一种香菇液体菌种培养基及生产香菇菌棒的方法[发明专利]

(12)发明专利申请

(10)申请公布号 CN 105176839 A (43)申请公布日 2015.12.23

(21)申请号 201510573885.9(22)申请日 2015.09.10

(71)申请人井冈山井祥菌草生态科技股份有限

公司

地址343600 江西省吉安市井冈山新城区工

业园八号(72)发明人金文

(74)专利代理机构北京冠和权律师事务所

11399

代理人朱健 陈国军(51)Int.Cl.

C12N 1/14(2006.01)A01G 1/04(2006.01)C12R 1/645(2006.01)

权利要求书1页 说明书6页

(54)发明名称

一种香菇液体菌种培养基及生产香菇菌棒的方法(57)摘要

本发明提供了一种香菇液体菌种培养基，以木屑、菌草、麸皮、石膏粉、磷酸二氢钾、硫酸镁、水为主要原料组成。本发明还提供了一种利用所述香菇液体菌种培养基生产香菇菌棒的方法。本发明改变了传统香菇菌种的生产方法，在香菇菌棒生产中利用液体菌种技术，既提高了生产效率，又大大地节约了生产成本，而且本发明的生产方法工艺简单、生产的菌种利用率高、污染率低。

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权 利 要 求 书

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1.一种香菇液体菌种培养基，其特征在于：以重量份计，包括以下组份：木屑65-75重量份、菌草10-20重量份、麸皮10-15重量份、石膏粉1重量份、磷酸二氢钾0.1重量份、硫酸镁0.05重量份、水60-62重量份。

2.根据权利要求1所述的香菇液体菌种培养基，其特征在于，所述的麸皮纯度在90％以上，所述的磷酸二氢钾、硫酸镁均为分析纯。

3.根据权利要求1-2任一项所述的香菇液体菌种培养基，其特征在于，所述的菌草为野生或人工种植的草本植物废碎后的原料，所述木屑为纯度90％以上的阔叶林木屑。

4.根据权利要求3所述的香菇液体菌种培养基，其特征在于，所述水为自然水。5.一种生产香菇菌棒的方法，其特征在于，包括以下步骤：备料：以重量份计，称取木屑65-75重量份、菌草10-20重量份、麸皮10-15重量份、石膏粉1重量份、磷酸二氢钾0.1重量份、硫酸镁0.05重量份、水60-62重量份，备用；

拌料：培养料混合拌均匀，培养料拌3遍以上，保持PH值在6.5-7左右，备用；配液：将称取的原材料加水搅拌溶解，煮沸持续20分钟后过滤，滤液加水定容，加入新鲜豆油0.07％，得到液体备用；

袋装：用食用菌塑料袋装好培养料至适宜的高度和松紧度，将袋口折叠往袋内挤压，从袋口插入塑料插棒，将菌袋口朝下的方式按次序装框盖框，当天进行高温灭菌；

接种：待菌棒冷却至室温后，利用液体发酵罐的香菇液体菌种对香菇菌棒进行拔插棒接种，接种完后立即用洁净的棉花塞住袋口养菌，得接种后的香菇菌棒；

培养：对接种后的香菇菌棒经过菌丝培养、出菇管理、采收等工序，即完成香菇菌棒的生产。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述接种时使用的棉花为非脱脂棉。7.根据权利要求5-6任一项所述的方法，其特征在于，所述袋装时高温灭菌条件为蒸汽压力0.13-0.15Mpa、温度121℃～125℃时，保持3.5小时。

