尿液检测中三种方法的比较分析

８４　福建医药杂志２００８年１Ｏ月第３Ｏ卷第５期　Ｆｕｊｉａｎ　Ｍｅｄ　Ｊ，Ｏｃｔｏｂｅｒ　２００８，Ｖｏｌ　３Ｏ，Ｎｏ．５　尿液检测中三种方法的比较分析　福建医科大学教学基地南平市第一医院检验科（３５３０００）　孔祥圣　叶健频　胡望平　池细弟　林晗忆　【摘　要】　目的　对三种方法检测尿液结果进行比较，探讨尿ＵＦ一５０分析仪的优点与不足。方法　经尿ＵＦ－　５Ｏ分析仪检测异常的７０４份标本用尿干化学仪及尿沉渣镜检进行复检，并对结果进行比较分析。尿ＵＦ－５０分析仪　检测异常的尿标本中，以尿沉渣镜检法为标准。结果　尿ＵＦ－５０分析仪检测：红细胞假阳性率５２．９８　、假阴性率　０．２７　，白细胞假阳性率４３．７４　、假阴性率０．４３　，管型假阳性率５７．８１　、假阴性率０　Ａｏ；尿干化学法检测：　红细胞假阳性率３９．２９　、假阴性率１９．５７Ｏ，白细胞假阳性率３Ｏ．５７　、假阴性率ｌ８．８８　，管型假阳性率　２５．９９　、假阴性率５．２６　。尿ＵＦ－５０分析仪检测敏感性高于尿干化学仪，特异性低于尿干化学仪。尿沉渣镜检法　与尿ＵＦ－５Ｏ分析仪及尿干化学仪检测三指标进行比较，差异均有统计学意义（Ｐ＜Ｏ．０１）。结论尿ＵＦ一５Ｏ分析仪、　尿干化学仪可提高检验效率，但结晶、细菌、类酵母细胞、精子、上皮细胞、黏液丝等干扰因素可影响检测结果，　两法不能替代尿沉渣镜检。对尿ＵＦ－５０分析仪检测阳性、尿干化学仪检测阴性的标本应做尿沉渣镜检。　【关键词】尿液检测；尿ＵＦ＿５Ｏ分析仪；尿干化学法；尿沉渣镜检　【中图分类号】Ｒ４４６．１２　【文献标识码】Ｂ　【文章编号】１００２—２６００（２００８）０５—００８４—０３　尿ＵＦ－５０分析仪作为一种新颖全自动的尿有形成份分　１．５统计学分析：采用四格表资料的　检验。　析仪，集电阻、电导体、流式细胞技术、激光和荧光染色等　２结果　先进技术为一体，提高了实验室工作效率。为进一步了解该　２．１尿ＵＦ－５０分析仪和尿干化学仪假阳性、假阴性：尿　仪器的性能及检验结果的可靠性，我们对一组标本，采用尿　ＵＦ－５０分析仪检测异常的标本７０４份，以尿沉渣检法为标　ＵＦ－５０分析仪、尿干化学仪及尿沉渣镜检三种方法检验，并　准，红细胞阳性３６８份，白细胞阳性２３３份，管型阳性１９　对结果进行比较分析。　份。尿ＵＦ－５０分析仪检测红细胞的假阳性１７８份（占　１材料与方法　５２．９８　），假阴性１份（占０．２７　）；白细胞假阳性２０６份　１．１标本来源：随机收集我院２００７年ｌ１月至２００８年３月　（占４３．７４　），假阴性１份（占０．４３　）；管型假阳性３９６　经尿ＵＦ一５０分析仪检测的患者中段晨尿中异常的标本　份（占５７．８１　），未见假阴性。尿干化学仪检测的红细胞　７０４份。　假阳性１３２份（占３９．２９　），假阴性７２份（占１９．５７％）；　１．２仪器与试剂：尿ＵＦ－５０分析仪购自日本Ｓｙｓｍｅｘ公司，　白细胞假阳性１４４份（占３０．５７　），假阴性４４份（占　染色液与稀释液及质控物由希森美康生物科技（无锡）有限　１８．８８　）；管型假阳性１７８份（占２５．９９　），假阴性１份　公司提供，鞘液由希森美康医用电子（济南）有限公司提　（占５．２６％）。