陇中损伤散治疗激素性股骨头缺血性坏死模型兔的影像学研究

维普资讯 http://www.cqvip.com 荫伸　‘盖２００８年第２Ｉ卷第６期Ｃａｎｓｕ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆＴＣＭ，２００８　Ｖｏ１．２Ｉ　Ｎｏ．６　／…、　・…………一一…。’。＼　．—　口３・实验研究・；　，　ｑ．…昭０围倔团　舄键暇国　融　键　蠲四自国廖回学　木　李盛华，宋渊，周明旺　甘肃省中医院骨科，甘肃兰州７３００５０　摘要目的：建立激素性股骨头缺血坏死（ＳＡＮＦＨ）兔动物模型，应用陇中损伤散进行治疗研究。方法：将７５只　青紫兰兔随机分为６组，即正常对照组（Ｎ组）、阳性对照组（Ｙ组）、阴性对照组（Ｍ组）、损伤散高剂量组（ｓＨ组）、损伤　散中剂量组（ｓＭ组）、损伤散低剂量组（ｓＬ组）。Ｙ、Ｍ、ｓＨ、ｓＭ、ｓＬ组采用内毒素加激素联合造模，从第５周开始，追模各　组动物分别给予健骨生丸、生理盐水、损伤散（高、中、低剂量）连续灌胃８周，各组分别于第５、７、９、ｌ３周行组织学检　查。结果：观察第５周见造模组骨髓内出现坏死灶，第ｌ　３周ｓＨ组、ｓＭ组、Ｙ组接近正常，余各组与第５周相比无明显　变化；正常对照组前后观察无明显变化。结论：①采用内毒素加激素能够诱导出比较接近临床典型的ＳＡＮＦＨ动物模　型；②陇中损伤散能够有效促进ＳＡＮＦＨ模兔股骨头坏死部位的骨组织修复，对ＳＡＮＦＨ有良好的治疗作用。　关键词激素性股骨头缺血坏死；损伤散；核磁共振；ｘ线　中图分类号：Ｒ６８１　文献标识码：Ａ　文章编号：１００４－６８５２（２００８）０６－００５６－０３　糖皮质激素（以下简称激素）长期或短期内大剂量使　用，能引起激素性股骨头缺血性坏死（Ｓｔｅｒｏｉｄ—ｉｎｄｕｃｅｄ　Ａｒａｓｃｕｌａｒ　ＮｅｃｒｏｓｉＳＯ　ｔｈｅ　Ｆｅｍｏｒａｌ　Ｈｅａｄ，ＳＡＮＦＨ）已为大　１．２．２动物造模造模方法［１　如下：兔耳缘静脉注射大　肠杆菌内毒素（ＬＰＳ）５０￣ｇ／ｋｇ，２次，每次间隔２４小时，并　在最后１次注射ＬＰＳ后，臀肌注射甲基强的松龙（Ｍｅ）　２０　ｍｇ／ｋｇ，３次，每次间隔２４小时，第４周后模型成功。　量的临床和实验所证实，并逐渐被人们重视，笔者以陇中损　５５　伤散治疗ＳＡＮＦＨ取得了比较满意的临床疗效，本研究是进　步探讨陇中损伤散对ＳＡＮＦＨ的防治机理，为该药在临床　上进一步应用和防治本病提供实验依据。　一１．２．３给药及饲养模型成立后（第５周）开始灌胃，灌胃　剂量按照人与动物之问体表面积折算的等效剂量比例换　算［２］，损伤散由自然铜、三七粉、土鳖虫、煅乳香、没药等组成，　配制成每毫升所含生药相当于０．３　ｇ原药材的浓缩液，于第　１材料与方法　１．１材料　１．１．１实验动物健康成年的２４周龄以上的青紫兰家兔　７５只，雌雄不拘，体质量（２．０＋０．２０）ｋｇ，由甘肃省生物制品　研究所实验动物中心提供，动物合格证号：２００５—０３８。　１．１．２主要实验仪器及试剂　５周后给ＳＨ组、ＳＭ组、ＳＬ组分别按９．３　ｍＬ／ｋｇ、４．６　ｍＬ／ｋｇ、　２．３　ｍＬ／ｋｇ连续灌胃８周。将健骨生丸配制成每毫升所含生　药相当于０．３　ｇ原药材的药液按（４．８　ｍＬ／ｋｇ）对Ｙ组连续灌　胃８周。Ｍ组予等量（４．６ｍＬ／ｋｇ）生理盐水连续灌胃８周。Ｎ　组予等量（４．６　ｍＬ／ｋｇ）生理盐水连续灌胃８周。单笼标准兔颗　１．１．２．１实验仪器ＥＬＳＣＩＮＴ公司）。　①ＬＱ．６８．４．０２型ｘ光机（上海精密　粒饲料喂养（兰卅Ｉ军区兰州总医院动物实验中心提供），自由　饮水。饲养室保持良好通风，控制室温在（２２±１）℃，　光照与黑暗时间为每ｌ２小时交替。　