应用NCCLS Ep9-A对两种生化分析仪的白蛋白测定结果进行比较

健康天地　２０１０年８月第４卷第８期　临床研究　应用ＮＣＣＬＳ　Ｅｐ９一Ａ对两种生化分析仪的　白蛋白测定结果进行比较　刘影邵华宋德琴　【摘要】　日的：通过对Ｂｅｃｋｍａｎ—Ｃｏｕｌｔｅｒ　Ｌｘ２０和Ｏｌｙｐｕｓ４００生化分析仪进行比对，探讨二者白蛋白结果是否具有一致性。方　法：按照美国临床实验室标准化委员会（ＮＣＣＬＳ）ＥＰ９一Ａ件的要求，以Ｂｅｃｋｍａｎ—Ｃｏｕｌｔｅｒ　Ｌｘ２０生化分析仪为比较仪器，Ｏｌｙｐｕｓ４００生　化分析仪为试验仪器，用４Ｏ例患者血清对白蛋白进行检测，并对两仪器之间的相关性进行评估。结果：Ｂｅｃｋｍａｎ　Ｃｏｕｌｔｅｒ　Ｌｘ２０和　ＯｌｙｐｕＭ００的白蛋白结果具有较好的相关性，相关系数ｒ＝Ｏ．９８０２．结论：白蛋白可以在Ｂｅｃｋｍａｎ　Ｃｏｕｌｔｅｒ　Ｌｘ２０和Ｏｌｙｐｕｓ４００两台仪器　上任意检测。　【关键词】ＮＣＣＬＳ　Ｅｏ９一Ａ文件；比对；白蛋白　随着医院的不断发展及扩大，我院引进了一台Ｏｌｙｐｕｓ４００　生化分析仪，将使用不同的试剂、质控品、和定标液，各自成为　一个独立的检测系统。实验室在使用新的仪器、方法和试剂之　前，需对其测定结果一致性进行评估¨“］。按照ＮＣＣＬＳ　Ｅｐ９一　Ａ文件［１］对本实验室的Ｂｅｃｋｍａｎ—Ｃｏｕｌｔｅｒ　Ｌｘ２０和Ｏｌｙｐｕｓ４００　两种分析系统测定的白蛋白结果进行比对。　１材料与方法　１．１仪器　以实验室使用成熟的Ｂｅｃｋｍａｎ—Ｃｏｕｌｔｅｒ　Ｌｘ２０生化分析仪　为比较仪器，Ｏｌｙｐｕｓ４００为实验仪器，两台仪器均采用散射比浊　法测定白蛋白。　１．２试剂　Ｂｅｃｋｍａｎ—Ｃｏｕｌｔｅｒ　Ｌｘ２０采用Ｂｅｃｋｍａｎ—Ｃｏｕｌｔｅｒ公司提供的　白蛋白的原装试剂。Ｏｌｙｐｕｓ４００使用的是申能公司提供的白蛋　白试剂。　１．３质控品　采用Ｂｅｃｋｍａｎ—Ｃｏｕｌｔｅｒ公司提供的高、中、低三个水平质　控品。　１．４校准品　（ＢＭ公司产品）批号：Ｍ７０４４９１。　１．５样品　收集无溶血、无黄疸的新鲜的临床患者血清，样本至少为　４ｏ个，各浓度梯度分配比例见表１［２　３。　表１方法比较中实验资料浓度分配比例　１．６方法与步骤　每天测定８份样本；将每份样本分装陈两分，分别在Ｂｅｃｋ—　ｍａｎ—Ｃｏｕｌｔｅｒ　Ｌｘ２００和Ｏｌｙｐｕｓ４００两种仪器上双份平行测定，在　２小时内完成，第一次测定次序为１，２，３，４，５，６，７，８，第二次测　定次序为８，７，６，５，４，３，２，１，连续测试５天。两种方法都按此法　实验，当然，也可任选一标本为第１号。这样可消除交叉污染及　在一批内双份测定结果均数的偏移。　２初步数据检查　２．１方法内离群点的检查　作者单位：６４４ＯＯＯ　四川省宜宾市第一人民医院检验科　用以下公式计算对比方法（Ｘ）和实验方法（Ｙ）每样本双份　测定差值的绝对值（ＤＸ。、ＤＹ。）和差值绝对值的均值（ＤＸ、ＤＹ）　以及相对的差值绝对值（ＤＸ　、ＤＹ　）和相对的差值绝对值的均　值（Ｄｘ　、ＤＹ　）。如果同时超出ＤＸ和ＤＹ以及ＤＸ　和ＤＹ　值的４　倍，即绝对偏差界限值和相对的绝对偏差界限值，称为离群点。　２．１．