尿ＵＦ一５Ｏ分析仪检测的敏感性高于尿干化学　供，每天用Ｓｙｓｍｅｘ质控品监控。尿干化学仪为Ｂａｙｅｒ　仪，特异性低于尿干化学仪。　ｃｕＮＩＴＥＫ　５００型，每天用多项目尿液化学分析质控液监　２．２不同方法检测三指标结果的比较：尿沉渣镜检与尿　控，质控液由上海伊华医学科技有限公司提供。尿十项试纸　ＵＦ－５０分析仪检测结果比较，Ｙ２值分别为９７．６１、１１９．６５、　条为Ｂａｙｅｒ　Ｍｕｌｔｉｓｔｉｘ　１０　ＳＧ；日本欧林巴斯显微镜。　５２２．３３，Ｐ值均ｄ０．０１；尿沉渣镜检与尿干化学仪检测结果　１．３方法：用一次性尿管收集患者洁净中段晨尿，１小时　比较，．）ｃ　值分别为１Ｏ．４Ｏ、２９．５４、１７１．９８，Ｐ值均ｄ０．０１；　内送检。于尿ＵＦ－５０分析仪及尿干化学仪上检测，对尿　尿ＵＦ－５０分析仪与尿干化学仪检测结果比较，Ｙ　值分别为　ＵＦ－５０分析仪检测异常的标本进行非染色尿沉渣镜检，２小　４５．５４、３１．６１、１３８．６７，Ｐ值均＜０．０１。　时内完成。镜检操作如下：于刻度离心管加入混合后新鲜尿　２．３尿ＵＦ－５０分析仪及尿干化学仪检测假阳性影响因素：　液１Ｏ　ｍｌ、１５００　ｒ／ｍｉｎ离心５　ｍｉｎ，弃上层清液，留０．２　ｍｌ　尿ＵＦ－５０分析仪检测红细胞假阳性１７８份标本，白细胞假　沉渣，轻摇使尿沉渣有形成分混匀后取０．０２　ｍｌ于载玻片上　阳性２０６份标本，管型假阳性３９６份标本；尿干化学仪检测　镜检　。　红细胞假阳性１３２份标本，白细胞假阳性１４４份标本，管型　１．４结果判断：尿ＵＦ一５０分析仪及尿沉渣镜检结果均以红　假阳性１７８份标本（表１）。　细胞＞３／ＨＰ为阳性Ｌ２］，白细胞＞５／ＨＰ为阳性，管型＞１／　３讨论　ＬＰ为阳性ｎ　；尿干化学仪检测结果以“微量及以上”为阳　目前，没有一种尿检方法是完美无缺的。尿ＵＦ＿５Ｏ分　性。凡仪器测定和尿沉渣镜检结果均阳性的为真阳性；仪器　析仪检验结果会出现假阳性、假阴性，但其分析过程的全自　测定为阳性、尿沉渣镜检结果为阴性的为假阳性；仪器测定　动性可减少检验时间和检验人员的劳动强度Ｉ３］。尿ＵＦ一５０　和尿沉渣镜检结果均为阴性的为真阴性；仪器测定为阴性而　分析仪测定结果假阳性较多，故本试验只对检测异常的标本　尿沉渣镜检结果为阳性的为假阴性。　进行镜检，结合尿干化学法进行比较分析。　１通讯作者　福建医药杂志２００８年１Ｏ月第３Ｏ卷第５期Ｆｕｊｉａｎ　Ｍｅｄ　Ｊ，Ｏｃｔｏｂｅｒ　２００８，Ｖｏｌ　３０，Ｎｏ．５　８５　表１　尿ＵＦ一５０分析仪、尿干化学仪检测结果假阳性影响因　３．３管型检测：尿ＵＦ－５０分析仪检测假阳性标本以黏液丝　素（％）　误认为管型的比例最高，其次为假管形、非晶型结晶、细菌　方法　红细胞检测干扰　白细胞检测干扰　管型检测干扰　和鳞状上皮细胞。可能是由于黏液丝的电阻信号虽低于管　型，但电阻信号是反映细胞数量的，而透明管型内不存在细　尿ｕＦ－５０分析仪　（　）　细菌　细菌　（３５．４０）　（１．９７）　胞，无荧光强度，故当黏液丝大量存在时，其电阻强度可能　类酵母细胞　小圆上皮细胞　鳞状上皮细胞　（２．２４）　（２０．４０）　（１．３２）　会跟透明管型一致或接近而误检＿８］。由于尿中管型是蛋白质　结晶　非晶型结晶　粘液丝　在一定条件下在肾小管集合管中聚集而成的圆柱形蛋白样聚　（４２．