金线莲无公害规范化种植技术探讨

胡帅军;朱星语;孟祥霄;高翰;刘霞;张重义

【摘 要】金线莲系兰科植物花叶开唇兰Anoectochilus roxburghii(Wall.)Lindl.的新鲜或干燥全草,有凉血祛风、祛湿解毒的功效,临床应用广泛,市场需求量大.但在种植过程中存在种植管理不规范、农药过度添加、加工环节不规范等问题,甚至还有售假掺假的现象,严重影响药材的质量.为了保障中药材的质量和产量,本文制订了金线莲无公害生产标准操作规程,包括金线莲无公害栽培环境、种植方法、田间管理、病虫害防治及质量控制等内容,为优质金线莲的安全生产提供指导,促进金线莲产业的健康发展.%Anoectochilus, the fresh or dry whole grass of

Anoectochilus roxburghii (Wall.) Lindl., has the effects of cooling blood, dispelling wind, dispelling dampness and resolving toxin, resulting in a wide range of clinical applications and large market demand. However, in the planting process, there are problems such as irregular planting management, excessive addition of pesticides, irregular processing links, even the phenomenon of selling adulteration, which seriously affects the quality of the medicine. In order to guarantee the quality and productivity of Chinese herbal medicines, this paper developed the standard operating procedures for the non-pollution Anoectochilus, including the non-pollution cultivation environment of Anoectochilus, planting methods, field management, pest control and quality control, etc., which provides guidance to promote the healthy development of the Anoectochilus industry.

【期刊名称】《世界科学技术-中医药现代化》 【年(卷),期】2018(020)011 【总页数】6页(P2082-2087)

【关键词】金线莲;无公害种植;规范化;质量控制 【作 者】胡帅军;朱星语;孟祥霄;高翰;刘霞;张重义

【作者单位】武汉理工大学化学化工与生命科学学院 武汉 430070;武汉理工大学化学化工与生命科学学院 武汉 430070;中国中医科学院中药研究所 北京 100700;武汉理工大学化学化工与生命科学学院 武汉 430070;武汉理工大学化学化工与生命科学学院 武汉 430070;福建农林大学作物科学学院 福州 350002;福建农林大学作物 遗传育种与综合利用教育部重点实验室 福州 350002 【正文语种】中 文 【中图分类】R282.2

金线莲系兰科植物花叶开唇兰Anoectochilus roxburghii（Wall.）Lindl的新鲜或干燥全草，在民间有金丝线、金耳环、金钱草、金线虎头蕉等别名[1]。现代研究表明，金线莲富含黄酮类、多糖、生物碱、甾体及其衍生物、强心苷类等多种成分[2]。对咯血、支气管炎、肾炎、膀胱炎、糖尿病等病症有很好的治疗效果[3]，野生金线莲主要分布地区有台湾、福建、海南、广东等省[4]。目前金线莲的人工种植基地主要分布在福建省、浙江省和台湾省。其中福建永安、南靖等县所种植的金线莲商品质量最高，产业发展最为成熟。永安县所产金线莲多糖总含量高达19.3%，黄酮、氨基酸等有效成分含量也较高，高于其他地区所产金线莲[5]。然

而由于金线莲种植企业规模小，没有统一标准，在金线莲栽培中大量使用农药、菌肥等外源物质，在金线莲的生产加工环节进行不规范操作，常会导致药材农残及重金属含量超标。因此开展金线莲栽培技术的研究对提高金线莲的产量和质量具有重要意义。

人们对于中药材质量要求随着人类生活水平的提高而逐渐提高，但中药材在种植、生产加工以及销售环节仍存在一些不规范的操作。例如，种植过程中为了追求产量而使用对健康有害的化学农药和生长激素，中药材加工过程中使用硫磺熏蒸导致二氧化硫残留超出限量，使得中药材质量受到严重的影响，加之传统的中药材种植与加工已经不能满足人们的需求，因此无公害中药材应运而生。无公害中药材的含义是从产地环境、生产过程、产品质量等多个环节进行严格检测，生产出不危害人体健康的安全、优质中药材[6]。无公害栽培技术已经广泛应用在三七、西洋参、金银花和山药等中药材种植产业中[7-11]。为了规范金线莲的栽培管理，提高金线莲药材的产量和质量，特制定了本规程。本规程规定了金线莲无公害种植规范技术，适用于金线莲主产区无公害种植，对金线莲的产地环境、选种育种、以及种植管理等方面进行了探究。 1 金线莲的产地环境