8.根据权利要求5-7任一项所述的方法，其特征在于，所述接种时接种量35ml、接种时间10000棒/2人3小时完成。

9.根据权利要求5-7任一项所述的方法，其特征在于，所述培养温度在23～25℃，湿度60～65％之间，遮光培养，二氧化碳浓度小于1％。

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说 明 书

一种香菇液体菌种培养基及生产香菇菌棒的方法

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技术领域

本发明属于食用菌生产领域，尤其涉及一种香菇液体菌种培养基及其利用液体菌种技术生产香菇菌棒的方法。

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背景技术

香菇，别称香蕈、香菌，为侧耳科植物香蕈的子实体，营养价值很高。香菇是世界第

二大食用菌，也是我国特产之一，在民间素有“山珍”之称。[0003] 香菇蛋白质含量高达18.6％，脂肪含量低至4.8％，碳水化合物含量为71％，粗纤维含量为9.6％，含有人体必需的8种氨基酸、多种维生素、矿物元素等，特别是富含维生素B群、铁、钾、维生素D原(经日晒后转成维生素D)。[0004] 香菇具有多种生物活性及药理作用。香菇味甘，性平，主治食欲减退，少气乏力，是高蛋白、低脂肪的营养保健食品。香菇中麦角甾醇含量很高，对防治佝偻病有效；香菇多糖(β～1，3葡聚糖)能增强细胞免疫能力，从而抑制癌细胞的生长；香菇含有六大酶类的40多种酶，可以纠正人体酶缺乏症；香菇中的脂肪所含脂肪酸，对人体降低血脂有益。[0005] 传统香菇的生产普遍采用固体菌种进行接种培养，所用菌种主要是木屑菌种、枝条菌种等常规固体菌种，该方法生产周期长，一般需要55-60天、工艺繁锁、生产方法效率低；菌种生产过程需要较大的空间，需投人大量的人力、物力、成本高；菌丝培养周期长，培养基内菌丝菌龄上下差异较大，前端菌丝处于萌动状态时，基质表面菌丝已接近老化，导致栽培种出菇不整齐，不能达到香菇规模化生产，难以满足人们的生产要求。取而代之的是采用液体培养技术进行生产，液体培养具有生产周期短，菌丝生长快，且菌丝分散性好、萌发点多、短时间能够得到大量的菌丝体和代谢产物，并适于工厂化生产等特点，可以利用其菌丝体及发酵液生产保健品和提取有效成分，是发展香菇生产的一条崭新途径。[0006] 然而，采用液体发酵生产香菇的过程中，最关键的是所用的液体培养基的配方是否优良，培养条件是否适宜，它直接决定着香菇菌丝体的生长和代谢产物的形成。平菇，白灵菇，杏鲍，猴头菇等在液体菌种接入菌棒后一般在两天就可以明显发现发菌，而香菇菌棒接入后发菌非常缓慢，一般两三天菌种口都无变化，五六天才有发菌的迹象。而且香菇对液体菌种的质量要求非常高，菌球质量稍有不好，萌发慢特别的明显。因此生产香菇菌棒过程中各操作条件的影响非常明显。现有技术中，张振宇等通过对香菇液体菌种培养条件进行优化，筛选了适宜的玉米粉、马铃薯淀粉、酵母膏、麸皮等适用于香菇菌棒的直接接种，然而其生产周期长达205天。而传统香菇菌棒的生产装袋不插棒、须扎紧袋口，接种时须扎洞，用固体菌种进行接种培养时生产工艺复杂、效率低，菌丝生长速度不一致，现蕾及出菇时间不一致，出菇管理时须注水，难以满足人们的生产要求。上述文献中，对于液体培养基或香菇菌棒的方法的研究，多停留在研究单因素实验方面，针对香菇液体发酵过程中各个因素之间的相互作用研究还很少，未能从根本上解决香菇生产方法效率低、成本高、菌丝培养周期长的问题。

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说 明 书

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发明内容

为了解决现有技术中香菇生产方法效率低，成本高，菌丝培养周期长的问题，本发明提供一种生产效率高、菌丝培养周期短、成本低的香菇液体菌种生产方法。[0008] 本发明通过下述技术方案实现：[0009] 一种香菇液体菌种培养基，以重量份计，包括以下组份：木屑65-75重量份、菌草10-20重量份、麸皮10-15重量份、石膏粉1重量份、磷酸二氢钾0.1重量份、硫酸镁0.05重量份、水60-62重量份。

[0010] 所述的麸皮纯度在90％以上，所述的磷酸二氢钾、硫酸镁均为分析纯；所述的菌草为野生或人工种植的草本植物废碎后的原料，所述木屑为纯度90％以上的阔叶林木屑；所述水为自然水。[0011] 其中，所述菌草是指营养适合食用菌、药用菌、饲用菌、能用菌等微生物生长需要，可作为食用菌、药用菌、饲用菌、能用菌等微生物培养基的草本植物。目前，我们已通过三级系统筛选法筛选出45种菌草，主要有禾本科的巨菌草、象草、王草、杂交狼尾草、五节芒、芦竹、类芦、芦苇，里白科的芒萁等草本植物，本发明中采用一定含量的菌草作为香菇菌棒的培养基原料，为其生长过程中提供了充足的营养成分。[0012] 本发明还提供了一种生产香菇菌棒的方法，包括以下步骤：[0013] 备料：以重量份计，称取木屑65-75重量份、菌草10-20重量份、麸皮10-15重量份、石膏粉1重量份、磷酸二氢钾0.1重量份、硫酸镁0.05重量份、水60-62重量份，备用；[0014] 拌料：培养料混合拌均匀，培养料拌3遍以上，保持PH值在6.5-7左右，备用；[0015] 配液：将称取的原材料加水搅拌溶解，煮沸持续20分钟后过滤，滤液加水定容，加入新鲜豆油0.07％，得到液体备用；[0016] 袋装：用食用菌塑料袋装好培养料至适宜的高度和松紧度，将袋口折叠往袋内挤压，从袋口插入塑料插棒，将菌袋口朝下的方式按次序装框盖框，当天进行高温灭菌；[0017] 接种：待菌棒冷却至室温后，利用液体发酵罐的香菇液体菌种对香菇菌棒进行拔插棒接种，接种完后立即用洁净的棉花塞住袋口养菌，得接种后的香菇菌棒；[0018] 培养：对接种后的香菇菌棒经过菌丝培养、出菇管理、采收等工序，即完成香菇菌棒的生产。