７０）　（２０．９０）　（４８．ｏｏ）　体，而假管形、非晶型结晶、细菌、鳞状上皮细胞和黏液丝　精子　药物结晶　假管型　（０．５６）　（１．４５）　（９．８７）　在形态大小和染色上和管型有很多相似的地方。根据仪器工　其他　其他　其他　作原理，无法将形态大小以及染色上和管型十分相似的有形　（２ｌ＿７３）　（１７．４０）　（２１．８５）一　成分加以区别，因而导致假阳性的出现＿９］。而尿干化学仪检　非晶型结晶　（Ｉ７．１１）　测的是尿中的蛋白质，因此只有结合显微镜检查才能确定有　尿干化学仪　细菌　细菌　白带、粘液丝　无管型。　（２４．２Ｏ）　（２１．３３．）　（２１．９１）　３．４假阳性结果的发现和处理：（１）本试验中假阳性、假　胆红素尿　胆红素尿　碱性尿　（６．０６）　（９．５２）　（３８．２０）　阴性均为相对假阳性和相对假阴性，因为本试验所选标本为　结晶　结晶　球蛋白尿及其他　尿ＵＦ－５０分析仪检测异常尿标本。（２）当细菌、酵母样菌、　（２５．ＯＯ）　（１４．２９１）　（３９．８９）　结晶、精子报告阴性，尿ＵＦ－５０分析仪检测红细胞结果与　不明原因　鳞状上皮细胞　（４４．７４）　（２８．４７）　尿干化学法潜血测定结果相符时，可不必镜检；当细菌、酵　其他　母样菌、结晶报告阳性，尿Ｕ　５Ｏ分析仪报告红细胞增多，　（２６．３９）　而尿干化学法潜血试验阴性时，红细胞假阳性较大，此时必　须镜检　。　（３）当细菌、上皮细胞、结晶报告阴性，尿　３．１红细胞检测：结晶、细菌、类酵母细胞等可干扰尿　ＵＦ一５Ｏ分析仪检测白细胞结果与尿干化学法白细胞测定结果　ＵＦ－５０分析仪对红细胞的识别。因为尿ＵＦ．５０分析仪是根　相符时，可不必镜检；当尿ＵＦ－５０分析仪检测白细胞增高，　据细胞的前向散射光强度和荧光强度来分析的，而结晶、细　而尿干化学法自细胞测定呈阴性时，提示两种可能，一种是　菌和类酵母样细胞的大小与红细胞相近，特别是平均荧光强　尿ＵＦ－５０分析仪检测的白细胞为淋巴细胞，另一种是假阳　度值较高时，红细胞假阳性的可能性大，如果同时红细胞荧　性，必须结合镜检加以确认。（４）尿ＵＦ－５０分析仪不能对　光脉冲分布宽度也较大时，可基本确信红细胞假阳性＿４］。尿　管型进行分类和定量，应结合尿干化学法蛋白定性结果进行　干化学法检测的１３２份红细胞假阳性以不明原因化学干扰为　分析。尿蛋白质和Ｔ＿Ｈ蛋白是形成管型的基础物质，因此　主。尿试纸条比沉渣镜检优点是可查尿Ｈｂ。尿Ｈｂ主要来　一般尿干化学法蛋白阴性时，管型通常阴性，可不必镜检；　源是血浆Ｈｂ，由于药物、血液病、寄生虫等原因引起血浆　而蛋白阳性时，必须镜检。　Ｈｂ升高，经过肾滤过可成为尿Ｈｂ。有研究表明，镜检阴　综上所述，尿ＵＦ－５０分析仪作为一种快速尿液有形成　性，而尿潜血阳性１１例中，仅２例（１８　）血浆Ｈｂ升　分的检测仪器，为临床尿液标本快速筛选和标准化提供了可　高，因此尿试纸条假阳性中，出现尿Ｈｂ可能性少（仅　能，提高了检验工作效率，减少了检验人员的工作强度；但　１８　）［２３。但国内有文献认为尿干化学法假阳性原因以红　在发挥其优势的同时，必须注意尿液中有形成分检测结果会　细胞溶解比例最高（６４．７　）［５］。亦有文献认为，尿干化学　受许多因素干扰，尿中结晶、细菌、类酵母细胞、精子、上　法的假阳性率为１６．