鸡血藤质量控制及药理作用研究进展

杨冉冉;吴怡青;林瑞超;邹迪新;刘新;姬蕾;刘雯雪;赵崇军;王昭懿;赵霞;顾念念;孟雪丹 【摘 要】鸡血藤是一味常用的活血化瘀中药,现代药理学研究证明,鸡血藤具有改善造血功能、抗肿瘤、抗血栓、免疫调节、抗病毒、抗炎、抗氧化、对络氨酸酶双向调节、镇静催眠等药理作用.但其药效物质基础和药理作用机制尚未明确,质量控制方法也有一定的局限性,制约了鸡血藤的现代化进程.因此,本文对近年来鸡血藤的研究情况进行综述,从质量控制和药理活性两方面对鸡血藤的研究进展进行归纳与整理,为进一步开发利用提供参考. 【期刊名称】《环球中医药》 【年(卷),期】2018(011)011 【总页数】6页(P1833-1838) 【关键词】鸡血藤;质量控制;药理活性

【作 者】杨冉冉;吴怡青;林瑞超;邹迪新;刘新;姬蕾;刘雯雪;赵崇军;王昭懿;赵霞;顾念念;孟雪丹

【作者单位】1002401 北京中医药大学中药学院 中药品质评价北京市重点实验室;1002401 北京中医药大学中药学院 中药品质评价北京市重点实验室;1002401 北京中医药大学中药学院 中药品质评价北京市重点实验室;内蒙古医科大学药学院;1002401 北京中医药大学中药学院 中药品质评价北京市重点实验室;1002401 北京中医药大学中药学院 中药品质评价北京市重点实验室;1002401 北京中医药大学中药学院 中药品质评价北京市重点实验室;1002401 北京中医药大学中药学院 中药品质评价北京市重点实验室;1002401 北京中医药大学中药学院 中药品质评价

北京市重点实验室;1002401 北京中医药大学中药学院 中药品质评价北京市重点实验室;1002401 北京中医药大学中药学院 中药品质评价北京市重点实验室;1002401 北京中医药大学中药学院 中药品质评价北京市重点实验室 【正文语种】中 文 【中图分类】R285

鸡血藤是一味传统的活血化瘀中药，《中华人民共和国药典》(2015年版)收载其为豆科植物密花豆Spatholobus suberectus dunn的干燥藤茎，性苦、甘、温，归肝、肾二经，具有活血、补血、调经、通络等功效[1]。现代药理研究表明，鸡血藤在改善造血系统、抗血栓、降血脂、降血压、抗肿瘤、抗病毒、调节免疫系统等多方面具有较好的治疗作用。本文将近年来对鸡血藤的质量控制和药理作用研究综述如下。

1 鸡血藤质量控制研究现状 1.1 指纹图谱研究

严启新等[2]采用HPLC法建立了11批鸡血藤样品和7批鸡血藤混伪品的指纹图谱，共获得11个色谱峰，包括5个共有峰，6个非共有峰，指认出6个色谱峰，分别为原儿茶酸、大豆黄素、对羟基苯甲酸、芒柄花素、大黄素和樱黄素。丁平等[3]建立了23批鸡血藤药材的RP-HPLC指纹图谱，共获得16个共有峰，确认6个化学成分，分别为原儿茶酸、表儿茶素、大豆苷元、染料木素、毛蕊异黄酮和异甘草素，该方法专属性较强，可为鸡血藤质量控制提供依据。刘静等[4]采用快速高效的UPLC对18批鸡血藤药材的质量进行分析，共获得18个共有峰，指认出3个化合物，分别为原儿茶酸、儿茶素、表儿茶素。李小英等[5]建立了同一产地鸡血藤干品和鲜品的指纹图谱，其共有峰个数分别为17、16个，经比较发现，干

