ｍａｒｒｏｗ　ｃｅｌｌ：ａ　ｐｉｌｏｔ　ｓｔｕｄｙ　ａｎｄ　ａ　ｒａｎｄｏｍｉｚｅｄ　３（４）：ｉ９５～ｌ９６．　ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ　ｔｒｉａｌ［Ｊ】．Ｌａｎｃｅｔ，２００２，３６０（９３３１）：４２７～４３５．　【７】黄新天，蒋米尔，陆民，等．ＰＴＡ及血管内支架在治疗下肢动脉硬　［１２】谷涌泉，郭连瑞，张建，等．自体骨髓干细胞移植治疗严重下肢缺血　化闭塞症的应用价值ＩＪ】．中国实用外科杂志，２０００，２０（６）：３４７～　１例【Ｊ］．中国实用外科杂志，２００３，２３（１１）：６７０．　３４８．　［１３】谷涌泉，张建，郭连瑞，等．自体骨髓干细胞移植治疗下肢严重缺血　【８】Ｌｕｎｄｑｕｉｓｔ　ＰＢ，Ｋａｌｉｎ　Ｂ，Ｏｌｏｆｓｓｏｎ　Ｐ，ｅｔ　ａ１．Ｅｎｄｏｖａｓｃｕｌａｒ　ｔｒｅａｔｍｅｎｔ　ｏｆ　３２例报告【Ｊ】．中国临床康复杂志，２００４，３５（８）：７９７０～７９７２．　ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｔｉｃ　ｌｏｗｅｒ　ｌｉｍｂ　ｌｅｓｉｏｎｓ　ｕｓｉｎｇ　ａ　ＰＴＦＥ—ｃｏｌｌａｒｅｄ　ｓｔｅｎｔｇｒａｆｔ　【１４）董国祥．造血千细胞移植在慢性下肢缺血治疗中的意义和发展前　【Ｊ】－Ｊ　Ｅｎｄｏｖａｓｃ　Ｔｈｅｒ，２０００，７（３）：２２１～２２６．　景［Ｊ】．中国实用外科杂志，２００５，４（２５）：２４Ｉ～２４２．　【９】Ａｌｌｅｎ　ＢＴ，Ｈｏｖｓｅｐｉａｎ　ＤＭ，Ｒｅｉｌｌｙ　ＪＭ，ｅｔ　ａ１．Ｅｎｄｏｖａｓｃｕｌａｒ　ｓｔｅｎｔｇｒａｆｔｓ　ｆｏｒ　ａｎｅｕｒｉｓｍａｌ　ａｎｄ　ｏｃｃｌｕｓｉｖｅ　ｖａｓｃｕｌａｒ　ｄｉｓｅａｓｅ［Ｊ１．Ａｍ　Ｊ　Ｓｕｒｇ，１９９８，　【收稿日期ｌ　２００８－１　２－０９　１７６（６）：５７４～５８０．　【１０］Ｔｒｅｉｍａｎ　ＧＳ，Ｗｈｉｔｉｎｇ　ＪＨ，Ｔｒｅｉｍａｎ　ＲＬ，ｅｔ　ａ１．Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ　ｏｆ　１ｉｍｂｔｈｒｅａｔｅｎｉｎｇ　ｉｓｃｈｅｍｉａ　ｗｉｔｈ　ｐｅｒｃｕｔａｎｏｕｓ　ｉｎｔｅｎｔｉｏｎａｌ　ｅｘｔｒａｌｕｍｉｎａｌ　ｒｅｃａｎａｌｉｚａｔｉｏｎ：Ａ　ｐｒｅｌｉｍｉｎａｒｙ　ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ［Ｊ］＿Ｊ　Ｖａｓｃ　Ｓｕｒｇ，　２００３，３８（１）：２９～３５．　①基金项目：国家支撑计划（Ｎｏ．２００６ＢＡ１０６Ａ０１—０５）。　作者简介：周永妍（１９８４～），女，汉族，硕士研究生。　＋通讯作者：；１￣：（１９５２～）男，教授，硕士生导师。主要研究方向：中草药有效成分提取、中药色谱分析。　ＣＨＩＮＡ　ＦＯＲＥＩＧＮ　ＭＥＤＩＣＡＬ　ＴＲＥＡＴＭＥＮＴ中外医疗　１　５　７　综　述　为研究桔梗总皂苷的提取分离工艺，于室温下采用７ｏ％乙醇浸提，浸提　２．１．