６　，共有１２８份，主要干扰因素为　皮细胞、黏液丝等均可干扰红细胞、白细胞、管型的检测。　细菌　。　因此在实际工作中，将尿ＵＦ－５０分析仪及尿干化学仪作为　３．２　白细胞检测：尿ＵＦ－５０分析仪测定白细胞的原理与红　过筛试验并结合尿沉渣镜检法，才能快速、准确的为临床提　细胞相似，也是结合流式细胞仪及电阻抗的原理，通过对白　供有效、可信的诊断依据。　细胞进行荧光色素染色，测定其荧光强度及前向散射光强度　等来进行分类与计数。白细胞假阳性２０６份尿标本中以细菌　参　考　文　献　误认为白细胞的比例最高，其次为非晶型结晶和小圆上皮细　１　叶应妩，王毓三，主编．全国临床检验操作规程ＥＭＩ．第２版．　胞。细菌虽然有核，但菲啶染料对膜渗透性低，染色后荧光　南京：东南大学出版社，１９９７．１３３—１３４．　强度和前向散射光强度也低，所以尿液中当细菌浓度超过一　２胡望平，胡盈莹，黄兢姚，等．尿红细胞镜检血浆血红蛋白与尿　定时，仪器易将细菌误认为尿白细胞；而尿中非晶型结晶、　液试条潜血的探讨［Ｊ］．第三军医大学学报，２００５，２７（１８）：　小圆上皮细胞等染色后与尿中白细胞有相似的荧光或前向散　１８９９—１９００．　射光的特点，导致仪器无法鉴别，因而出现假阳性结果。尿　３　Ｌｕｎ　Ａ，Ｚｉｅｂｉｇ　Ｒ，Ｐｒｉｅｍ　Ｆ，ｅｔ　ａ１．Ｒｏｕｔｉｎｅ　Ｗｏｒｋｆｌｏｗ　ｆｏｒ　Ｕｓｅ　ｏｆ　干化学仪测定的假阳性标本大部分由鳞状上皮细胞增多引　Ｕｒｉｎｅ　Ｓｔｒｉｐｓ　ａｎｄ　Ｕｒｉｎｅ　Ｆｌｏｗ　Ｃｙｔｏｍｅｔｅｒ　ＵＦ－ＩＯ０　ｉｎ　ｔｈｅ　Ｈｏｓｐｉｔａｌ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ　Ｊ－Ｊ］．Ｃｌｉｎ　Ｃｈｅｍ，１９９９，４５（８）：１３０６一】３０７．　起。有文献报道，在女性覆层扁平上皮棘层中含有硫酸脂酶　４张文静．ＵＦ－５０尿分析仪影响因素探讨ＥＪ］．实用医技杂志，　和磷酸脂酶与中性粒细胞含有相似的酶，可以与试纸条模块　２００６，ｌ３（２）：２１２—２１３．　中的吲哚酚脂作用并与重氮盐反应而显色，造成假阳性　５　王宇，汤立东，关琪．ＵＦ　５０干化学及显微镜镜检联合检测结果　结果　。　分析［Ｊ］．中国误诊学杂志，２００７，１５（７）：３４７５—３４７６．　８６　福建医药杂志２００８年１０月第３Ｏ卷第５期Ｆｕｊｉａｎ　Ｍｅｄ　Ｊ，Ｏｃｔｏｂｅｒ　２００８，Ｖｏｌ　３０，Ｎｏ．５　６郑洪，梁雪冰．ＵＦ－１００尿沉渣分析仪与干化学法检测红细胞的　响因素分析［Ｊ］．现代检验医学杂志，２００７，２２（２）：１２５．　相关性观察ＥＪ］．实用医学杂志，２００７，２３（１）：１１３－１１４．　９马政辉．ＵＦ一１００全自动尿沉渣分析仪各检测项目假阳性结果分　７饶沃，冯泰宝，陈振宇，等．鳞状上皮细胞对尿分析仪检测白细　析［Ｊ］．临床检验杂志，２００４，２２（１）：６７—６８．　胞结果的影响［Ｊ］．现代临床医学生物工程学杂志，２００４，１０（１）　１０石晶，赵敏，张家红，等．ＵＦ一１００尿沉渣分析仪尿液有形成分　：６１－６４．　检测假阳性结果原因分析及其对策［Ｊ］．中国实验诊断学，　８苏宝凤，任健康，李玲，等．