大肠菌群检测方法

本标准适用于出口食品及其原料。 二.设备和材料

1.超净工作台：琼脂平板在工作台上暴露15min,每平板不得超过15个菌落。

2.恒温培养箱：36±1℃。 3.恒温水浴箱：45±1℃。

4.吸管：1mL、10mL，具0.1mL刻度。 5.稀释瓶：300 mL三角锥形瓶。 6.显微镜。

7.试管：150x150，18 x 180mm 三.培养基和试剂

1.月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤（LST） 2.煌绿乳糖胆盐肉汤（BGLB） 3.8.5‰生理盐水

四.样品制备（以上述平板菌落制备的样品为测定大肠菌群的样品匀液）

五.大肠菌群的测定

1.大肠菌群MPN值的测定

（1） 对每个样品，选择适宜的三个连续稀释度的样品稀释液。1：10稀释度接

种三管月桂基硫酸盐胰蛋白胨（LST）肉汤，每管10ml；1：100和1：1000稀释度接种三管月桂基硫酸盐胰蛋白胨（LST）肉汤，每管1ml。 （2） 将接种管置于36±1℃培养48±2h。

（3） 观察试管的产气情况：检查导管内是否有气泡产生，如所有LST肉汤管

均未产气，则可报告为大肠菌群阴性；如有产气者，则进一步作证实试验。

2. 大肠菌群的证实试验

（1） 将所有产气管用直径为3mm的接种环移种到煌绿乳糖胆盐（BGLB）肉汤

管中。

（2） 置BGLB肉汤管于36±1℃培养48±2h。 （3） 记录所有BGLB肉汤管的产气管数。

（4） 结果报告：按BGLB肉汤管产气管数，查MPN表报告每克（毫升）样品

大肠菌群的MPN值。

六.MPN检索表

阳性管数 MPN 阳性管数 MPN 1ml（g）×3 0.1ml（g）×3 0.01ml（g）×3 100m（g） 1ml（g）×3 0.1ml（g）×3 0.01ml（g）×3 100m（g） 0 0 0 0 0 1 0 0 2 0 0 3 0 1 0 0 1 1 0 1 2 0 1 3 0 2 0 0 2 1 0 2 2 0 2 3 0 3 0 0 3 1 0 3 2 0 3 3 1 0 0 1 0 1 1 0 2 1 0 3 1 1 0 1 1 1 1 1 2 1 1 3 1 2 0 1 2 1 1 2 2 1 2 3 1 3 0 1 3 1 1 3 2 1 3 3 〈30 30 60 90 30 61 92 120 62 93 120 160 94 130 160 190 36 72 110 150 73 110 150 190 110 150 200 240 160 200 240 290 2 0 0 2 0 1 2 0 2 2 0 3 2 1 0 2 1 1 2 1 2 2 1 3 2 2 0 2 2 1 2 2 2 2 2 3 2 3 0 2 3 1 2 3 2 2 3 3 3 0 0 3 0 1 3 0 2 3 0 3 3 1 0 3 1 1 3 1 2 3 1 3 3 2 0 3 2 1 3 2 2 3 2 3 3 3 0 3 3 1 3 3 2 3 3 3 91 140 200 260 150 200 270 340 210 280 350 420 290 360 440 530 230 390 640 950 430 750 1200 1600 930 1500 2100 2900 2400 4600 11000 〉11000

注：1.本表采用3个稀释度1ml（g），0.1 ml（g），0.01 ml（g），每稀释度3管。

2.表内所列检样量如改用10 ml（g），1ml（g），0.1ml（g）时，表内数字应相应降低10倍；如改用0.1 ml（g），0.01ml（g），0.001ml（g）时，表内数字应相应增加10倍；其余可类推。