１绝对偏差界限的计算　ＤＸ，　｛ｎ　ｎ—ＤＸｔ　ｊ　ｏｒ，　！Ｄ　ｌ一上）　２　Ｉ　ＤＡ＂一　＝　∑　Ｄｌｒ＝　∑Ｄｒ—，　Ｎ　Ｎ　Ｉ＝样本号（１—４０）　Ｎ＝样本总数　对比方法（Ｘ）绝对偏差界限值是４　ＤＸ，白蛋白的４　ＤＸ为　３．３，将每个ＤＸｉ与此值相比较，无超出此范围的点，见表２。　实验方法（Ｙ）绝对偏差界限值是４　ＤＹ，白蛋白的４　ＤＹ为　２．１，将每个ＤＹｉ与此值相比较，无超出此范围的点，见表２。　２．１．２相对的绝对偏差界限的计算　：　［墨　Ｄ　。；！　’　，　ＤＸ’＝生Ｌ—　∑　：二　ＤＰ＝生Ｌ—　．∑Ｄ　。　Ｈ　对比方法（Ｘ）相对绝对偏差界限值是４　ＤＸ　，白蛋白的４　ＤＸ　为０．０８０，将每个ＤＸ　与此值相比较，有一点（ＤＸｌ　＝０．０８５）　超出此范围，见表２。　实验方法（Ｙ）相对绝对偏差界限值是４　ＤＹ　，白蛋白的４　ＤＹ　为０．０５２，将每个ＤＹ　与此值相比较，无超出此范围的点，见　表２。　如果只有一个离群点，可将此样品的全部数据（ｘ、Ｙ）进行　删除，继续进行下面的分析。如果超过两个以上的离群点，则　需查找原因，如果仅仅是样品的因素，则替换这些离群点数据，　或重新分析所有数据。而我们只有一个离群点，可继续下面的　分析。　２．２作图　２．２．１　Ｙ；对Ｘ；的散点图　以试验方法每样本双份测定的　均值（Ｙｉ）为Ｙ轴，对比方法每样本双份测定的均值（Ｘ；）为ｘ　轴。从起点开始，以相等距离为ｘ，Ｙ轴作刻度，以斜率为１，通　过圆点作图，见图１．　・１１・　桔床研究　２．２．２所有结果的散点图２０１０年８月第４卷第８期　以实验方法每次测定值（Ｙｉｊ）　健座天地　忽略不计。并可用相关系数（ｒ）来粗略估计Ｘ取值范围是否足　为Ｙ轴，对比方法每样本双份测定的均值（ｘ；）为ｘ轴，以上述　同样方法作图，见图２．　２．２．３偏差图　以每个样本两种方法双份测定的均值差　（Ｙｊ—Ｘ；）为Ｙ轴，对比方法每样本双份测定的均值（ｘ；）为Ｘ　轴，以直线Ｘ：Ｏ为水平线作图，见图３。　够宽。Ｅｐ９一Ａ文件要求ｒ≥０．９７５（或者是，　ｔ＞０．９５）则认为ｘ　范围适合。若ｒ２＜０．９５，应再多做标本，扩大数据范围。然后再　从头开始检查数据。若范围无法再增大，则将数据按Ｘ从小到　大排序，将它们分成三组（高、中、低），每组的数据个数大致相　同。也可以按２Ｎ／３数来区分各组，计算出每组的界限值。在　表上作记号以区分成三组。然后分别计算各自的平均偏差。　２．２．４偏差图　以每个样本两种方法双份测定的均值差　（ＹＩｉ—ｘ　）为Ｙ轴，对比方法每样本双份测定的均值（ｘｉ）为ｘ　…Ｎ　＝第Ｋ（Ｋ＝１、２、３…）组中的实验点数。　釜吼－Ｘ．）　，／　轴，以直线Ｘ＝０为水平线作图，见图４。　图１双份测定平均擅散点固　囝２所有结果的散点图　母ｊ偏差固一阿方法双份捌定的　罾４偏差目一西方浩每放测定结果　均值差对对比方法双份测定均值　之楚对对比方洼双份刹宅均擅　矗　２．３线性相关的目测检查　通过观察前两个散点图，可直接目测两台仪器之间的线性　关系。如果是线性的，进入下述分析。如果时非线性的，需先　确定是否存在超过检测项目浓度范围的极端值，剔除后再进行　线性测定，如果是线性的，进入下述分析，如果还是非线性的。　