２高效液相指纹图谱法李喜凤等“　Ｊ研究桔梗药材的高效　物经浓缩和脱脂等处理后，再用ＺＴＣ—ｌ大孔吸附树脂吸附，利用水和　液相指纹图谱。采用ＲＰ—ＨＰＬＣ法，测定了２５个不同桔梗样品。色　２０％、３０％、４０％、５０％、９５％的乙醇溶液洗脱提纯桔梗总皂苷，　谱条件为Ｈｙｐｅｒｓｉｌ　Ｃ１８柱（２５０ｒａｍ　Ｘ　４．６ｒａｍ，５　ｍ），流动相为乙　结果平均得率为２．０５％。该法操作简单，得率高，成本低，为桔梗总皂　腈一０．０５ｍｏＬ／ＬＨ　ＰＯ　系统，梯度洗脱，流速为０．５ｍＬ／ｍｉｎ，检测波长　苷的工业化生产提供了新的方法，但尚存在提取周期过长等问题，因此　为２１０ｒａｎ，柱温３０￣Ｃ。结果共找到１７个共有峰，建立了桔梗的高效液　杨献文等［８】进一步研究探索用水提一大孔吸附树脂柱色谱分离制备桔　相指纹图谱。该方法简单，重现性好，可以用于桔梗药材的鉴定与评　梗总皂苷的方法，并系统研究了影响水提取桔梗总皂苷的各种因素，据　价，为控制桔梗药材的质量提供可靠的科学依据。　此建立水提大孔吸附树脂柱色谱制备桔梗总皂苷的方法，结果平均得　２．２光谱法　率为１．６０３％。该法操作简单、快速且成本低，适于工业化生产。　对桔梗中无机元素进行分析，发现含有ｌ７种以上无机元素，包括　１．３超临界ＣＯ　萃取法　Ｃｕ、Ｚｎ、Ｎｉ、Ｍｎ、Ｃｒ、Ｓｒ、Ｆｅ、Ｖ等８种必需微量元素，其中Ｃｕ、　作为一种新型提取分离技术，超临界ＣＯ　萃取技术已成为中药现　Ｚｎ、Ｍｎ含量均较高。薛国庆等“　分别采用湿法、干法和先灰化再　代化的关键技术之一。超临界ＣＯ　萃取中药有效成分，与传统方法相　用硝酸一高氯酸（由，４：１）常压微沸条件下消解桔梗样品，用火焰原　比，具有提取率高、操作温度低、中药有效成分不被破坏、无有机溶　子吸收法测定栽培桔梗中的金属元素Ｋ、Ｍｇ、Ｃａ、Ｃｕ、Ｚｎ、Ｍｎ、Ｆｅ、　剂残留和工艺简单等优点ｉ　。中药有相当一部分品种完全可以单　Ｃｏ、Ｎｉ、Ｃｄ、Ｃｒ和Ｐｂ含量。研究了不同消化方法对测定栽培桔　独采用超临界ｃ０，萃取技术，关键是如何根据目标产物选择好夹带剂　梗中的金属元素含量的影响以及测定不同元素的仪器最佳工作条件，　的问题。卢朝国等…　研究了超临界ＣＯ，萃取桔梗中有效成分的工艺，　并做了方法的准确度和精密度考察。该方法所用仪器设备简单，操作　以桔梗总皂苷的产率为考察指标，对比了无水乙醇、甲醇、丙酮、正　步骤简便，是研究中药材中金属元素含量的可靠方法。　丁醇、乙酸乙酯等５种夹带剂，分析了萃取温度、萃取压力、萃取时　２．３质谱法　间以及夹带剂用量等４种因素的影响。通过正交实验，确定了最佳萃　徐保军等ｌ１　对桔梗皂苷的化学成分进行了提取分离与纯化，　取工艺条件，平均萃取率为０．３６３％。　利用电喷雾质谱仪对桔梗皂苷类成分进行跟踪分析鉴定。通过　１．４其他提取方法　对单体化合物各级激发产生碎片峰进行纵向分析及不同单体的　随着新提取分离技术的发展，微波提取、超滤、新型吸附剂　横向对比分析，寻找桔梗皂苷类的结构规律，从而鉴定已知结构　电泳和色谱分离、膜分离、半仿生提取法、分子蒸馏等技术用　的皂苷成分，并为未知结构的成分提供信息。