VITEK2—compact细菌分析系统在微生物鉴定应用上的探讨

VITEK2—compact细菌分析系统在微生物鉴定应用上的探讨

随着现代科技日新月异高速的发展，自动化、电脑智能化技术先进的自动化仪器在临床实验室得到广泛的应用。为提高检验医学领域的技术水平起到了很大的促进作用，而微生物学检验由于其自身的一些特殊性，自动化进程发展较生化学，免疫学进程慢，但其自动化智能化检测亦为大势所趋。一些适合于微生物室使用的自动化仪器近年相续问世，目前，我省大部份医院临床实验室装备了半自动或全自动细菌分析仪系统，我院检验科于2013年购进梅里埃VITEK 2-compact细菌分析仪系统。为了解该仪器在细菌鉴定上的效果，我们应用该仪器对中国生物制品检定所购进的多个标准菌株及区临床检验中心颁发的细菌学检验室间质评标本菌株进行鉴定，并对分析总结其对细菌种属鉴定的性能。现将以2013～2014年省临床检验中心回报的正确结果多个标准菌株及中国生物制品检定所购进的多个标准菌株为参考标准，分析VITEK 2-compact系统将细菌鉴定到种的正确率。共分析鉴定35例结果，资料分析回报如下：

1 资料与方法

1.1一般资料 中国药品生物制品检定所购进的多个标准菌株及区临床检验中心发放的、适合上述系统鉴定的细菌学检验室间质评标本35例。

1.2仪器VITEK 2-compact细菌分析系统，*****EK比浊仪、二级生物安全柜、上海智城电热培养箱等微生物检验相关仪器。

1.3试剂生物梅里埃公司所生产的各种微生物商品培养基，和VITEK 2 GN革兰氏阴性菌鉴定卡、*****P革兰氏阳性鉴定卡、VITEK 2 NH奈瑟菌嗜血杆菌鉴定卡、VITEK 2YST酵母菌鉴定卡、及配套培养液等。

1.4方法 采用第三版全国临床检验操作规程及室间质量评比操作手册的细菌检验相关步骤，接种梅里埃公司生产的羊血平板培养24或48h培养分离出细菌菌落后，根据VITEK 2-compact系统SOP文件选取菌落形态特征明显、单个的细菌菌落，分别用VITEK 2-compact上机鉴定。以省临床检验中心回报的正确结果和标准菌株名称作为参考标准，分别计算各个系统将细菌鉴定到种。

2 结果

报告时间均不计菌株预培养准备阶段的时间，全部的鉴定结果均在48h内得出，其中最快4h就能鉴定出结果。鉴定出细菌的名称和标准菌株名称相符合。本次试验中检测样本念珠菌5例，革兰氏阳性球菌10例，革兰氏阴性杆菌15例，革兰氏阴性球菌及革兰氏阳性杆菌5例，共计35例。与省临床检验中心回报的正确结果进行比较，VITEK 2-compact细菌分析系统的准确性较高，其生化鉴定符合鉴定到种水平ID%在95%以上的有34例，占97.1%。另有1例鉴定到属水平，外加两项补充试验后出结果。

3 讨论

临床微生物检验质量水平判断的重要标准是准确性，标准菌株鉴定是验证试验方法准确性的有效手段。细菌是一种微小的生物，具有生物的遗传性，通过遗传含有亲代的基本特征，细菌在新陈代谢、生长繁殖过程中，某些形状会发生变异，造成我们鉴定上的困难。传统的手工鉴定方法接种量大，操作复杂繁琐，耗时耗力，加上生化微量管本身质量或人操作技巧的因素，使得判读生化反应结果往往因人而异，对于微生物学检验学经验不足者更是难以适应。VITEK 2-compact系统的问世，使得这些难题可以迎韧而解。VITEK 2-compact系统由计算机、孵育箱、读取器、填充机、封口机等部件组成。只要分出单个菌落后，涂片革兰氏染色后，就可选用相对应的鉴定卡片，制备菌液上机检测，最快可4h出

鉴定结果。鉴定原理是采用八进位制数码鉴定原理，在鉴定卡上设置生长对照孔并设有卡片终点的阈值，系统每间隔一定时间对卡片的每一反应孔进行读数，获得细菌生化反应谱，当卡片生长对照孔到达终点阈值时，可获得生化鉴定结果。动态鉴定是得用细菌最佳时间段生物特征作为鉴定依据，所以比传统鉴定时间短，报告速度更快捷，大幅提高了工作效率。对于仪器鉴定结果的可靠性，我们从上面鉴定结果中可以观察到，该系统对细菌可鉴定到种的水平，准确率接近100%，故检测结果比较可靠。虽然仪器使用简单便捷，但也要了解和注意一些事项才能得到满意的结果。制备菌悬液一定要纯培养的菌落，准确的浊度。这些都要求较为严格的无菌操作技术和平板划线分离技术，否则不但影响了鉴定结果也影响工作效率。因为检测卡板种类是依据革兰氏染色结果选定的，革兰氏染色是选定上机检测卡板种类的关键，严格把握染色时间和脱色时间，这样才能得到正确的革兰氏染色结果，随后才能够选取正确的上机检测卡板。因此，必须掌握正确的涂片染色工作；保证所用试剂的质量。VITEK 2-compact系统检测所得出的结果具有专家系统功能，当某个鉴定结果得出两种菌未能最后确定时，就会提示往下做何种补充试验以便得到最后准确的结果。此外，熟悉VITEK 2-compact系统就能很好运用此系统的所有功能，充分发挥其微生物检测技术的先进性。

本次研究表明，VITEK 2-compact全自动微生物分析系统的检验结果具有较高的准确性，检验速度较快，且能直接报告确定的细菌，值得在临床上推广使用，但该系统仍存在一定的不足之处，对某些菌的鉴定能力尚需补充生化试验。上述不足相信会在后续的发展中逐渐弥补，VITEK 2-compact系统将广泛应用于临床，用以进一步提高临床工作效率。