1.1 无公害金线莲产地生境条件

无公害金线莲生产的产地环境应符合国家《中药材生产质量管理规范（试行）》、GB15618-2018土壤环境质量标准（试行）、NY/T2798.3-2015无公害农产品生产质量安全控制技术规范、GB3095-2012环境空气质量标准、GB3838-2002国家地面水环境质量标准、GB5084-2005农田灌溉水质标准等要求[12]。

无公害金线莲产地的生态环境条件、产地和灌溉水源不能受工业“三废”、城镇生活、医疗废弃物等污染。无公害金线莲种植土壤环境的要求，依据《中国药材产地生态适宜性区划（第二版）》对土壤类型的规定，种植地土壤必须符合GB15618

和NY/T391的一级或二级土壤质量标准要求[13,14]。在确定金线莲的种植区域前需要先对土壤类型、重金属含量以及空气环境质量检测，空气质量应符合表1中一、二级标准值要求[15]，土壤类型及重金属和有害元素限量应符合表2中的要求。 1.2 无公害金线莲适宜产区

根据“药用植物全球产地生态适宜性区划信息系统”（geographic information system for globe medicinal plants，GMPGIS）[16]对金线莲产地进行生态适应性分析，金线莲产地区域生态因子值范围包括：最冷季均温6.6-22.9℃、最热季均温19.1-31.1℃、年均温14.7-26.2℃、年均相对湿度49.7762-77.8157%、年均降水量1024-2485 mm、年均日照136.308-195.504 W·m-2（表3）。 2 土壤改良

金线莲是一种典型的阴生药用植物，所需生境独特，对小气候环境的要求尤为严格。人工栽培金线莲要求栽培地区海拔高度在200-1000 m，水资源丰富，方便灌溉和排水，需要有提供荫蔽的阔叶林或竹林地，并且交通便利。土壤中重金属含量应符合规范。

目前人工栽培金线莲的最有效栽培方式是人工搭棚种植。大棚长度不超过25 m，地面宽6 m，拱高3 m，大棚上铺一层塑料薄膜后，还需利用75%遮阳网进行遮光处理，为了方便实时调节光照强度，大棚上方还应架设一层能够收放自如的50%的遮阳网[17]。清除棚区的杂草杂物，选用泥炭、珍珠岩和蛭石（体积比2∶1∶1）的栽培基质。种植前对栽培基质进行消毒，消毒方式有高温灭菌或化学试剂灭菌两种[18]，消毒后在基质拌入熟石灰将pH值控制在5.4-5.6。 3 优良种苗繁育

金线莲的种子需真菌共生才能萌发，发芽率很低。而传统的分根和扦插方式繁殖，则所需时间长且繁殖系数不高，很难形成规模[19]。因此主要采用离体培养获得再生植株。

表1 金线莲种植基地空气质量要求污染物项目单位二氧化硫（SO2）μg/m3二氧化氮（NO2）一氧化碳（CO）mg/m3颗粒物（∅≤10 μm）μg/m3颗粒物（∅≤10 μm）镉（Cd）汞（Hg）砷（As）因此平均时间年平均24小时平均1小时平均年平均24小时平均1小时平均24小时平均1小时平均年平均24小时平均年平均24小时平均年平均年平均年平均年平均浓度限值一级

