清咽利咽合剂的质量标准研究

第１７卷第２期中国实验方剂学杂志Ｖ０１．１７．Ｎｏ．２２０１１年１月ＣｈｉｎｅｓｅＪｏｕｒｎａｌｏｆＥｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＭｅｄｉｃａｌＦｏｒｍｕｌａｅＪａｎ．。２０１１清咽利咽合剂的质量标准研究郑弘，许红玮（河南中医学院第一附属医院药学部，郑州４５００００）［摘要】目的：建立清咽利咽合剂质量标准。方法：采用薄层色谱法（ＴＬＣ）对赤芍、黄芩进行定性鉴别，以高效液相色谱法（ＨＰＬＣ）对主药金银花中绿原酸进行含量测定，色谱柱为ＡｇｉｌｅｎｔＺＯＲＢＡＸＥｅｌｉｓｐｓｅＳＢ・ＡｑＣ。。柱（４．６ｍｍ×２５０ｍｍ，５Ｉｚｍ）；流动相乙腈－０．４％磷酸（７：９３）；流速１．０ｍＬ・ｍｉｎ～；柱温３０℃；检测波长３２７ｎｍ。结果：清咽利咽合剂中赤芍、黄芩的ＴＬＣ色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。绿原酸含量测定线性关系良好，回归方程Ｙ＝１０５５２０Ｘ一９９９０，ｒ＝０．９９９９。绿原酸的平均回收率为１００．３９％，ＲＳＤ１．８７％。结论：本方法简便、准确、灵敏、重现性好，可作为清咽利咽合剂质量控制。［关键词］清咽利咽合剂；绿原酸；高效液相色谱；薄层色谱［中图分类号］Ｒ２８４．１【文献标识码］Ｂ［文章编号］１００５－９９０３（２０１Ｉ）０２－００９１－０２清咽利咽合剂为我院耳鼻喉科用制剂，由金银２方法与结果花、赤芍、桔梗、玄参、黄芩等１１味中药加工提取的２．１薄层色谱鉴别口服中药制剂，具有清热利咽，活血，消肿止痛等功２．１．１赤芍的鉴别取本品１０ｍＬ，蒸干，残渣加效。主治肺胃蕴热，复感风热邪毒所致急慢性咽喉乙醇２ｍＬ使溶解，作为供试品溶液。另取芍药苷对炎。在临床使用二十余年，疗效显著，颇受医生和患照品，加乙醇制成１ｇ・Ｌ叫的溶液，作为对照品溶液。者的欢迎，近几年该制剂年平均销售量３万余瓶。按处方要求制备缺赤芍的阴性供试品，同供试品液且制剂君臣佐使组方严谨，制剂工艺科学规范。为的制备方法，制成阴性对照液。吸取上述供试品液、控制产品质量，确保临床疗效，本研究建立了黄芩、对照品溶液，及阴性对照液各１０恤Ｌ，分别点于同一赤芍的薄层色谱鉴别，并采用高效液相色谱法对主以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶Ｇ薄层板上，以药金银花的主成分绿原酸进行了含量测定。氯仿一醋酸乙脂．甲醇－甲酸（４０：５：１０：０．２）为展开剂，１材料展开，取出，晾干，喷以５％香草醛硫酸溶液，１０５℃１．１仪器高效液相色谱仪（Ｓｈｉｍａｄｚｕ，ＩＯＡＴＶＰ型加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品二元泵，ＳＩＬ．２０Ａ自动进样器，ＳＰＤ—Ｍ１０Ａｖｐ型检测色谱相应的位置上，显相同的蓝紫色斑点，阴性对照器），ＣＬＡＳＳ．ｖｐ色谱工作站。ｓａｒｔｏｆｉｕｓｃｐ２２５Ｄ型电液则无。子天平定量毛细管，自动点样器。２．１．２黄芩的薄层鉴别取本品２０ｍＬ，加ＨＣＩ调１．２试药芍药苷对照品（批号１１０７３６－２００７３２）；ｐＨ至２，加乙酸乙酯振摇提取２次，每次２０ｍＬ，合黄芩苷对照品（批号ｌ１０７１５．２００５１４）；绿原酸对照品并醋酸乙酯萃取液，蒸干，残渣加甲醇２ｍＬ，使溶（批号１１０７５３—２００４１３）均由中围药品生物制品检定解，作为供试品溶液。按处方要求制备缺黄芪的阴所提供；硅胶Ｇ（青岛海洋化工厂），乙腈为色谱纯，性供试品，同供试品液的制备方法，制成阴性对照其他均为分析纯。清咽利咽合剂由河南中医学院第液。另取黄芩苷对照品用甲醇制成２ｇ・Ｌ。１的溶液，一附属医院制剂室提供，（河南省食品药品监督管理局制剂注册批件第２００４２０１３７０号，批号（１００２２３一Ｉ，作为对照品溶液。照《中国药典》薄层色谱法实验。