高效液相色谱法测定烟草中的糖

第３Ｏ卷　２００２年３月　分析化学（ＦＥＮＸＩ　ＨＵＡＸＵＥ）来稿摘登　Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｊｏｕｎｍ｜‘，ｆ　Ａｔｍｌｙｔｌｃａ］Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ．　第３期　３８４　高效液相色谱法测定烟草中的糖　施红林　王保若　杨光宇　黄海涛　李　忠　蒋次清　（云南烟草科学研究院烟草化学室．昆明６５０１０６】　１　Ｉ　吾　烟草中的水溶性槠，特别是还原糖是影响烟草吸殊的最重要化学成分之一，且前烟草中的还原糖和总糖的测定方法　主要有氧化还原清定法，分光光度法，连续流动分析和高教渣相色谱法等。液相色谱法是最为可靠的方法，但其样品前　处理比较麻烦，且流动相和提取溶剂的不一致会导致示差折光检测器有很大的溶剂峰而干扰分析　我们首砍用Ｗａｒｅ　。　Ｓｕｇａｒ－ｐａｋｌ钙型甩离子交换柱分离谢定了烟草样品中的４种糖．并建立了用水超声浸取．固相萃取预分离的样品前处理　方法．获得了满意结果。　２实验部分　２．１主要仪器和试　ＰＥ—ＬＣ－２５０高效液相色谱仪（美屋ＰＥＲＫＩＮ—ＥＬＭＥＲ公司）　包括自动进样器．ＬＣ一２５０泵　ＬＣ一３０示差　折光检测器，ＬＣ－Ｏｖｅｎ－１０１柱温箱；大连化物所ＫＹＫＹ—ＳＩＳ　Ｉ１色浩工作站。ＥＤＴＡ钙钠（高效液相色谱专用．ＷａｌＰｍ公司提　供）；蔗糖、麦芽糖、葡萄糖、果糖标准（Ｆｌｕｋａ公司生产，含量≥　％）。　２．２色谱条件２．３样品处理色谱拄：Ｗａｔｅｒｓ　Ｓｔｔｇａｒ－ｐａｋＩ钙型阳离子变换柱（６．５　ｘ　３００　ｎｕｎ）；流动相为：０　ｎ５　ｇ／Ｉ　ＥＤＴＡ钙钠水溶ｉ瘟．流　准确称取烟草样品约０　５００　ｇ，用５０　ｍＬ水在４０—５０＇ｔ３下超声萃取４０　ｍｉｎ．过滤．弃去最初的约ｌＯ　ｍＬ滤　速为０　５　ｍＩ３ｍｉｎ；柱温　℃；进样量２０　Ｌ　液，收集后面的滤｛疽　取５　ｒｎＬ滤液通过预活化好的Ｓｅｐ－ＰａｋＣＩ８固相萃取小柱，弃去最初的２　ｍＬ，收集后面的３　ｍＬ用４　５　ｍ滤膜过滤，取２Ｏ　进样丹析。　３结果与讨论　３．１实验条件选择３．２样品前处理实验选用示差折光检测器检测　Ｗａｌｅｒｓ　Ｓｕｇａｒ－Ｐａｋｌ钙型阳离子交换柱为分离檐和多羟基化台物专　由于４种糖都易溶于水，所以宴验选用水超声提取的方法．室温下塘溶出慢，升高温度可加速糖的溶　用柱，该柱用０　０５５／Ｌ　ＥＤＴＡ钙钠水溶液作流动相．柱温要求控制在８ｏ一帅℃之问．实验选用８５＇ｔ３　出，但温度过高（超过６ｏ℃）会加快多糖，蔗糖和麦芽糖水解：故实验选择提取温度为４０　５０　．在该温度下超声提取３Ｏ　ｔｏＪｎ以上可使糖完全溶出，实验选用超声浸取４０　ｍｌｎ。糖提取渣最好当天测定，如放置过夜会导致葡萄糖测定结果稍有　偏高。烟草样品提取液中除了糖外．还含有少量其它杂质成分，会污染色谱柱而降低柱教．所以在进样之前要预分离这　些成分　我们采用Ｓｅｐ－Ｐａｋ　Ｃ　固相萃取小柱预固相萃取和用Ｓｅｐ－Ｐａｋ　ＡＭｍｉｎ　Ｃａｒｔｒｉｄｇｅｓ保护柱在线分离可有效地除去杂　质成分。　３．３回归方程、相关系数殛桓测限分别配制浓度为５．１．０　２、０．０４、０　ｔ１０８　ｇ／Ｌ的标准济渡．进样后根据不周堆度的峰面　积，计算出回归方程，根据信燥比ＳＩＮ：３．测得各组分虽低检测浓度．结果舒别为：蔗糖：Ａ（峰面积）：１４３１＋１　９５４　ｘ　ｌ　ｃ（ｇ／ｍＬ），ｆ：Ｏ　９９９ｇ，检测限为ｌ　５　ｍ　Ｌ；麦芽糖：Ａｆ峰面积）＝９９７＋ｌ　９２１×】驴ｃ（　ｍＬ）．　０　９９９８，检谢限为１．５　ａｒｇ／Ｌ；葡萄槠：Ａ（峰面积）＝１２１６＋１　６９７×１０　Ｃ（ｇ／ｍＬ）．一０　９９９７．检测限为２　０　ｍｇ／Ｌ：果糖：Ａ（峰面积）＝１３４９＋Ｉ．９４３　ｘ　１０＇ｃ（ｇ，ｍＬ）．ｒ：０　９９９９，检测限为２．０　ｍ　Ｌ。　４结　论　用Ｗａｔｅｒｓ　Ｓｕｇａｒ－１）ａｋＩ钙型阳离子交换柱高教液相色谱洼测定烟草样品中的槠，并用水超声浸聪提取样品中的糖．方　法简便快速，结果可靠，样品可实现批量处理，可满足太量样品分析的要求．提高了工作效率　方法用于几种烟样分析，　各槠回收率在９６％一１０４％之间．相对标准偏差在０　９８％～１　３６％之间。结果令凡满意。　２００１．０，１－２０收稿；２００１—ｏ９—１６接受