乙肝e抗体(anti-HBe)

雅培标准操作检测程序

ARCHITECT i 2000SR

项目：乙肝e抗体（anti-HBe）

方法：化学发光微粒子免疫分析

试剂目录号：6C34

试剂包装量：100X4

本标准操作检测程序为用户实验室的认可、评审、以及其他行政管理要求，提供所有产品使用的性能标准资料。

本性能特性表可以复制。

1．实验原理和检验目的

Architect i2000SR Anti-HBe是采用化学发光微粒子免疫分析（Chemiluminesent Microparticle ImmunoAssay, CMIA）技术，竞争两步法对待测样品中的乙肝e抗体进行定性检测

Anti-HBe检测主要用来帮助诊断和监测HBV感染。

2．样品准备

血清和血浆：血清（包括SST管），血浆（EDTA-K2、肝素锂、肝素钠、枸橼酸钠、ACD、APCD-1、CP2D、CPD、草酸钾），使用玻璃管或塑料管分离样本，无黄疸、无溶血、无脂血，已分离出的样本应立即分析。

稳定性： 2－8℃可稳定7天，如需存放大于7天时，请于－20℃或更低的温度下保存。

3．试剂及标准品

3.1.1 ARCHITECT Anti-HBe试剂盒（6C34）

MICROPARTICLES磁性微粒

鼠单克隆anti-HBe包被的磁性微粒子

CONJUQATE结合物

吖啶酯标记的鼠单克隆anti-HBe

NEUTRALIZING REAGENT中和试剂

重组的HBeAg

3.1 .3其他试剂：激发液 、 预激发液 、 清洗缓冲液（需另行配置）

3.2校准品：

名称:美国雅培i2000SR Anti-HBe校准品 LIST NO.: 6C34-01

规格：CAL 1： 0.0 PEI U/mL 1LX4ml

3.3质控品

名称：美国雅培i2000SR Anti-HBe 质控品 LIST NO：6C34-10

水平 颜色 大约浓度 范围 体积

PEI U/mL S/CO % Inhibition

阴性－ 无色 0.00 1.30 - 2.70 -35.0 - 35.0 8ml

阳性＋ 蓝色 0.38 0.21 - 0.80 60.0 - 89.5 8ml

4． 校准

校准后的稳定期30天，每次更换批次时都应进行校准。按照您的实验室所建立的质控要求，使用至少三个水平的质控品进行校准曲线验证。如果质控结果不在可接受范围值内，则需要进行重新校准。

有关如何对检测进行校准的说明，见仪器特定操作手册第4单元。

5．操作步骤

按照要求准备标本，离心分离血清后，放入i2000sr标本位进行检测（具体操作详见相关仪器操作手册）

6． 质量控制

1. 每隔24小时运行三个质控水平（正常值和异常值）。

2. 如果质控结果不在实验室所规定的可接受范围值内，则患者值可疑。需使用新鲜质控品重复质控。

3. 如果质控结果仍不在可接受标准范围内，则需重新校准。每次更换试剂批次后，都要检查质控结果和可接受标准。

7． 参考值范围

≤1.00 S/CO 阳性

8． 技术性能

8.1 精密度

ARCHITECT Anti-HBe在质控范围（0.21 - 2.70 S/CO）内的精密度 ≤10% 。由1个阴性样本、4个稀释的阳性样本、质控、校准品组成测试组。2个外部测试点使用2个不同批号的质控和校准品于2个批号的试剂上，1个内部测定点使用3个不同批号的质控、校准品于3个批号的试剂上。所有测试组的成员在每批测试中重复测定3次。见表（一）

表（一）Architect Anti-HBe精密度

检测 重复测 平均值 批内运行 批间运行

样本 定总数 (S/CO) 标准差 %变异系数 标准差 %变异系数

校准品1 516 2.00 0.096 4.79 0.097 4.83

阴性质控 516 1.97 0.086 4.38 0.095 4.80

阳性质控 516 0.51 0.027 5.29 0.029 5.68

1 204 0.11 0.006 5.64 0.007 6.55

2 204 0.23 0.008 3.72 0.010 4.48

3 204 0.47 0.018 3.76 0.022 4.66

4 204 0.93 0.044 4.75 0.047 5.04

5 204 1.70 0.080 4.69 0.084 4.93

8.2 特异性和灵敏度

特异性

ARCHITECT anti-HBe 对随机献血员的样本的特异性≥ 99.5% 。共1310份随机献血者的样本（血清和血浆）在2个临床检测点测定。6份样本ARCHITECT anti-HBe 阳性，同时anti-HBc也为阳性，剩下的1304份样本ARCHITECT anti-HBe 阴性。见表（二）。