需停止试验，检测仪器状态，增加标本含量重新进行比对。　２．４方法间离群点的检查　从图３、４可以初步看出无明显的离群实验样品，用以下公　式计算两方法间绝对差值（Ｅ．．）、平均绝对差值（Ｅ）相对的绝　对差值（Ｅ　）、相对的平均绝对差值（Ｅ　），如果同时超过Ｅ和Ｅ　值的４倍即绝对偏差界限值和相对的绝对偏差界限值称离　群点。　２．４．１绝对偏差界限计算　＝｛　一　｛吾＝　∑∑　…　方法问绝对偏差界限值为４　Ｅ，白蛋白的４　Ｅ为２．１，将每　个Ｅ　与此值相比较，无超出此范围的点，见表３。　２．４．２相对的绝对偏差界限计算　日　：　二量！　：　Ｅ　Ｘｏ．　，　方法问相对的绝对偏差界限值为４　Ｅ　，自蛋白的４　Ｅ　为０．　０６４，将每个Ｅ　与此值相比较，无超出此范围的点，见表３。任何　一点，如果同时超出相对界限和绝对界限则视为离群点。大于　界限２．５％的数据应从数据系列中取消。　２．５　Ｘ取值范围检查　作为对比方法，理论上要求应该没有误差，只有这样回归　分析的结果才有效，但在临床实验室这是不可能达到的，因为　每个测定都有其固定误差，Ｅｐ９一Ａ文件指出，如果对比方法　（ｘ）取值范围有足够宽，对比方法的这种误差在回归分析中可　・】２・　ｒ　／　，　式申　为弓纪中　自开辅号　即：先计算出分组内各点的偏差值及它们的标准差。Ｂｘ是　对应某浓度范围内估计的平均偏差。　用相关系数ｒ的计算公式　∑∑ｆ　一　（　一万　、　圭　一　）　ｆｒ∑￣－－∑ｆ哦ｙ＿）．　ＺＺｘ０　∑∑　、　～～一寺　一　我们计算得白蛋白的相关系数ｒ＝０．９８０２，大于ＥＰ９一Ａ文　件要求的０．９７５。故可认为本实验项目所有取的Ｘ范围适合，　数据满足要求。　３线性回归　Ｅｐ９一Ａ文件对应成对数据系列（ｘｉｉ—Ｙ　）斜率ｂ、截距ａ　的计算方法如下：　∑∑　一　一ｒ）　ａ＝　一　ｂ＝上　１———一　∑∑　一　）　Ｉ　Ｊ　Ⅳ２　２　∑∑　∑∑　＝　—Ｌ　ｒ＝　—　一　２．Ⅳ　２Ⅳ　直线回归方程为　Ｙ＝ａ＋ｂｘ　结果：ａ＝１．６２１１　ｂ＝０．９６３２　直线回归方程为：Ｙ＝１．６２１１＋０．９６３２Ｘ图形如图１．　４结论　随着检验医学的发展，检验质量管理已提高到规范化，法　制化的高度，各实验室应重视不同仪器之间检测结果是否存在　一致性的问题。用患者血清样本按照Ｅｐ９一Ａ文件（用患者样　本进行方法对比及偏差评估一批准指南，Ｍｅｔｈｏｄ　Ｃｏｍａｒｉｓｏｎ　ａｎｄ　ＢｉａｓＥｓｔｉｍａｔｉｏｎ　Ｕｓｉｎｇ　Ｐａｔｉｅｎｔ　Ｐａｍｐｌｅｓ；Ａｐｐｒｏｖｅｄ　Ｇｕｉｄｅｌｉｎｅ是美国　临床实验室标准化委员会（ＮＣＣＬＳ）在１９９５年出台的标准化系　列文件之一）规定的特定顺序测定，不同浓度相互交错，浓度选　择覆盖检测线性服务进行仪器比对，更接近临床标本的实际情　况，适用于同一标本不同仪器、方法和试的等检测结果对比分　析和偏差评估，评价结果真实可靠。　本文按照文件要求，对实验室拥有的Ｂｅｃｋｍａｎ—Ｃｏｕｌｔｅｒ　Ｌｘ２０和Ｏｌｙｐｕｓ４００生化分析仪白蛋白检测结果进行比对分析，　测定表明两者具有良好的相关性。测定项目总蛋白（ＴＰ）的相　关系数ｒ＝０．９８０２，回归方程为：Ｙ＝１．６２１１＋０．