品的色谱峰主要集中在35分钟前，而鲜品在35分钟后色谱峰较多；干鲜品的共有峰峰面积差异也较大。 1.2 含量测定研究

目前对于鸡血藤含量测定的研究主要为儿茶素类化合物，少数学者对异黄酮类化合物也有研究。刘超等[6]建立了HPLC测定鸡血藤中没食子儿茶素、儿茶素、表儿茶素含量测定的方法，比较了5批药材中3种化学成分间的差异，该方法简便快速，适合鸡血藤中儿茶素类化学成分的含量测定。张敏等[7]采用快速高效液相法建立了同时测定鸡血藤中原儿茶酸、表儿茶素、儿茶素含量的分析方法，节约了大量的时间和溶剂。黄灿辉[8]、翟明等[9]、林惠贞等[10]先后均测定了鸡血藤药材中原儿茶酸的含量，为其质量评价提供了科学依据。边宝林等[11]、李坚等[12]先后建立了HPLC法测定鸡血藤中表儿茶素的含量。李莹等[13]、陈乾平等[14]先后采用了高效液相色谱的方法，建立了鸡血藤中芒柄花素含量测定的方法。郑岩等[15]建立了高效液相色谱法测定芒柄花素和3-羟基-9-甲氧基紫檀烷的方法，比较了19批药材中两种化合物含量的差异，为鸡血藤质量控制提供依据。仰铁锤等[16]采用HPLC测定了23批鸡血藤药材中原儿茶酸、大豆苷元、表儿茶素、毛蕊异黄酮、异甘草、染料木素6种指标成分的含量，不同批次药材各成分均有差异。该方法准确可行，可为新版《中国药典》建立鸡血藤药材的质量标准提供参考。 中药质量控制是影响中药现代化进程的重要环节之一，中药为多组分复杂体系，仅根据药材中的某个或某几个化学成分来评价药材的质量是不全面的。中药指纹图谱运用现代分析测试技术得到药材的光谱图或色谱图，能够反映药材的化学成分和含量分布情况，是一种综合的、可量化的鉴定手段，可用来作为鉴别中药真伪优劣的依据，因此药材中化学成分的测定和指纹图谱的建立相结合才是实现药材质量控制的有效手段。 2 鸡血藤的药理作用

2.1 对血液系统的影响

古代专著中曾记载鸡血藤可以去瘀血、生新血，称之为“血分之圣药”[17]。现代许多药理研究也证实了鸡血藤的补血活血功效。陈宜鸿等[18]采用腹腔注射盐酸苯肼(phenyl hydrazine hydrochloride，PHH)辅以60Co全身辐射的方法造成小鼠骨髓抑制与溶血性贫血，实验表明，给药鸡血藤的小鼠能使白细胞(white blood cell，WBC)和骨髓有核细胞数目增加，促进骨髓粒细胞分裂，对贫血小鼠的粒单系祖细胞的增殖也有明显的刺激作用。王东晓等[19]利用60Coγ射线全身照射的方法，使小鼠的各造血祖细胞数量减少，实验结果表明，长期给药高剂量鸡血藤单体SS8的小鼠可显著升高粒单系祖细胞、巨核系造血细胞和红系造血祖细胞数量，且具有一定量效关系。作者推测其机制可能为给药后刺激机体产生某些生物活性成分从而影响造血祖细胞的增殖和分化。陈东辉等[20]采用皮下注射乙酰苯肼(acetyl phenyl hydrazine，APH)和环磷酰胺(cyclophosphamide，CTX)的方法制造小鼠骨髓抑制-溶血性贫血模型，以造血生长因子生物活性检测技术考察鸡血藤对骨髓细胞增殖的影响。实验结果表明鸡血藤不仅能提高正常小鼠或骨髓抑制-溶血性贫血小鼠的骨髓细胞增殖能力，同时经鸡血藤体内诱导制备的腹腔巨噬细胞培养液、骨骼肌条件培养液、脾细胞条件培养液、肺条件培养液分泌的集落刺激因子(colony-stimulating factor，CSFs)对贫血性小鼠的骨髓细胞增殖也有强烈的促进作用。Burgess等[21]从小鼠的肺条件培养液中分离得到的粒细胞CSFs、单核细胞CSFs和粒/单核细胞CSFs对刺激集落形成能力、增加骨髓内细胞数量和增强完全成熟的终末细胞有重要作用。陈宜鸿等[22]发现鸡血藤水煎液对PHH和60Co照射后所致骨髓抑制与溶血性贫血的小鼠具有明显缓解作用，可显著提高红细胞(red blood cell，RBC)数量和血红蛋白(hemoglobin，HGB)数量，升高红血球容积(hematocrit，HCT)和红细胞分裂指数，促进早期红系祖细胞和晚期造血红系祖细胞的增殖。