ARCHITECT anti-HBe 对医院病人样本的特异性> 99.0% 。共498份医院病人样本在1个临床检测点测定。63份为ARCHITECT anti-HBe 阳性，同时anti-HBc也为阳性，剩下的435份样本ARCHITECT anti-HBe 阴性。见表（二）。

表（二）Architect anti-HBe在随机献血者和医院病人中的特异性结果

分类 数量 初次测定阳性 重测定阳性 追加试验阳性

随机献血者 1310 6 6 6

医院病人 498 64 63 63

总计 1808 70 69 69

155份来自可能含有潜在干扰物，处于其他疾病状态者的样本，用ARCHITECT Anti-HBe进行测定。7份样本为阳性，同时anti-HBc也为阳性。共75份来自输血后感染高危人群的样本，用ARCHITECT Anti-HBe 测定，15份样本为Anti-HBe阳性，同时anti-HBc也为阳性。数据见表（三）。

表（三）Architect Anti-HBe在含潜在干扰物和高危人群中的特异性结果

分类 数量 初次测定阳性 重测定阳性 追加试验阳性

含潜在干扰物的样本 155 7 7 7

输血后感染高危人群 75 15 15 15

灵敏度

ARCHITECT Anti-HBe 灵敏度≥ 99.5%. 在一份研究中对已知Anti-HBe 和anti-HBc阳性的206份样本进行了测定，ARCHITECT Anti-HBe 都为阳性。见表（四）。

表（四）Architect Anti-HBe使用已知Anti-HBe阳性样本的灵敏度

分类 数量 测定阳性

在已知Anti-HBe阳性样本 206 206

ARCHITECT Anti-HBe 在cut-off值处的灵敏度 ≤ 0.45 PEI U/mL。

在一份研究中，对共93份来自于临床或血清学分类处于不同HBV感染阶段人群的样本进行了分析。36份急性HBV感染者样本中有17份为阳性，19份为阴性。57份慢性HBV感染者样本中有36份为阳性，21份为阴性。

8.3 与一种商业性Anti-HBe测定的对比

共2605份样本（随机献血者、医院病人、含潜在干扰物的样本、输血后感染高危人

群、急性HBV感染、慢性HBV感染、其他HBV标志物阳性、血清转换组）分别用ARCHITECT Anti-HBe 和 AxSYM Anti-HBe 2.0进行检测，2中方法的符合率为 99.19% (2584/2605).

9．异常情况处理

异常报告

当出现异常报告时，请根据操作手册查询错误原因及解决方案。如无法解决问题，可联络雅培公司工程技术人员。

10．方法局限性

1．如检测结果与临床症状不符，建议复查以确认结果。

2．上机检测前，请先离心分离红细胞和颗粒物质。

3. 本检测所示性能未用尸体或其他动物的血清和血浆样本建立和证实。

4. 曾接受过鼠单克隆抗体制剂治疗和诊断者，血清、血浆中可能含有人抗鼠单克隆抗体。这样的样本可对使用鼠单克隆抗体的检测项目引起假性升高或降低。需更多的其他诊断检查或临床症状对病人状况进行正确评价。

5. 本检测所示性能未用尸体或其他动物的血清和血浆样本建立和证实。

6. 不可使用大量溶血的样本。

7. 来自肝素化病人的样本可能会有部分凝结，由于纤维的存在可能会导致出现错误 结果。为了防止这种现象，请于肝素治疗前抽取样本。

8. 人血清/血浆样本中的异嗜性抗体可与试剂中的免疫球蛋白反应，干扰检测。对于常暴露于动物或动物血液制品中的病人，可能会现异常结果，此时需要额外的信息来帮助诊断。