而后徐宝军等＿Ｉ　改　于中药有效成分的提取，为中药现代化重点推广的技术，这些高　进了桔梗皂苷Ｄ的提取、分离及鉴定方法。利用大孔树脂脱糖　新技术也为桔梗有效成分的提取分离提供更多可行的方式。但　脱色及薄层硅胶作色谱系介质和电喷雾质谱对目标化合物进行　Ｅｌ前如超滤、膜分离等某些新方法尚未应用于桔梗皂苷的提取　跟踪分析，使高纯度的目标化合物的分离和鉴定工作得以简化。　研究中。　２．４　分子生物学方法　２　桔梗的质量控制研究新进展　随着现代分子生物学的迅猛发展，分子生物学方法已在农、　中国药典２　０　０　５版一部采用显微鉴别和薄层鉴别进行桔梗的　林、医学及动、植物和微生物学的各个领域得到了广泛应用。用　定性分析；采用重量法测定桔梗总皂苷，作为桔梗的定量指标，操　于桔梗鉴别的分子生物学方法主要有：随机扩增多态ＤＮＡ技术、　作繁琐，难以判断药材的真伪优劣。研究者不断开展新方法的研　聚丙烯酰胺凝胶电泳法。　究，以更好进行质量控制。现阶段在这些新方法中应用较多的主　２．４．１　随机扩增多态ＤＮＡ（ＲＡＰＤ）技术　随机扩增多态　要有：色谱法、光谱法、质谱法、分子生物学方法。　ＤＮＡ（ｒａｎｄｏｍ　ａｍｐｌｉｉｆｅｄ　ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｃ　ＤＮＡ简称ＲＡＰＤ）是运用　２．１　色谱法　随机引物扩增寻找多态性Ｄ　Ｎ　Ａ片段，用以作为分子标记的一种　色谱法中应用最多的为高效液相色谱法，高效液相法的分离　分子生物学研究手段，具有快速、简便等优点ｉ　】。严一字ｎ　等对　效能高、分析速度快等特点正好适应中药成分的多样性、复杂　取自中国、日本、韩国和朝鲜等东亚地区的２４个桔梗种质资源，　性等特点，且其不受样品挥发性的限制，所以ＨＰＬＣ法在中药化　利用ＲＡＰＤ—ＰＣＲ（聚合酶链式扩增反应）标记方法，分析了其遗传变异　学成分分析方面得到了迅速的发展和应用【ｌ　。　和遗传关系。结果表明：用ｌ１个引物扩增出１３１条谱带，平均每个引　２．１．１　针对单一成分分析桔梗皂苷主含桔梗皂苷Ｄ，为桔　物扩增出ｌ１．９条谱带，并扩增出６１个多态性谱带，平均每个引物扩增　梗镇咳主要活性成分，桔梗质量评价方面报道最多的是桔梗皂苷　出５．５条多态性谱带，显示出了相对高的多态率（４６．６％）；得到的　Ｄ的含量测定。通常采用反相Ｃ　ｌ　８柱进行皂苷类的分离分析，许　ＲＡＰＤ数据的遗传相似性范围为０．６６ｇ～０．９９４，并以遗传相似系数　传莲等…　用反相高效液相色谱分析方法，对东北、华北、华中３　Ｏ．７８为标准，将２４个桔梗种质资源分为７个类群，地理分布不同的桔　个地区１０个产地样品中的桔梗皂苷Ｄ含量进行了定量分析，为桔　梗种质资源之间也有差异。为桔梗的分类、鉴定，以及杂交育种的亲　梗质量标准规范化研究提供科学依据。朱丹妮等…　首次采用高　本选择提供重要参考依据。　效液相一蒸发光散射检测器色谱法，以Ｃ　ｌ　８为色谱柱测定桔梗皂　２．４．２聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＰＡＧＥ）法植物类中药细胞内普　苷Ｄ含量。