天狼猩红染色
The manuscript was revised on the evening of 2021
已知胶原有四型（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ）区分并定量这四种胶原纤维，对于研究病变的发生机理和演变过程有一定的意义。利用胶原蛋白聚合及其缠绕螺旋排列不同的特点，使用天狼星红苦味酸染色法，在偏振光显微镜下，可以根据双折光性和着色的不同，分别显示出四型胶原纤维。 [组织固定与切片]
4%甲醛液固定组织，石蜡切片。 [试剂配制]
（1） 天狼星红-饱和苦味酸液：%天狼星红10ml，苦味酸饱和水溶液90ml。
（2） 天青石蓝液：天青石蓝，铁明矾，蒸馏水250ml。溶解煮沸，冷却后过滤，加入甘油30ml，然后再加入浓硫酸（注意硫酸一定要后加入）。 [操作步骤]
（1） 石蜡切片厚4~6μm，脱蜡至水。 （2） 入天青石蓝液5~10min。 （3） 蒸馏水冲洗3次。
（4） 天狼星红饱和苦味酸液15~30min；（可用Harris苏木素液淡染细胞核）。 （5） 直接用无水乙醇分化与脱水。 （6） 二甲苯透明、光学树胶封固。 [染色结果]
普通光镜观察：胶原纤维呈红色，细胞核呈绿色，其他成分呈黄色。 偏振光显微镜下观察：
Ⅰ型胶原纤维：红色或黄色，排列紧密，具强双折光性。 Ⅱ型胶原纤维：多种色彩，疏松网状、弱双折光性。 Ⅲ型胶原纤维：绿色、细纤维、弱双折光性。 Ⅳ型胶原纤维：淡黄色、弱双折光性（基膜成分）。 [注意事项]
为保持色彩鲜艳，应在染色后及时观察并照相。
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