９６３２Ｘ，在良好　（下转第１４页）　临床研究　２０１０年８月第４卷第８期　健康天地　是有效防治本病发生发展的有效途径之一。干预方法应主要　包括：针对患者的不良情绪，如恐惧、焦虑等进行心理疏导，注　重医患交流，加强患者对医生的信任感与认同感，使其在信任　放松的状态和环境下接受口腔诊治。在此基础上，随着就诊次　数的增加，恐惧及焦虑心理也会逐渐减轻。同时，医生诊治手　段及水平也是减少牙科恐惧症发生的主要因素之一，只有娴熟　的技术，才能更有效的缓解患者的疼痛及疾病的困扰。因此，　本次研究中采用相关的心理干预方法，对患者进行临床诊治，　结果发现，心理干预治疗组无论是从焦虑、恐惧情绪的缓解程　度上，还是临床疗效，均优于正常治疗组。可见，提高心理服务　意识，在牙科诊治过程中给予患者所需的心理支持及辅导，可　参考文献　［１］　卞金有．口腔预防医学［Ｍ］．人民卫生出版社２００２，１：１０．　［２］　钱明波，袁正林，李曦慧，等．牙科畏惧症的现状调查及相　关心理因素分析［Ｊ］．广东牙病防治，２００５，１３（１）：３０　～３２．　［３］　杨少青．改良牙科焦虑量表及牙科焦虑病因的研究［Ｄ］．　北京医科大学硕士学位研究生论文，１９９４．　［４］　韩宁．牙科畏惧症［Ｊ］．北京口腔医学，２００３，１１（１）：５９　＿６１．　［５］　吴友农．概述牙科恐惧症［Ｊ］．牙体牙髓牙周病学杂志，　有效缓解患者的焦虑及恐惧等不良情绪或心理问题，从而提高　１９９７，７（３）：１９９．　临床疗效。　（上接第９页）　市地处结核病高发区有一定联系。统计资料显示，ＣＩＭＴ淋巴　［４］　刘艳，余卫业，王晓燕等．艾滋病合并结核病患者的免疫　细胞水平越低，发生结核病的几率越大，即处于艾滋病发病期　功能临床研究［Ｊ］．中国防痨杂志２００５，２（２７—１）：４９　的患者更易发生结核病；而当ＣＩＭＴ淋巴细胞水平较高时，发生　［５］Ｌｅｅ　ＷＲ．Ｃｌｉｎｉｃａｌ　Ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ　Ｄｉｓｅａｓｅ，１９９３，１７（ｓｕｐｐ１）：４４２　结核病的几率与正常人群相似。随着免疫力的降低，将使结核　～４４６　病发现难度和成本加大。针对这些情况，我们建议应加强对　［６］　赵龙凤，张缭云．结核病的现代诊断与治疗［Ｍ］．北京：中　ＨＩＶ／ＡＩＤＳ患者的免疫状况监测和结核病监测工作，做到早发　国医药科技出版社，２００１，９　现早治疗，才能有效降低ＴＢ／ＨＩＶ双重感染的病死率。　［７］Ｈａｒｒｙ　Ｈａｕｓｌｅｒ．Ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ＆ＨＩＶ／ＡＩＤＳ　Ｃｌｉｎｉｃａｌ　Ｇｕａｉｄｅ—　参考文献　ｌｉｎｅｓ，Ｌａｕｎｃｈｅｄ．　［１］　王喜文，董柏青．艾滋病和结核病双重感染的研究进展　［８］Ｋａｒｓｔａｅｄｔ　ＡＳ，Ｊｏｎｅｓ　Ｎ，Ｋｈｏｏｓａｌ　Ｍ，ｅｔ　１ａ．Ｔｈｅ　ｂａｃｔｅｒｉｏｌｏｇｙ　ｏｆ　［Ｊ］．中国热带医学，２００５，５（６）：１３３１　ｐｕｌｍｏｎａｒｙ　ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ　ｉｎ　ａ　ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ　ｗｉｔｈ　ｈｉ　ｇｈ　ｈｕｍａｎ　ｉｍ－　［２］　中国疾病预防控制中心，主编．