[0019] 上述培养方法中，优选所述接种时使用的棉花为非脱脂棉。[0020] 上述培养方法中，优选所述袋装时高温灭菌条件为蒸汽压力0.13-0.15Mpa、温度121℃～125℃时，保持3.5小时。[0021] 上述培养方法中，优选所述接种时接种量35ml、接种时间10000棒/2人3小时完成。

[0022] 上述培养方法中，优选所述培养温度在23～25℃，湿度60～65％之间，遮光培养，二氧化碳浓度小于1％。

[0023] 本发明所述一种香菇液体菌种生产方法，优选为包括以下步骤：[0024] 一，根据木屑配方，称取木屑65-75重量份、菌草10-20重量份、麸皮10-15重量份、石膏粉1重量份、磷酸二氢钾0.1重量份、硫酸镁0.05重量份、水60-62重量份。将培养料混合拌均匀，培养料拌3遍以上，保持pH值在6.5-7左右为适宜，备用。[0025] 二，用食用菌塑料袋装好培养料至适宜的高度和松紧度，将袋口折叠往袋内挤压，

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从袋口插入塑料插棒，将菌袋口朝下的方式按次序装框盖框，当天进行高温灭菌。[0026] 三，待菌棒冷却至室温后，利用液体发酵罐的香菇液体菌种对香菇菌棒进行拔插棒接种，接种完后立即用洁净的棉花(非脱脂棉)塞住袋口养菌。[0027] 四，对接种后的香菇菌棒经过菌丝培养、出菇管理、采收等工序，即完成液体菌种生产香菇菌棒的技术。

[0028] 本发明所述的木屑是指木头加工时留下的锯末、刨花粉料。主要是用来做燃料和轻骨填充料，或是再复合成人造板，如中纤板。也可以作为生产食用菌原料。阔叶林，由阔叶树种组成的森林称阔叶林，有冬季落叶的落叶阔叶林(又称夏绿林)和四季常绿的常绿阔叶林(又称照叶林)两种类型。优选为阔叶林木屑，纯度较高。[0029] 本发明所述的麦皮即麦麸，是小麦加工磨取面粉后筛出的麦粒种皮。麦皮主要成分包括：纤维、糊粉、一些矿物质和维生素。

[0030] 本发明所述的菌草是指营养适合食用菌、药用菌、饲用菌、能用菌等微生物生长需要，可作为食用菌、药用菌、饲用菌、能用菌等微生物培养基的草本植物。目前，我们已通过三级系统筛选法筛选出45种菌草，主要有禾本科的巨菌草、象草、王草、杂交狼尾草、五节芒、芦竹、类芦、芦苇，里白科的芒萁等草本植物。[0031] 本发明所述的石膏粉为白色、无色，无色透明晶体称为透石膏，有时因含杂质而成灰、浅黄、浅褐等色。条痕白色。透明。玻璃光泽，解理面珍珠光泽，纤维状集合体丝绢光泽。解理极完全，和中等，解理片裂成面夹角为66和114的菱形体。性脆。硬度1.5-2。不同方向稍有变化。相对密度2.3。石膏粉是五大凝胶材料之一，在国民经济中占有重要的地位，广泛用于建筑、建材、工业模具和艺术模型、化学工业及农业、食品加工和医药美容等众多应用领域，是一种重要的工业原材料。