≤20≤50≤150≤40≤80≤200≤4≤10≤40≤50≤15≤35≤0.005≤0.05≤0.006≤0.000025二级

≤60≤150≤500≤40≤80≤200≤4≤10≤70≤150≤35≤75≤0.005≤0.05≤0.006≤0.000025 μg/m3

表2 无公害金线莲种植土壤类型及重金属和有害元素限量土壤类型主要土壤类型为红砂土、强淋溶土、黑钙土、薄层土、潜育土、低活性淋溶土、变性土等。重金属和有害元素项目总镉（mg/kg）总汞（mg/kg）总砷（mg/kg）总铅（mg/kg）总铬（mg/kg）总铜（mg/kg）限值（范围）≤0.30≤0.25≤25≤50≤120≤50 依据产地环境现状，选择已有品种进行种苗繁育。开唇兰属2个主要药用栽培品种是台湾开唇兰和花叶开唇兰，规范化种植为花叶开唇兰。针对金线莲生产情况，选择适宜当地的、抗病虫害、品质优良、产量高、商品性好的优良品系。金线莲组织培养所需的外植体要求形态已基本形成，生长速度快，遗传性稳定，故选取梗茎粗大、叶片宽且厚的健康金线莲梗茎作为外植体。首先一边用流水冲洗，一边用软刷仔细清洗灰尘10-15 min后，再用蒸馏水冲洗1-2遍，在无菌操作台上晾干，把叶片切除至柄底，然后在装有75%酒精的烧杯中放置12 s，取出后放入盛有5%次氯酸钠溶液的锥形瓶中消毒15-18 min（先摇晃2-3 min，再静置13-15 min），接着投入无菌水中清洗6次，最后，取出在无菌条件下将茎的每一个节眼切成一段置入启动培养基中进行诱导[20-21]。在启动培养基上培养的金线莲梗茎，在休眠约3周后渐渐膨大成原球茎，60天后原球茎分裂成丛苗，芽分化率为76%。

然后利用增殖培养基诱导离体培养苗扩大繁殖，最后把离体培养苗放在生根培养基上诱导生根。整个组织培养过程中温度控制在25±2℃，每天光照时间为10-12 h，分生期所需的光照强度为300-700 lx，壮芽期瓶苗所需的光照强度为1200-1500 lx。由于存在不发达的茎叶表面角质层，较差的光合作用能力，生长细弱，较少的叶片气孔，根的吸收功能差，对逆境的适应性和抵抗能力较差等缺陷，所以把试管苗从试管转移到外界时，试管苗所处的环境变化较大，容易造成试管苗成批死亡。 表3 金线莲野生分布区、道地产区、主产区气候因子阈值（GMPGIS-II）生态因子年均温度/℃平均气温日较差/℃等温性/%气温季节性变动（标准差）最热月最高温度/℃最冷月最低温度/℃气温年较差/℃最湿季度平均温度/℃最干季度平均温度/℃最热季度平均温度/℃最冷季度平均温度/℃生态因子值范围14.7-26.2 7.3-12.9 25-63 1.455-8.228 22.5-40.7 1.2-16.7 14.1-32.4 19.1-28 8.9-29.1 19.1-31.1 6.6-22.9生态因子年均降水量/mm最湿月降水量/mm最干月降水量/mm降水量季节性变化（变异系数/%）最湿季度降水量/mm最干季度降水量/mm最热季度降水量/mm最冷季度降水量/mm年均日照/（W/m2）年均相对湿度/%生态因子值范围1024-2485 199-827 3-42 47-131 542-2249 25-158 128-2086 25-191 136.308-195.504 49.7762-77.8157

表4 无公害金线莲生产肥料施用方法施用类型基肥追肥肥料种类及施用方法基质以菜园土∶河沙∶椰糠=1∶1∶1，或河沙∶菜园土∶粪堆肥=1∶1∶1较佳，基质厚度20-30 cm N∶P∶K配比为30∶10∶10 N∶P∶K配比为20∶20∶20 N∶P∶K配比为10∶30∶20施用时期整地作畦期小苗期中苗期成苗期

为了使试管苗适应外部环境，移栽前先打开瓶盖10天进行室内炼苗。取出试管苗时，洗干净附着在苗上的固体培养基，置于多菌灵400倍液中浸泡5 min或0.5%高锰酸钾溶液中浸泡1-2 min，避免试管苗感染病菌死亡[22]。移栽的植株至少株高4 cm，具有2-4条根，生长状况良好方可移栽至基质，以保证成活率。移栽时

