液相色谱实验报告

仪 器 分 析 实 验 报 告

实 习 名 称： 液相色谱实验 学 院： 化学工程学院 专 业： 化学工程与工艺 班 级： 姓 名： 学 号 指 导 教 师： 日 期：

一、实验目的

1、了解HPLC的结构，了解仪器的开关程序。 2、了解流动相的制备和样品溶液的制备。 3、用外标法测浓度。

二．仪器及试剂

仪器：美国安捷仪1200HPLC、微量注射器

试剂；乙腈和重蒸水、BAPP

三、 操作流程或步骤

1、流动相的准备 2、开机。色谱柱平衡。 3、样品溶液的准备。 4、基线的查看。 5、样品进样的分析。 6、色谱柱的清洗。 7、关机。

四．实验参数 见附页

五、 实验结论

压力：101bar 柱温：30摄氏度 流量：1.000mL/min 样品：BAPP 柱长：25cm

标准曲线： 浓度/mg/mL 峰高 峰面积 560.98090 23836.7 1111.35718 1441.25330 48104.9 64018.9 1853.67554 1905.95911 81651.9 85131.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0

B20001800160014001200######h1000800600400200002c

峰高-浓度

Y=686.45x+1.735

B90000######800007000060000s5000040000300002000002c

峰面积-浓度

Y=31227x-1905.8

由实验参数得：S=56930.5 h=2368.1 由S-c图得：c=1.85mg/mL 由h-c图得：c=3.43mg/mL

所以，由图可得未知溶液的浓度为1.85mg/mL。

六、实验结论

本次实验采用的是液相色谱外标法测量未知样品的浓度，测得未知样品浓度为1.3331mg/ml。

七、实验注意事项

1、流动相必须用HPLC级的试剂，使用前过滤除去其中的颗粒性杂质和其他物质。 2、每次做完样品后应该用溶解样品的溶剂清洗进样器。

3、使用缓冲溶液时，做完样品后应立即用去离子水冲洗管路及柱子，然后用甲醇或甲醇水溶液冲洗，以充分洗去离子。

4、气泡会致使压力不稳，重现性差，所以在使用过程中要尽量避免产生气泡。 5、如果进液管内不进液体时，要使用注射器吸液。