２检查方法　医疗器械厂）；￣ＧＹＲＥＸ　２．ＯＴ　ＳＧＲ磁共振成像系统（以色列　１．１．２．２　实验试剂①大肠杆菌内毒素　ＰＳ）（规格：　２５　ｍｇ／瓶，美国Ｓｉｇｍａ公司，进口药品注册证号：Ｈ２００４０１３９，　２．１　Ｘ线检查分别于第５周、７周、９周、ｌ３周以相同方　批号：ＬＬ０４１１）。②甲基强的松龙（ⅣⅡ））（规格：５００　ｍｇ／瓶，比　利时法玛西亚普强ＰＨＡＲＭＡＣＩＡ公司，进口药品注册证号：　Ｈ２００４０３３９，批号：ＬＬ０４５０）。⑨损伤散［甘肃省中医院纯中药　制剂，批准文号：２００４０３０８，甘卫（９７）４６４—０４３。④健骨生丸　［北京匡达制药厂，４５　ｇ／袋，批准文号：（０４）卫药准字ｚ一　１３６号，批号：００４００５３。⑤实验试剂：磷酸二氢钠、磷酸氢二　钠、多聚甲醛、戊巴比妥钠、乙二胺四乙酸二钠（兰州军区兰　州总医院骨研所提供，均购自天津华生试剂有限公司）。　１．２方法　法拍摄Ｘ线片，主要观察不同时相点兔股骨头Ｘ线平片的　变化。　２．２　ＭＲＩ检查分别于第５周、７周、９周、ｌ３周以相同方　法进行常规ＭＲＩ扫描，观察不同时相点兔股骨头ＭＲＩ图像的　信号改变，采用（以色列ＥＬＳＣＩＮＴ公司：ＧＹＲＥＸ　２．０　ＴＳＧＲ机）　膝关节线圈，冠状位扫描。平扫采用自回旋波（ｓＥ），选择清楚　显示双侧股骨头的层面，层厚３　ｍｍ，ＴＲ／ＴＥ＝５００／１２　ｍｓ；快速　自回旋波（ＦＳＥ）冠状位扫描，层厚３咖，ＴＲ／ＴＥ＝４　０００／９６　ｍｓ；快　速自回旋波（ＦＳＥ）矢状位扫描，层厚３咖，ＴＲ／ＴＥ＝４０００／９６ｍｓ　间隔为１咖。　３结果　１．２．１动物分组将７５只青紫兰兔适应性喂养１周后，　按随机数字法分为６组，即Ｎ组：正常对照组（１０只）：Ｙ组：　阳性对照组；Ｍ组：阴性对照组；ｓＨ组：损伤散高剂量组；ｓＭ　组：损伤散中剂量组；ｓＬ组：损伤散低剂量组，每组ｌ３只。　３．１　Ｘ线分析第１周观察：ｘ线平片示各组股骨头形态　正常，关节面完整，未发现软骨下骨折及股骨头塌陷（图１）；　维普资讯 http://www.cqvip.com

维普资讯 http://www.cqvip.com 荫仲　‘盖２００８年第２１卷第６期Ｇａｎｓｕ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆＴＣＭ，２００８　Ｖｏ１．２１　Ｎｏ．６　图１１　图１２　图１３　图１４　图１５　一　图１６　４讨论　实验结果表明陇中损伤散中剂量使用与健骨生丸具有相当　４．１　ｘ线检查本病早期临床ｘ线检查一般无明显异常　的疗效，而高剂量陇中损伤散能够有效促进Ｓ．＾ＮＦＨ模兔股　表现。谢海柱等［３］的实验报道中指出单纯静脉注射地塞米　骨头坏死部位的成骨，与理论研究［８＿ｌ　］活血化瘀类药物能　松１０ｍｇ／（ｋｇ・ｄ）连续７天造模后１６周、马血清加激素　促进骨质矿化、有利于骨胶原合成和钙、磷沉积的增加相吻　造模后２６周才出现ｘ线改变，表现为骨质疏松、骨小梁模　合，对ＳＡＮ￣Ｈ的治疗效果较明显。　糊。但在本实验中，笔者发现采用内毒素加激素造模法，在　参考文献　注射甲强龙２周后（灌胃前观察）造模动物中大多出现轻度　【１】姚正凯，李盛华．股骨头缺血性坏死动物模型创建及中药治　骨质疏松、股骨头负重部囊性改变（见图２），与正常组动物　疗的实验研究进展［Ｊ］．甘肃中医，２００３，１６（８）：４６－４８．　Ｘ线比较变化较明显，笔者得出如下结论：应用内毒素加激　［２］郝光荣．实验动物学［Ｍ］．２版．上海：第二军医大学出版社，　２００４：２７６．　素造模法模型成功较快，可能以急性坏死反应为主［引，马血　［３］谢海柱，王滨，孙西河，等．