根据植株大小，根的数目分级移栽，不符合移栽条件的试管苗继续在培养基上培养。移栽基质应保持湿润疏松，根据植株大小确定栽植密度，一般500-600株/m2为宜[23]。移栽后，及时遮阴，以0.1%植物根部营养液作为定根水浇灌试管苗根部。金线莲忌阳光直射，小苗需遮荫80%-90%，成苗遮荫70%-80%。荫棚高度以方便人工管理为宜。试管苗炼苗环境空气湿度90%以上，遮荫度90%以上，并搭建遮雨设施；炼苗成活后栽培环境空气湿度80%以上，遮荫度80%以上，有降温设施[24]。金线莲在移植成活后，须全面检查，发现死苗缺株的及时补上同批苗，保证全苗生产。

金线莲生长环境空气湿度较大，雨水较多，杂草生长速度快，封行前根据情况勤除草。由于金线莲种植密度大，应用手拔除杂草以免伤苗，同时还能松土，增加基质透气性。 4 合理施肥

无公害金线莲的肥料施用应坚持多种原则[25-28]，未经国家或省级农业部门登记的化肥或生物肥料禁止使用；使用肥料的原则和要求、允许使用和禁止使用肥料的种类等按DB13/T454执行[29]。有机肥搭配无机肥使用，既能改良土壤，又能补充金线莲生长所需要的微量元素、提高金线莲产量和质量。

金线莲移栽一个月后，可以进行第一次施用兑水稀释的腐熟有机肥，施肥后需要用清水再淋洗植株，避免烧苗，每个月施用两次。浅施不易挥发的肥料；深施易挥发的肥料。深施氮肥可以在减少肥料挥发、流失的同时，又能避免氨离子被土壤表层的硝化细菌转化成硝酸根离子，降低对金线莲的污染。深施化肥还能促进金线莲根系的生长，增强金线莲的抗逆性。金线莲采收前不再施用任何肥料，防止化肥和微生物污染[30]。 5 病虫害综合防治

病虫害使中药材的产量及品质大大下降，因此加强病虫害防治是金线莲无公害栽培

过程中的重要环节。要按照“预防为主，综合防治”的方针，以改善生长环境，加强田间管理为基础，从根源上杜绝病虫害的发生，发生病虫害时，优先选用农业防治、生物防治和物理防治的生态友好型方法。生产过程遵循有害生物防控物质的选用原则、农药使用规范和无公害中药材农药与重金属残留要求，相应准则参照NY/T393绿色食品农药使用准则[31]、GB12475农药贮运、销售和使用的防毒规程[32]、NY/T1667（所有部分）农药登记管理术语[33]。 5.1 农业综合防治

农业防治是指采用管理手段改变环境因子从而减少病虫害的发生。无公害金线莲的农业防治包括：农艺方法；控制种群密度；水、肥、光的综合调控。农艺方法包括套作、翻耕等，金线莲套作藤本植物有利于适时播种，可避开病虫危害高峰期。翻耕可以把地下病菌、虫卵翻到地表，结合晒垄对土壤消毒可以减少病虫害的发生。深翻还可以疏松土层，促进金线莲根系发育。金线莲生长期间要采取中耕、松土、除草等措施，可以有效防治各种病虫害。合理配置行距，优化群体结构；按照株行距20 cm×20 cm进行种植。合理规划种植密度是为了让金线莲有足够的生长空间，同时生长期间能吸收到足够的营养，消除导致发病的局部小气候条件，确保金线莲稳定健康地生长。金线莲对水分较为敏感，空气湿度75%-95%可以促进金线莲的生长并提高鲜重。若排水不及时，基质过湿会导致根部腐烂，应当采取排水通风措施。若灌溉不及时，则会影响金线莲的正常生长。施肥必须要满足金线莲生长的实际需要，控制好每次施肥的比例大小。光在金线莲生长发育过程中起到非常重要的作用，一般温度在16-28℃为宜，光照强度以2600-3800 lx为宜。金线莲忌直射光，喜散射光，强烈的光照会使叶片白化甚至损伤叶片，而光照不足则会影响植物的光合作用，导致植株细弱，生长缓慢。 5.2 化学防治

在无公害中药材生产过程中，限量使用高效、低毒、低残留的农药，禁止使用高毒、

高残留的药品。对症下药，适时用药，尽可能减少用药次数，注意施药时间间隔，避免长时间使用一种药物导致害虫的抗药性。在蜗牛、蛞蝓和马陆等软体动物多发时，适量的撒一些生石灰或6%四聚乙醛在苗床周围。 5.3 物理防治