张浩等[23]通过眼眶取血复制失血性血虚模型、腹腔注射CTX复制化学性血虚模型、皮下注射APH同时控制饮食复制综合血虚模型，结果表明，模型组小鼠的RBC、HGB、HCT和血小板计数(platelet，PLT)均降低，灌胃给药鸡血藤醇提物的高、中剂量组RBC、HGB、HCT和PLT均升高，差异具有统计学意义，可为鸡血藤补血功效提供理论依据。罗霞等[24]观察鸡血藤对CTX所致小鼠骨髓损伤模型的修复作用，实验结果表明，鸡血藤对血窦容量和造血组织容量有显著的恢复作用，并可在骨髓组织切片中明显的看到成熟粒细胞。邓家刚等[25-26]发现鸡血藤总黄酮对CTX所致的骨髓抑制小鼠可升高体内WBC和骨髓单核细胞(bone marrow nucleated cell，BMNC)的数量；对PHH所致的血虚小鼠可升高RBC、WBC和HCT；对CTX所致的白细胞减少症有强烈的拮抗左右；对60Co所致的血虚小鼠有升高WBC和RBC的作用。作者还利用PHH和CTY复合造模，发现鸡血藤总黄酮可通过促进机体分泌白细胞介素-3(interleukin-3，IL-3)促进红系细胞造血。

2.2 对心脑血管系统的影响

王巍等[27]人发现鸡血藤具有降低总胆固醇、升高高密度脂蛋白胆固醇-2、高密度脂蛋白胆固醇-3、延缓动脉粥样硬化的作用。张志萍等[28]发现鸡血藤降低高脂模型大鼠的血清胆固醇、甘油三酯、血浆脂质过氧化产物、低密度脂蛋白的含量，提高高脂模型大鼠的高密度蛋白含量，并可促进血浆超氧歧化酶活性。结果提示，鸡血藤具有降血脂和抗脂质过氧化的作用。张太平等[29]通过体外血小板聚集实验发现鸡血藤高、中、低剂量组均能抑制血小板聚集，且与剂量呈相关性；作者通过处死大鼠后研究胸主动脉血管舒张功能发现不同浓度的鸡血藤提取物均具有血管舒张作用，且血管舒张率与浓度成正相关。江涛等[30]发现鸡血藤提取物使苯肾上腺素、CaCl2和KCl收缩血管的量-效曲线右移，并可抑制最大效应，对Phe收缩反应中Ca2+内流依赖性部分有减弱作用，结果表明鸡血藤可抑制受体依赖性钙通道和电