[0032] 本发明所述的磷酸二氢钾(化学式：KH2PO4)密封保存，空气中稳定，在400℃时失去水，变成偏磷酸盐，用于配制缓冲液，测定砷、锑、磷、铝和铁，配制磷标准液，配制培养基，测定血清中无机磷、碱性磷酸酶活力。各省均由当地的农科院所、土肥站等专家机构针对磷酸二氢钾适用于各类典型作物进行了很多的相关应用实验，通过各地对各类型作物的实际施用效果证明磷酸二氢钾具有显著增产增收、改量优化品质、抗倒伏、抗病虫害、防治早衰等许多优良作用，有不法分子以硫酸钾、硫酸钠等假冒磷酸二氢钾，使得农民在购买时常常无法辨别真伪。硫酸钾和硫酸钠外观发白，而磷酸二氢钾晶体透明，因此可以从外观上简单识别。磷酸二氢钾也通常用于食用菌生产作微量元素添加。[0033] 本发明所述的硫酸镁属于纯度高的硫酸镁，在农业和园艺，硫酸镁是用来改良缺镁的土壤(镁是一个叶绿素分子的基本要素)，最常见的用于盆栽植物，或含镁作物，如马铃薯，玫瑰，西红柿，辣椒和大麻。施用硫酸镁的优势超过其他硫酸镁镁土壤改良剂(如白云质石灰)是它的高溶解性。硫酸镁也通常用于食用菌生产作微量元素添加。[0034] 本发明所述的水是自然水，达到我国生活饮用水标准的水。[0035] 本发明的有益效果主要体现在以下几个方面：

[0036] (1)克服了现有技术中生产菌棒时必须采用繁琐的扎袋口的步骤，操作简便，效率高，由于省略了扎袋口的步骤，减少了该步骤中由于操作手法不一导致的操作程度不均匀、生产效率低的技术问题；

[0037] (2)在培养基中加入菌草，并对其含量进行筛选，得到了最适宜配比下的菌草的加

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入条件；

[0038] (3)通过调整最适宜的PH值，发现在PH6.5-7的范围内，香菇菌棒的生产方法菌丝活力强，菌丝生长速度较一致，现蕾及出菇时间一致；[0039] (3)生产周期短：香菇固体菌种培养周期长，现有技术中香菇菌棒的培育周期长，本发明香菇菌棒的生长周期短，速度快。[0040] (4)节约成本：本发明的生产菌棒无须扎袋口接种，效率高，产量高；[0041] (5)菌龄一致：香菇菌棒中空，液体菌种发菌均匀，液体菌种菌丝活力强，菌丝生长速度较一致，现蕾及出菇时间一致，便于管理、采收、加工。具体实施方式

[0042] 以下实施例中所涉及的麸皮、菌草纯度在90％以上，所述的磷酸二氢钾、硫酸镁均为分析纯。

[0043] 实施例1

[0044] 根据培养基配方，称取木屑74kg、菌草10kg、麸皮15kg、石膏粉1kg、磷酸二氢钾0.1kg、硫酸镁0.05kg、水60kg。将培养料混合拌均匀，培养料拌3遍以上，保持PH值在7左右为适宜，用食用菌塑料袋装好培养料至适宜的高度和松紧度，将袋口折叠往袋内挤压，从袋口插入塑料插棒，将菌袋口朝下的方式按次序装框盖框，当天进行高温灭菌。待菌棒冷却至室温后，利用液体发酵罐的香菇液体菌种对香菇菌棒进行拔插棒接种，接种完后立即用洁净的棉花(非脱脂棉)塞住袋口养菌，经过菌丝培养、出菇管理、采收。[0045] 实施例2

[0046] 根据培养基配方，称取木屑75kg、菌草15kg、麸皮10kg、石膏粉1kg、磷酸二氢钾0.1kg、硫酸镁0.05kg、水60kg。将培养料混合拌均匀，培养料拌3遍以上，保持PH值在6.5左右为适宜，用食用菌塑料袋装好培养料至适宜的高度和松紧度，将袋口折叠往袋内挤压，从袋口插入塑料插棒，将菌袋口朝下的方式按次序装框盖框，当天进行高温灭菌。待菌棒冷却至室温后，利用液体发酵罐的香菇液体菌种对香菇菌棒进行拔插棒接种，接种完后立即用洁净的棉花(非脱脂棉)塞住袋口养菌，经过菌丝培养、出菇管理、采收。[0047] 实施例3