移栽前翻晒基质来杀死虫卵、病菌。在大棚通风口设置防虫网，减少害虫，蛇类进入大棚的机会，大棚上空搭建防鸟网，防止鸟类偷食金线莲。在夜间放香蕉皮或小白菜的叶子来诱捕蜗牛和蛞蝓等夜行软体动物。 5.4 生物防治

生物防治是指利用细菌、真菌、病毒、植物浸提液或抗生素等制成的生物农药来灭杀害虫[37]。对于金线莲黑腐病可以在组培瓶苗出瓶清洗后用25%多菌灵800倍液浸泡20-30 min，取出晾干后再进行种植。对于软腐病可用400 mg·L-1的链霉素7-10天喷洒一次，连喷3次。喷洒阿维苏2000倍液防治红蜘蛛。

无公害金线莲主要病害类型为黑腐病、细菌性软腐病、斑病，主要虫害类型为蜗牛、蛞蝓和红蜘蛛等。其无公害防治方法如表5。 6 讨论与展望

作为民间著名草药金线莲疗效确切，深受群众喜爱，但由于野生金线莲资源匮乏[38]，加上无节制采挖，使种群数量大大减少[39]。随着组织培养和栽培等关键技术突破性的进展，金线莲的产业规模迅速扩大。然而，由于缺少金线莲产品质量标准，市场上产品质量参差不齐，存在以次充好、售假掺假的现象，部分不法商家甚至将几乎无疗效，有激素残留和抗生素代谢不完全的组培瓶苗直接投放市场，造成销售市场混乱[40]，使金线莲市场的发展受到严重制约。

无公害中药材生产技术规程包含了从源头到生产的全过程质量控制，涵盖产地环境、生产过程、产品质量等控制中药材生产的每个环节。无公害金线莲利用基于GMPGISⅡ的无公害中药材精准选址技术确定金线莲主要生长区域生态因子范围以

及最适宜的引种栽培地点。基于本草基因组学辅助中药材优质新品种选用的策略可加快中药材新品种的选育[41]。如董林林等[42]利用RAD-Seq技术筛选出三七抗病品种-苗乡抗七1号的特异SNPs位点，辅助抗病新品种的选育。XU等[43]通过对全基因组分析获得1652个抗性基因，可为人参抗性育种奠定分子基础。另外，科学规范的种植模式及病虫害防治方法还可以为金线莲的规范化生产提供指导，有效促进金线莲产业的健康可持续发展。

表5 主要病害类型及无公害防治方法[34-37]类型名称危害部位·发病规律黑腐病主要发生在基部多发生在高温、高湿的雨季或幼苗出瓶时损伤根系或叶片未经消毒。病害细菌性软腐病叶片斑病叶片高温及潮湿容易发病。由灌溉、喷水、雨水、栽培介质、农具及动物传播。在潮湿的环境中容易得此病虫害蛞蝓和蜗牛叶片夏季高温多雨水活动频繁。一般在夜晚或雨天出来觅食。红蜘蛛叶片7-8月份是高发期防治方法①加强田间管理，提高植株抗病能力。②清洗出瓶的组培苗用70%的甲基托布津800-1000倍液或25%多菌灵800倍液浸泡20-30 min，取出晾干后再种植。③发病后，把病株连根拔起并在大棚外集中处理，控制传染源。每隔7-10天喷洒70%甲基托布津700-800倍液，或50%可湿性多菌灵粉剂800-900倍液。①园地通风控制空气湿度，防止该病传染蔓延。②对已发生病害的植株应集中隔离，切除病叶部分并销毁，切口涂多菌灵或喷洒抗细菌的抗菌药。可用400 mg·L-1的链霉素7-10天喷洒一次，连喷3次。加强通风，降低湿度和温度；或用抗生素200-1000倍液防治。①采用农药制剂的诱杀法，如聚乙醛类药剂，将其制成颗粒状；或用2000倍的阿维苏喷洒；②可用诱捕法，在夜间放香蕉皮或小白菜的叶子来诱捕。①各喷施1次73%克螨特3000倍、10%吡虫啉5000倍液；②喷洒阿维苏2000倍液。 参考文献

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