压依赖性钙通道，因此，鸡血藤的抗心律失常、降压作用以及抗血小板聚集作用可能与Ca2+有关。日本学者西尾孝[31]发现鸡血藤具有较强的抗血小板聚集作用，其甲醇部位活性最强。尹小明等[32]发现鸡血藤总黄酮具有较好的抗花生四烯酸诱导的血小板聚集作用。Nishio等[33]发现鸡血藤的水提物具有较强的抗血小板聚集作用，并推测其活性成分可能是缩合鞣质。李丽等[34]发现鸡血藤总黄酮能显著降低经结扎左冠状动脉前降支所致急性心肌缺血大鼠血清的谷草转氨酶、乳酸脱氢酶、肌酸激酶活性和心肌组织中丙二醛水平，提高SOD活性，抑制心电图ST段的抬高幅度，具有明显改善心肌组织的病理状态的作用。徐爱钰等[35]采用线栓法和结扎双侧颈动脉法分别制备大鼠脑动脉缺血模型和大鼠急性脑缺血再灌注模型，结果表明，灌胃鸡血藤总黄酮的实验组大鼠行为障碍得到改善、缺血区面积减少、脑水肿现象减轻、SOD和谷胱甘肽过氧化酶(glutathione peroxidase，GSH-Px)活性降低、MDA水平升高。 2.3 抗肿瘤作用

唐勇等[36]发现鸡血藤黄酮类成分具有抑制人肺癌A549和人大肠癌HT-29的作用，其机制为鸡血藤黄酮类化合物可以阻滞人肺癌A549于S和 G2/M期，阻滞人大肠癌HT-29于G2/M期，因此调控细胞周期是鸡血藤发挥抗肿瘤作用的主要机制之一。此外，通过外周血象分析，RBC显著增加，增长率高达40.52%，所以，鸡血藤能够改善化疗引起的骨髓抑制和肿瘤晚期贫血。Kang等[37]发现鸡血藤甲醇提取物具有抑制黑色素瘤细胞B16-BL6引起的血小板凝聚作用，并拮抗肿瘤细胞HT1080的扩散，作者推测鸡血藤甲醇提取物通过阻滞肿瘤细胞诱导血小板凝聚，具有抑制肿瘤转移作用。徐建亚等[38]采用MTT法研究发现鸡血藤水提液可以减少小鼠肺转移结直径与数目，抑制B16-BL6细胞与基底膜成分LN的黏附，拮抗该细胞侵袭基底膜的能力，充分验证了鸡血藤具有抗肿瘤转移的作用。程悦等[39]采用MTT法研究不同浓度的鸡血藤乙醇提取物、丙酮水提取物对结肠癌HT-

29细胞增殖的抑制作用，结果发现，60%乙醇提取物抗肿瘤活性最强，经测定60%乙醇提取物中黄酮类化合物最多。该课题组后期又研究了不同溶剂提取物对结肠癌HT-29和乳腺癌MCF-7细胞增殖的抑制活性，结果发现鸡血藤不同溶剂提取物均具有一定程度的抑制作用，其中正丁醇萃取物抑制两种细胞增殖的活性最强。正丁醇萃取物中所含鞣质类成分高达83.11%，说明除黄酮类化合物外，鞣质类成分也是鸡血藤发挥抗肿瘤作用的活性成分[40]。薛丽君等[41]采用MTT法和集落形成法研究鸡血藤乙酸乙酯提取物对宫颈癌细胞株Hela、白血病细胞株L1210和P388D1、黑色素瘤细胞株B16和人胃癌细胞株SGC7901的抑制作用，结果发现鸡血藤乙酸乙酯提取物对这5种肿瘤细胞株的生长均有抑制作用，且具有量效关系。Ha等[42]研究发现鸡血藤二氯甲烷萃取物具有诱导人单核细胞白血病U937细胞凋亡的作用。 2.4 抗病毒、抗菌作用

庞佶等[43]采用细胞病变CPE和MTT比色法，研究发现鸡血藤提取物具有抑制肠道病毒(Coxsackie B3病毒、Coxsackie B5病毒、Echo 9病毒、Echo 29病毒和 Polio I病毒)的作用，其中对Echo 9 病毒的拮抗作用最强，对Polio I 病毒的抑制作用最弱。后期该课题中又研究发现鸡血藤水提物能够降低病毒感染小鼠的肺指数、死亡率，具有抗流感病毒AI的作用[44]。曾凡力等[45]研究发现鸡血藤60%醇提物具有抗单纯疱疹病毒Ⅰ型、抗乙型肝炎病毒和甲型流感病毒活性，且对单纯疱疹病毒Ⅰ型的效果最明显；作者将醇提取进行萃取，结果表明，乙酸乙酯萃取物和水层留余物具有较强的抗单纯疱疹病毒Ⅰ型作用。郭金鹏等[46]研究发现鸡血藤提取物具有抗柯萨奇B3病毒的作用。胡庭俊等[47]研究发现鸡血藤提取物对金黄色葡萄球菌、鸡大肠埃希菌和鸭大肠埃希菌具有抑制作用。 2.5 对免疫系统的影响

