气相色谱法测定脑立清丸中薄荷脑的含量

摘要】目的：建立测定脑立清丸中薄荷脑的毛细管气相色谱方法。方法：采用HP-INNOWAX 19091N-213毛细管柱（30m×0.320mm×0.50μm），氢火焰离子化检测器（FID），以水杨酸甲酯为内标物；色谱条件：载气为氮气，流速1.0ml/min；柱温：120℃；进样口温度：180℃；检测器温度：220℃。结果：薄荷脑在20μg/ml～1000μg/ml范围内线性关系良好（r=0.9999，n=6）；平均回收率为98.54％。结论：本方法操作简便、专属性好、重复性好，可用于脑立清丸的质量控制。

【关键词】薄荷脑 内标法 气相色谱法

【中图分类号】R927.21 【文献标识码】B 【文章编号】2095-1752（2014）22-0329-02

脑立清丸收载于《中国药典》2010年版一部，由磁石、赭石、珍珠母、清半夏、酒曲、酒曲( 炒) 、牛膝、薄荷脑、冰片、猪胆汁等组成， 具有平肝潜阳， 醒脑安神之功效，用于肝阳上亢，头晕目眩， 耳鸣口苦，心烦难寐及高血压见上述证候者。现行标准仅以冰片含量表征脑立清丸质量，未对处方中另一重要成分薄荷脑进行测定，本文采用毛细管气相色谱法，对脑立清丸中的重要成分薄荷脑进行了定量研究，建立一种灵敏度高、专属性强、重现性好的含量测定方法，丰富标准内容，使产品质量得到进一步控制。 1 实验仪器与试药

仪器：METTLER TOLEDO AG135型电子分析天平；Agilent 6890N气相色谱仪，配置FID检测器及Agilent G4513A自动进样器。KH7200E型超声波清洗器（昆山禾创超声仪器有限公司，250W，50KHz）。

试药：薄荷脑对照品（中国药品生物制品检定所；批号：110728--200506）；水杨酸甲酯为分析纯，南京化学试剂有限公司；乙醇为分析纯，南京化学试剂有限公司；脑立清丸（101批样品均为江苏省评价性检验抽取样品）；阴性样品自制。

2 实验方法

2.1色谱条件及系统适用性

色谱柱：HP-INNOWAX 19091N-213（30m×0.320mm×0.50μm）；载气：氮气； 检测器：FID；检测器温度：220℃ 柱温：120℃；进样口温度：180℃；进样量：1μ1。

2.2内标溶液的制备

精密称取水杨酸甲酯适量，加乙醇制成每1ml含0.13mg的溶液，作为内标溶液。

2.3对照品的制备

精密称取薄荷脑对照品适量加内标溶液制成含薄荷脑100μg/ml的溶液，作为对照品溶液。

2.4供试品的制备

取本品适量，研细，精密称取1g，置锥形瓶中，精密加入内标溶液25ml，称定重量，密塞，超声处理30分钟，放冷，用内标溶液补足减失的重量，过滤，即得。

2.5阴性对照溶液的制备

按处方称取除薄荷脑外其他药味，按标准制法制成阴性样品溶液。

3 干扰试验

取对照品溶液、样品溶液、阴性样品溶液按规定色谱条件试验，结果表明：阴性样品溶液的色谱图在与薄荷脑对照品的色谱图中相同保留时间处无吸收峰，阴性无干扰。 4 线性关系

精密称取薄荷脑对照品50mg，置50ml量瓶中，加内标适量使溶解并稀释至刻度。精密量取上述溶液分别制成浓度为20μg/ml、50μg/ml、100μg/ml、

200μg/ml、500μg/ml、1000μg/ml的溶液，分别精密量取1μl，注入液相色谱仪，测定峰面积，以对照品峰面积对内标峰面积比值为纵坐标，浓度为横坐标，进行线性回归，回归方程为y= 0.0111x-0.015，R=0.9999，表明薄荷脑在20μg/ml～1000μg/ml范围内线性关系良好。 5 精密度试验

取薄荷脑对照品溶液按规定色谱条件进行测定，峰面积RSD=0.4%（n=6），表明精密度良好。 6 稳定性试验

取样品（批号：20100911），在0、1、4、8、12、24h检测，测定峰面积，RSD=1.1%（n=6）。 7 重复性试验

取样品（批号：20100911），按2项下方法制备样品溶液5份，按规定色谱条件试验，测得薄荷脑含量为1.07mg/丸， RSD=1.3%（n=5）。 8 加样回收试验

取样品（批号：20100911），分别加入薄荷脑对照品适量，按3项下方法制备样品溶液，按规定色谱条件试验，结果薄荷脑的平均回收率为98.54%（RSD=0.5%）。 9 定量限试验

以基线噪音的10倍，确定定量限。定量限为0.08μg/ml。 10 样品的测定

我们采用上述方法对5个生产企业的101批样品中薄荷脑的含量进行检测并对数据进行分析，结果见表1。A、C在此项检测中显示不同批次之间的差异性较大，各厂家之间样品的含量呈现显著性差异。 表1 不同厂家薄荷脑含量统计表

11 讨论

11.1本试验采用内标法定量，水杨酸甲酯与待测成分不发生反应、性质稳定，且结果显示与待测成分分离良好、无干扰，适合作为内标物使用。

11.2试验过程中考察了柱温120℃、130℃、140℃对样品中薄荷脑分离度的影响，柱温120℃条件下样品分离良好，故采用120℃作为检测柱温。

11.3各企业的薄荷脑含量差异较大，由于处方中直接采用薄荷脑投料，所以含量差异主要由投料量差异导致。 参考文献

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