通过对８种不同来源的桔梗材料和２０个四倍体株系桔梗　遍含有受遗传基因控制的蛋白质分子，且具有种的特　陛和稳定眭，用　皂苷Ｄ含量的测定说明此法是测定桔梗皂苷Ｄ的较佳方法，可作为桔　聚丙烯酰胺凝胶电Ｎ（ｐｏｌｙａｃｒｙｌａｒｎｉｄｅ　ｇｅｌ　ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ简ｆｒ，ＰＡＧＥ）　梗质量控制和评价的　一种可靠的技术。　技术进行蛋白质分析可以达到中药品质的鉴别，已显示出广阔的应用　１　５８　中外医疗ＣＨＩＮＡ　ＦＯＲＥＩＯＮ　ＭＥＤＩＣＡＬ　ＴＲＥＡＴＭＥＮＴ　综　述　前景　Ｊ。石俊英等　对不同产地的桔梗进行聚丙烯酰胺凝胶电泳指　纹图谱的鉴另４研究。分别对蛋白质（Ｐ　ｒ　ｏ）、过氧化物酶同工酶　（ＰＯＤ）、酯酶同工酶（ＥＳＴ）进行ＰＡＧＥ指纹图谱分析。结果不同　产地桔梗的Ｐｒｏ—ＰＡＧＥ图谱差异极小；ＰＯＤ—ＰＡＧＥ与ＥＳＴ—ＰＡＧＥ　图谱在谱带分布及数量上均具有显著ｌ生差异，分别具有各自的鉴别谱　带。ＰＯＤ－ＰＡＧＥ与ＥＳＴ—ＰＡＧＥ指纹图谱可作为鉴别不同产地桔梗　的有效方法。　３结语　桔梗主要分布在东亚及俄罗斯的远东地，在我国数省市均有　栽培，资源非常丰富，为常用的药食两用植物。桔梗的传统应用　可认为是药材全成分的应用，而桔梗皂苷提取物只能作为桔梗的　一个活性部位发挥某方面的医疗作用，而不能作为桔梗的替代　品。因此，对桔梗的提取研究，可以根据不同的应用目的，研究不　同的提取工艺，制备各种不同有效部位（群）的标准提取物，为桔梗　的持续深化研究提供稳定的物质基础。　桔梗的质量控制手段相对比较落后，鉴别手段还是以基源、　性状、显微、理化为主，尚无人进行系统的生物鉴别及指纹图谱　的研究，２００　５版药典桔梗的含量测定采用的还是总苷称重法，不　仅方法较繁锁，而且不能代表整体质量。桔梗质量评价方面报道　最多的是桔梗皂苷Ｄ的含量测定，通过对文献的整理发现含量测　定结果差别很大，表明方法学研究还不完善。中药指纹图谱尤其　ＨＰＬ　Ｃ指纹图谱具有特征性和稳定性，通过全面系统地研究，制订　标准图谱，完善质量控制指标，可对桔梗及其提取物进行有效的　质量控制。　参考文献　【１】宋杨，齐云．桔梗的药理研究进展［Ｊ】．中国药房，２００６，１　７（２）：　ｌ４０～１４１．　【２】郭丽，张村，李丽，等．中药桔梗的研究进展（Ｊ】．中国中药杂志，　２００７，３２（３）：１８１～１　８５．　【３１何美莲，程４，＿２，陈家宽，等．１桔梗皂苷类成分及其质量分析【Ｊ】．中　药新药与临床药理，２００５，１６（６）：４５７．　［４】吴敬涛，杨桂文．超声波一水提法制备枯梗总皂苷【Ｊｊ，济南大学学　报（自然科学版），２０００，２０（２）：１３５～１３７．　【５】王跃生，王洋．大孔吸附树脂研究进展…．中国中药杂志，２００６，３１　（１２）：９６１～９６５．　［６　Ｊ梁少玲，蔡宇，杨燕霞，等．大孔树脂吸附在黄酮及皂苷类成分分离　纯化中的应用【Ｊ１．