１００２２３－２，１００２２３－３）。吸取上述供试品液、对照品溶液，及阴性对照液各２恤Ｌ，分别点于同一硅胶Ｇ薄层板上，以乙酸丁酯．甲酸一水（７：４：３）的上层液作为展开剂，展开。取出晾［收稿日期］２０１０－０６—１８干，喷以２％三氯化铁乙醇溶液显色。供试品色谱［第一作者】郑弘，本科，主管药师，研究方向：中药制剂等，中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的橘黄色Ｔｅｌ：】３６２３８２２００７．Ｅ—ｍａｉｌ：ｚｈ０３７６＠１６３．ｃｏｒｎ斑点，阴性对照液则无。・９１・万方数据第１７卷第２期２０１１年１月中国实验方剂学杂志ＣｈｉｎｅｓｅＪｏｕｒｎａｌｏｆＥｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＭｅｄｉｃａｌＦｏｒｍｕｌａｅＶ０１．１７。Ｎｏ．２Ｊａｎ．，２０１１２．２绿原酸的含量测定２．２．１０．４５恤ｍ微孑Ｌ滤膜过滤，取得续滤液，即得。ＥｃｌｉｓｐｓｅＳＢ—Ａｑ色谱条件ｍｍ×２５０ＡｇｉｌｅｎｔＺＯＲＢＡＸ２．２．３对照品溶液精密称取绿原酸对照品２ｍｇ，Ｃ１８柱（４．６ｍｍ，５仙ｍ）；流动相乙腈－０．４％置于５０ｍＬ棕色量瓶中，加５０％的甲醇使溶解，定容至刻度，制成每０．０４ｇ・Ｌ“的绿原酸储备液。２．２．４阴性对照溶液取缺金银花的阴性对照溶液，按供试品溶液制备方法制备，将上述配制的３种溶液分别进样１０恤Ｌ，测定，阴性对照无干扰（图１）。磷酸（７：９３）；流速１ｍＬ・ｒａｉｎ～；柱温３０℃；检测波长３２７ｎｍ；理论塔板数按绿原酸计算不低于２０００。ｍＬ２．２．２供试品溶液精密量取样品５ｍＬ置５０量瓶中。用５０％甲醇稀释至亥４度定容，摇匀，用厂１厂１广］厂］ｒｌｒ■厂］厂忑—百■矿—几５ｔ／ｍｉｎ囝１清咽科咽合剂ＨＰＬＣ色谱图Ａ．对照品；Ｂ．供试品；Ｃ．阴性对照；１．绿原酸２．２．５线性关系考察分别精密吸取对照品溶液ＩＬＬ，按上述色谱条件标法计算含量，结果为（０．３６１６±０．００７）ｇ・Ｌ～。表１清咽利咽合剂中绿原酸加样回收率试验２．０，５．０，８．０，１０．０，１２．０，１６．０进样测定，以峰面积积分值Ｙ为纵坐标，对照品进样量ｘ（斗ｇ）为横坐标，绘制标准曲线，得其回归方程Ｙ＝１０５５２０Ｘ一９９９０，ｒ＝０．９９９９，结果表明绿原酸在０．０８—０．６４Ｉｚｇ线性关系良好。２．２．６精密度试验精密吸绿原酸取对照品溶液ｌＯ斗Ｌ，连续重复进样６次，按上述色谱条件测定峰面积，结果ＲＳＤ０．７５％。表明仪器精密度良好。２．２．７重复性试验精密量取同一批号清咽利咽合剂（ｉ００２２３－１）。分别按２．２．２项下方法平行制备供试品溶液６份，进样测得峰面积，计算绿原酸含量。结果绿原酸平均质量浓度为０．３５０．４％。表明本方法重复性良好。２．２．８稳定性试验取供试品溶液，每隔２ｈ进样１次（１０阻Ｌ），共进样６次，按上述色谱条件分别测定。峰面积积分值ＲＳＤ０．６％（／１＝６），表明供试品溶液在１２ｈ内稳定。２．２．９加样回收率试验取已知含量的供试品（批号１００２２３）１．００ｍＬ，精密加入一定量绿原酸对照品，按供试品溶液制备方法制备，依法测定，计算回收率，见表１。２．２．１０样品含量测定分别精密吸取对照品溶液［参考文献］［１］中国药典．一部［ｓ］．２００５：１５２．［２］于天杰，张玲昂．咽炎合剂的质量控制［Ｊ］．中国实用医药，２００９，４（２６）：１５１．ｇ・Ｌ～，ＲＳＤ３讨论与结果绿原酸的含量测定试验参考文献¨剖金银花项下绿原酸的含量测定方法，采用流动相乙腈－０．４％磷酸（１３：８７），分离效果不理想。后改流动相乙腈．０．４％磷酸（７：９３），结果绿原酸可以分离不受其他组分干扰，分离效果好，理论塔板数符合相关要求。故以此配比为流动相进行含量测定，重复性好，方案可行。与供试品溶液１０斗Ｌ，注入液相色谱仪，测定，以外［责任编辑顾雪竹］・９２・万方数据