ＵＦ－１００尿沉渣分析仪测定管型的影　２００７，（１１）２：２３５—２３８．　免疫固定电泳技术在鉴定多发性骨髓瘤Ｍ蛋白中的应用　福建省立医院检验科（３５０００１）　陈慧丹　陈发林林凤娇　【摘　要】　目的　探讨免疫固定电泳技术在鉴定多发性骨髓瘤单克隆免疫球蛋白（Ｍ蛋白）中的应用。方法　采用琼脂糖凝胶免疫固定电泳技术（ＩＦＥ）检测４Ｏ份血清，其中１９例为多发性骨髓瘤（ＭＭ）患者。结果　在ｌ９　例ＭＭ患者中，有１７例检出Ｍ蛋白，Ｍ蛋白分型为ＩｇＧＫ型８例，ＩｇＧＸ型３例，ＩｇＡＫ型３例，ＩｇＡＸ型１例，单　纯　型２例；未检出Ｍ带２例；２１例其他疾病患者，其中有１２例检出Ｍ蛋白，其分型为ＩｇＧｇ型２例，ＩｇＧＸ型３　例，ＩｇＡＫ型１例，ＩｇＡＸ型１例，ＩｇＭＫ型１例，ＩｇＭＸ型１例，单纯　型２例，双克隆型１例；未检出Ｍ带９例。　结论　ＩＦＥ法灵敏度高、干扰少、沉淀带易识别、快速，试验完成后的胶片可扫描定量及长期保存。　【关键词】免疫固定电泳；多发性骨髓；Ｍ蛋白　【中图分类号１　Ｒ７３３．３　［３ｔ献标识码】Ｂ　【文章编号】１００２—２６００（２００８）０５－００８６—０２　单克隆免疫球蛋白（Ｍ蛋白）是浆细胞异常增生而分　弥散、浅染分布；高免疫球蛋白血症的沉淀带呈浓染、弥散　泌的一种单克隆免疫球蛋白，多见于多发性骨髓瘤（ＭＭ）。　分布，见图１。异常样品则呈现狭窄、浓染、界限分明的沉　以往临床上测定单克隆免疫球蛋白（Ｍ蛋白）一般采用蛋　淀带，即Ｍ带。重链及轻链的Ｍ带应与蛋白电泳的Ｍ带　白电泳法，但需要Ｍ蛋白定量大于２　ｇ才有阳性结果。免　处于同一水平位置，呈“镜影式”呼应，见图２。　疫固定电泳技术可以检测小于２　ｇ的Ｍ蛋白，敏感性高。　Ａｌｐｅｒ于１９６９年首先利用免疫固定电泳技术（ＩＦＥ）进行蛋　白多态性的研究。经过多年的发展现在ＩＦＥ被广泛用于如　罄壤罄　补体Ｃａ、Ｃ　裂解产物　’　、Ｍ蛋白及亚类的检测，其原理　为：待测标本按常规进行电泳，使不同蛋白质进行分离，然　后用单克隆抗血清作用于被区分的蛋白，进行抗原抗体反　熬　应，使抗原在电泳位置上被固定。本文采用琼脂糖凝胶免疫　瓣　固定电泳技术（ＩＦＥ）检测ｌ９例多发性骨髓瘤（ＭＭ）患者　及２１例其他疾病患者的血清，报告如下。　１　１材料和方法　ＥＬＰ　Ｇ　Ａ　Ｍ　Ｋ　１．１标本来源：福建省立医院门诊及住院病人４Ｏ例，其中　１９例多发性骨髓瘤（ＭＭ）患者，年龄４６～８３岁，男１０　图１正常人ＩＦＥ图（ＥＬＰ、Ｇ、Ａ、Ｍ、Ｋ、Ｌ分别表　例，女９例；全部经临床骨髓涂片、骨ｘ线摄片而确诊。　示蛋白电泳、ＩｇＧ、ｌｇＡ、ｌｇＭ及ｋ１）　２１例其他肿瘤、感染性疾病等，年龄３６～８２岁，男１４例，　ｉｉｌｉ嘲　女７例。　｜　孙ｇ　１．２实验方法：免疫固定电泳使用法国Ｓｅｂｉａ公司电泳仪　≈强嚣　及配套试剂盒；免疫球蛋白定量测定使用德灵ＢＮⅡ仪器及　配套的试剂，严格按仪器说明操作。在ＩＦＥ中，抗原抗体的　比例要调解适当，否则如果抗原浓度过高，免疫沉淀带中央　复合物会溶解，出现空心现象，给结果判断带来困扰，在这　种情况下适当的稀释标本以调节标本蛋白质的浓度是必　要的。　２结果　ＥＬＰ　Ｇ　Ａ　Ｍ　Ｋ　正常和异常的ＩＦＥ的图谱：正常样品在７区的沉淀带呈　图２　ｌｇＧｔｔＭＭ患者ＩＦＥ图　１福建卫生职业技术学院检验影像系