激素性股骨头缺血坏死Ｍｉｌｌ诊断　清加激素造模法所需时间较长，以慢性坏死为　。２种造　的实验研究［Ｊ］．医学影像学杂志，２００４，１４（４）：３１３－３１６．　模方法之间的差异尚需进行长期病理变化过程的对比观察　［４　１　陈彦华，殷惠芬，王式鲁．马血清加激素诱导股骨头缺血性坏　才能确定。这也为下一步的实验提供了一个观察点。　死动物模型的实验研究【Ｊ】．山东中医药大学学报，２００３，２７　４．２核磁共振（ＭＲＩ）检查目前ＭＲＩ是诊断ＡＮＦＨ最准确　（３）：２２２－２２　３．　的方　，ＭＲＩ对不同组织，尤其对骨髓的分辨率极高，缺　［５］杨万石，王坤正，王奎生，等．激素治疗变态反应疾病诱发骨　坏死的实验研究［Ｊ］．中国矫形外科杂志，１９９９，６（１２）：９１　７．　血坏死导致骨髓脂肪坏死达到一定程度即可引起信号强度　［６］李子荣，张念非，岳德坡，等．激素性股骨头缺血坏死动物模　的改变，ＭＲＩ可以在骨质塌陷及修复反应前反映出骨髓细　型的诱导和观察【Ｊ】．中华外科学杂志，１９９５，３３（４）：４８　５．　胞的变化，在完全或部分阻断实验动物股骨头血供的研究　［７］Ａｉｇｎｅｒ　Ｎ，Ｓｃｈｎｅｉｄｅｒ　Ｗ，Ｅｂｅｒ１　Ｖ，ｅｔ　ａ１．Ｃｏｒｅｄｅ　ｃｏｍｐｒｅｓ－　中，股骨头缺血１周即可发现坏死的确切征象，可见ＭＲＩ对　ｓｉｏｎ　ｉｎ　ｅａｒ１Ｙ　Ｓｔａｇｅｓ　ｏｆ　ｆｅｍｏｒａ１　ｈｅａｄ　ＯＳｔｅｏｌｌｅｃｒｏｓｉ　ｓ　ＡＮＦＨ是非常敏感的。笔者在实验过程中对兔股骨头各个阶　ａｎ　ＭＲＩ　ｃｏｌｌｔｒｏ１ｌｅｄ　Ｓｔｕｄｙ［Ｊ］．Ｉｌｌｔ　Ｏｒｔｈｏｐ，２００２，２６：３１．　段ＭＲＩ信号强度进行对比观察，将结果大体分为２个阶段，　【８］史风雷，任丽霞，孙升云，等．复方丹参注射液预防激素性股　第１阶段（第５周至第９周）Ｔ　ｗＩ股骨头信号强度降低、　骨头坏死的初步研究［Ｊ］．中医正骨，２００２，１４（４）：３－５．　【９１刘宏泽，王文瑞，卫小春，等．丹参与骨碎补注射液防治激素　Ｔ２ｗＩ股骨头不均匀较高信号强度，反映了骨髓出血和水肿　诱发股骨头坏死的实验研究［Ｊ］．中国骨伤，２００３，１６（１２）：　的病理变化过程，第２阶段（第９周后）Ｔ。ｗＩ股骨头信号强　７２６－７２８．　度增强、Ｔ２ｗＩ股骨头均匀较高信号强度，反映出骨髓细胞增　【１　０］齐振熙，曹阳．活血化瘀中药防治激素性股骨头缺血性坏死　加、成骨增加的病理变化过程。说明ＭＲＩ对ＳＡＮＦＨ模兔股骨　的实验研究［Ｊ］．现代康复，２００１，５（１２）：１１８－１１９．　头早期病变反应敏感，具有较高诊断价值。本实验中未能观　［１１］段军，常增林，李锋，等．伤科接骨片对防治鸡激素性股骨头　察到大块新生骨组织在坏死的骨小梁上的沉积等典型的修　缺血性坏死的实验研究［Ｊ１’中国矫形外科杂志，２００４，１２（５）：　３６５—３６７．　（收稿日期２００８－０３－１６）　复反应，这可能与我们的实验过程相对较短有关，也从另外　一个方面说明激素性股骨头坏死病程较长、坏死较为广泛，　・甘肃省教育厅科研项目（编号Ｏ６０６—０８）　其自然修复能力较差。　作者简介：李盛华（１　９５９一），男，主任医师，教授，硕士研究生　４．３陇中损伤散防治ＳＡＮＦＨ的疗效评价本实验通过对　导师，甘肃省“５５５”创新人才，甘肃省“３３３”科技人才，甘肃省卫生　实验动物不同时相点Ｘ线片、ＭＲＩ检查对比观察来看，陇中　厅跨世纪学术技术带头人，中华中医药学会骨伤分会副会长，甘肃　损伤散能够有效的促进坏死部位骨组织的沉积，说明陇中　省中医药学会副会长，中国中西医结合学会骨伤科专业委员会甘　肃分会主任委员。研究方向：骨与关节疾病的中西医结合治疗。　损伤散能够较好地治疗激素诱导的股骨头坏死动物模型，