时珍国医国药，２００６，１７（２）：２７７～２７８．　【７】杨献文，刘墨祥，刘云刚，等．大孔吸附树脂柱色谱法分离桔梗总皂　苷【Ｊ】．吉林农业大学学报，２００１，２３（２）：５０～５２．　［８】杨献文，刘墨祥，刘桂艳，等．水提一大孔吸附树脂柱色谱法制备桔　梗总皂苷【Ｊ】．扬州大学学报（农业与生命科学版），２００２，２３（１）：１５～　１　７．　【９】葛发环，辉国钧，李菁，等．中药现代化与超临界流体萃取的应用【Ｊ】．　天然产物研究与开发，２０００，１２（３）：８８～９３．　【ｌ０】葛发环．再论中药现代化与超临界二氧化碳萃取技术ｆＪ　Ｊ．中药材，　２００３，２６（５）：３７３～３７６．　【１１】卢朝国，赵俊廷，黄雪，等．超临界ＣＯ，萃取桔梗有效成分的工艺　研究ｆＪ】．河南工业大学学报（自然科学版），２００７，２８（１）：４３～４５．　［１２］李喜凤，董诚明，刘素梅．桔梗现代分析方法昕究的文献探讨【Ｊ】．河南　中医学院学报，２００６，２１（２）：４１－４３．　［１３】许传莲，杨腊虎，郑毅男，等．应用ＲＰ—ＨＰＬＣ法测定不同产地中　桔梗皂苷Ｄ［Ｊ】．吉林农业大学学报，１９９９，２１（４）：３５～３８．　【１４］朱丹妮，舒娈，郅慧，等．ＨＰＬＣ－ＥＬＳＤ法测定桔梗中桔梗皂苷Ｄ　的含量【Ｊ］．植物资源与环境学报，２００１，１０（４）：１ｌ～ｌ３．　【１５］李喜凤，刘素梅，李振国，等．桔梗的高效液相指纹图谱研究　．中成　药，２００７，２９（９）：１３４１～１３４３．　【１６１薛国庆，韩玉琦，宋海，等．ＦＡＡＳ法测定不同消化方法栽培桔梗　中Ｉ　２种金属元素含量的研究　．光谱学与光谱分析，２００７，２７（６）：　１２３１～ｌ２３４．　【１７】徐保军，许传莲，崔勐，等．应用质谱分析法鉴定桔梗皂苷类成分［Ｊ】．　吉林农业大学学报，１９９９，２１（１）：３５－４１．　［１８】徐宝军，郑毅男，崔勐，等．电喷雾串联质谱法鉴定桔梗皂苷Ｄ［Ｊ】．中国　药物化学杂志，２０００，１０（３）：１９３～１９６．　［１９】Ｚｈａｏ　Ｘｉｈｕａ，Ｗａｎｇ　Ｍａｎｙｍｇ．Ｏｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎ　ｏｆ　ＲＡＰＤ　Ｃｏｎ－　ｄｉｔｉｏｎｓ　ｏｆ　Ｒｈｏｄｏｄｅｎｄｒｏｎ【Ｊ】．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，２００５，１５（１）：４１～　４３．　［扣］严一字，吴基日．利用ＲＡＰＤ标记分析东亚地区桔梗的亲缘关系［Ｊ】．植　物研究，２００７，２７（３）：３０９－３１２．　［２１】李喜凤，薛秋萍，董诚明，等．河南不同产地与年限桔梗的聚丙烯酰　胺凝胶电泳分析…．时珍国医国药，２００７，ｌ８（１）：３５～３６．　［２２１石俊英，巩丽丽，张会敏．不同产地桔梗的聚丙烯酰胺凝胶电泳指纹　图谱鉴别研究【Ｊ】．中国药学杂志，２００７，４２（１９）：１４６２～１４６４．　【收稿日期】２００８－１　０－２８　ＣＨＩＮＡ　ＦＯＲＥＩＧＮ　ＭＥＤＩＣＡＬ　ＴＲＥＡＴＭＥＮＴ中外医疗　１　５　９