[0048] 根据培养基配方，称取木屑70kg、菌草20kg、麸皮10kg、石膏粉1kg、磷酸二氢钾0.1kg、硫酸镁0.05kg、水62kg。将培养料混合拌均匀，培养料拌3遍以上，保持PH值在6.5左右为适宜，用食用菌塑料袋装好培养料至适宜的高度和松紧度，将袋口折叠往袋内挤压，从袋口插入塑料插棒，将菌袋口朝下的方式按次序装框盖框，当天进行高温灭菌。待菌棒冷却至室温后，利用液体发酵罐的香菇液体菌种对香菇菌棒进行拔插棒接种，接种完后立即用洁净的棉花(非脱脂棉)塞住袋口养菌，经过菌丝培养、出菇管理、采收。[0049] 实施例4

[0050] 根据培养基配方，称取木屑65kg、菌草15kg、麸皮10kg、石膏粉1kg、磷酸二氢钾0.1kg、硫酸镁0.05kg、水60kg。将培养料混合拌均匀，培养料拌3遍以上，保持PH值在7左右为适宜，用食用菌塑料袋装好培养料至适宜的高度和松紧度，将袋口折叠往袋内挤压，从袋口插入塑料插棒，将菌袋口朝下的方式按次序装框盖框，当天进行高温灭菌。待菌棒冷却至室温后，利用液体发酵罐的香菇液体菌种对香菇菌棒进行拔插棒接种，接种完后立即

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用洁净的棉花(非脱脂棉)塞住袋口养菌，经过菌丝培养、出菇管理、采收。[0051] 对比例1

[0052] 根据培养基配方，称取木屑74kg、菌草10kg、麸皮15kg、石膏粉1kg、磷酸二氢钾0.1kg、硫酸镁0.05kg、水60kg。将培养料混合拌均匀，培养料拌3遍以上，保持PH值在5.5左右为适宜，其余与实施例1相同。[0053] 对比例2

[0054] 根据培养基配方，称取木屑74kg、菌草10kg、麸皮15kg、石膏粉1kg、磷酸二氢钾0.1kg、硫酸镁0.05kg、水60kg。将培养料混合拌均匀，培养料拌3遍以上，保持PH值在7.5左右为适宜，其余与实施例1相同。[0055] 对比例3

[0056] 根据培养基配方，称取木屑74kg、麸皮15kg、石膏粉1kg、磷酸二氢钾0.1kg、硫酸镁0.05kg、水60kg。将培养料混合拌均匀，培养料拌3遍以上，保持PH值在7左右为适宜，其余与实施例1相同[0057] 对比例4

[0058] 根据培养基配方，称取木屑74kg、菌草30kg、麸皮15kg、石膏粉1kg、磷酸二氢钾0.1kg、硫酸镁0.05kg、水60kg。将培养料混合拌均匀，培养料拌3遍以上，保持PH值在7左右为适宜，其余与实施例1相同。[0059] 对比例5

[0060] 根据培养基配方，称取木屑74kg、菌草30kg、麸皮15kg、石膏粉1kg、磷酸二氢钾0.1kg、硫酸镁0.05kg、水60kg。将培养料混合拌均匀，培养料拌3遍以上，保持PH值在7左右为适宜，袋装后扎紧袋口，其余与实施例1相同。

[0061] 将实施例1与对比例1-5生产过程中的菌丝生物量为制备，每试验组重复3次取平均值，研究不同条件下对香菇菌丝生物量的影响，结果见表1。[0062] 表1.不同条件下香菇菌丝生物量

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注：菌丝生物量单位为g/100ml

[0065] 由表1结果可知，对比例1和对比例2仅改变了PH值，其生产过程中香菇菌丝生物量有明显的下降，说明PH的改变，可以显著提高液体菌种法生产香菇的产率及效果。对比例3中未使用菌草、对比例4改变了菌草的用量，改变后香菇菌丝生物量有明显的下降，说明菌草的引入并控制其使用量，可以显著提高液体菌种法生产香菇的产率及效果。对比例5采用了扎袋口的步骤，香菇菌丝生物量有明显的下降，说明本发明即使省略扎袋口的过程，仍可以显著提高液体菌种法生产香菇的产率及效果。[0066] 上述实验充分说明，相比于现有技术，本发明的液体培养基所含有的营养成分更

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能满足香菇菌丝对营养的需求。配合本发明的液体培养基，本发明采用的香菇菌棒的生产方法可以降低了菌种成本、大大提高香菇生产的效率。

[0067] 尽管发明人已经对本发明的技术方案做了较为详细的阐述和列举，应当理解，对于本领域一个熟练的技术人员来说，对上述实施例做出修改或者采用等同的替代方案，这对本领域的技术人员而言是显而易见，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。

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