胡利平等[48]发现高、中剂量组鸡血藤水煎液均可提高小鼠LAK细胞的活性，且

高剂量组鸡血藤水煎液可提高小鼠NK细胞的活性。熊晓玲等[49]发现鸡血藤提取物具有促进正常小鼠淋巴细胞产生IL-2的作用，同时对硫唑嘌呤免疫超常模型组的IL-2增多具有拮抗作用，对CY免疫抑制模型组的IL-2减少具有促进作用，表现出双向调节作用。杨锋等[50]发现鸡血藤对IL-2的活性和T淋巴细胞转化功能具有抑制作用。 2.6 其他作用

张爱文等[51]研究不同极性鸡血藤提取物的抗炎抗氧化作用，结果发现各提取物均有一定程度的抗炎和抗氧化作用，其中水煎醇提物的抗氧化能力最强，水提物的抗炎作用最强，并推断原儿茶酸是抗炎的重要活性成分。刘仰斌等[52]采用弗氏完全佐剂诱导大鼠关节炎，结果表明鸡血藤总黄酮可以减缓大鼠慢性足肿胀、提高血清GSH-Px含量、降低血清NO水平，提示鸡血藤总黄酮可通过提高抗氧化物酶的活性，促进自由基清除，抑制氧化应激反应，从而发挥抗关节炎的功效。史晓普等[53]采用四氯化碳诱导小鼠急性肝损伤模型，研究发现，鸡血藤乙醇提取物可降低谷丙转氨酶(alanine transaminase，ALT)、GOT活性，降低MDA含量，升高SOD、GSH水平，HE染色结果表明，鸡血藤乙醇提取物恢复肝损伤能力与剂量成正相关，此实验充分证实鸡血藤乙醇提取物具有保肝作用。黄新炜[54]等还研究发现鸡血藤水提物具有镇静、催眠的药理作用。Lee等[55]研究发现鸡血藤的醇提物可以抑制黑色素沉着，抑制细胞的络氨酸酶，蛋白印迹分析实验揭示鸡血藤使络氨酸酶的表达和相关蛋白水平的降低与TRP1和TRP2基因编码的转录有关。 3 总结与展望

鸡血藤是一味常用的活血化瘀中药，化学成分较为复杂，主产于广东省、广西壮族自治区和云南省，多年生，目前，国内药材资源较为匮乏，因此多从越南、柬埔寨、缅甸、老挝等各国进口，从而造成我国市售的鸡血藤品种混乱，同时，由于野生品与栽培品不加区别、生长周期不同、采收时间不同、运输贮藏差异等因素，导致药

材质量参差不齐。《中国药典》(2015年版)中仅规定了显微鉴别、水分灰分检查和醇溶性浸出物的测定项目，因此，实现对鸡血藤药材质量全面、准确的控制和评价是当前首要任务之一。

基于以上多种药理作用，近年来鸡血藤的抗肿瘤和抗病毒活性成为国内外学者研究的热点，鸡血藤低毒的特点成为抗肿瘤活性的最大特色，可作为肿瘤患者的日常食疗产品。但目前，对鸡血藤的药效物质基础和药理机制研究尚很薄弱，影响了鸡血藤药材的开发利用。因此鸡血藤的质量控制研究和药效物质基础研究亟待进一步深入。 参考文献

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