艾滋病临床治疗与护理培　ｍｕｎｏｄｅｉｆｃｅｎｃｙ　ｖｉｕｒｓ　ｓｅｒｏｐｒｅｖｌａｅｎｃｅ［Ｊ］．Ｉｎｔ　Ｊ　Ｔｕｂｅｒｃ　Ｌｕｎｇ　训教材［Ｍ］．北京：北京大学医学出版社，２００３：１０４—１０６　Ｄｉｓ，１９９８，２：３１２～３１６　［３］　中华医学会结核病学分会．肺结核诊断和治疗指南［Ｊ］．　［９］　Ｍａｒｋ　Ｂｏｙｄ．ＨＩＶ—ＮＡＴ，ＨＩＶ／ＴＢ　ＢＯ—ｉｆｎｅｃｔｉｏｎ，　中华结核和呼吸杂志，２００１，２４（Ｉ）：７０—７４　ｈＴａｉｌａｎｄ．２０００　（上接第１Ｏ页）　我防卫能力相对减退，遇到生活事件较易导致心理失衡。同时　参考文献　随年龄的增加，生活事件发生率也增高。负性生活事件如家庭　［１］　刘文英．住院老年期精神患者的临床观察及护理［Ｊ］．护　不合、经济困窘、丧偶、人际关系紧张、慢性躯体疾病等，在起病　士进修杂志，２００８，（２２）：３６８—３６９．　诱因中起了“板机”作用　Ｊ。老年疾病的护理人员不仅要学会　［２］　杨丽．老年期精神病的护理经验［Ｊ］．中国现代医生，　老年疾病的专科护理和技巧，而且需要掌握老年患者护理安全　２００８，（１７）：９５—１００．　隐患及对策。作者在临床工作中，通过不断识别护理工作中现　［３］　李晓慧，邹晓清．临床护理风险事件分析与对策［Ｊ］．中华　存和潜在的风险，逐渐健全护理风险管理机制，收到了一定的　护理杂志，２００５，４０（５）：３７５．　效果，护理人员的法律意识、防范护理风险的意识和能力在不　［４］　秦仕英．儿科门诊分诊护理风险初探［Ｊ］．重庆医学，　断增强，护士能主动查找护理安全隐患并积极采取对策。　２００８，３６（４）：４４２．　（上接第１２页）　的室内和室问质量控制的基础上，两台仪器的的白蛋白检测结　［Ｊ］．Ａｐｐｒｏｖｅｄ　Ｇｕｉｄｅｌｉｎｅ　ＮＣＣＬＳ（Ｅｐ９一Ａ），１９９５．　果显示良好的相关性，线性回归方程良好，系统间的的预期偏　［２］杨昌国．精密度评价和方法比较中ＮＣＣＬＳ评价方案的应　倚可以接受，因此白蛋白可以在其中任一台仪器上检测，保证　用［Ｊ］．临床检验杂志，１９９９，１７（１）：４７－４９　了同一实验室测定结果的准确可靠，满足了临床的要求，更好　［３］　张凤川刘松坚卿翠莲．ＮＣＣＬＳ　Ｅｐ９一Ａ在仪器评价中的　的为临床服务。　应用［Ｊ］．第三军医大学学报，２００３，２５（４）：３５９—３６１．　参考文献’　［４］　柳渊洁陈进凡黄仕君・ＡＬＴ、ＡＳＴ、ＧＧＴ、ＡＫＰ、ＣＨＥ在两　［１］　Ｎａｉｌ。ｎａｌ　Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ　ｆｏｒ　Ｃｌｉｎｉｃａｌ　Ｌａｂ。ｍｔ。ｒｙ　Ｓｔａｎｄａｒｄｓ．Ｍｅｔｈ一　生化分析系统间的偏倚评估［Ｊ］・卫生职业教育，２００５，２３　０ｄ　ｏｆ　Ｃｏｍｐａｒｉｓｉ０ｎ　ａｎｄ　Ｂａｉｓ　Ｅｓｔｉｍａｌｒ０ｎ　ＵｓｉｎＲ　Ｐａｔｉｅｎｔ　Ｓａｍｐｌｅ　（１１）：１１４—１１５・　・１４・