亲硫层析介质(6FF) Thiophilic Adsorbent Beads 6FF
货号 BDTL0025-5 BDTL0025-10 BDTL0025-50 BDTL0025-250
规格 5ml 10ml 50ml 250ml
1. 产品介绍
本品可以快速有效地从血清、腹水或组织培养液中纯化抗体。本品的配体主要通过与抗体形成电子供体-受体复合物,从而达到对抗体的选择性吸附。本品使用耐压的基质,可以耐受最高0.3 MPa的压力,更稳定,可用于工业大规模抗体的纯化。
亲硫层析介质(6FF)性能表
指标 基质 配体 载量 粒径 (μm) 最大流速 pH 稳定范围 储存缓冲液 储存温度
性能
高度交联的6%琼脂糖微球 巯基乙醇
>20mg人lgG/ml介质 45-165 0.3 MPa, 3 bar 3-11
含20%乙醇的1×PBS 2-8℃
2. 纯化流程 2.1 Buffer的准备
所用水和Buffer在使用之前建议用0.22μm 或0.45 μm滤膜过滤。 Binding Buffer:50mM磷酸盐,0.5M硫酸钠,pH 8.0 Elution Buffer:50mM磷酸盐,pH 8.0
Sample Buffer:50mM磷酸盐,0.5M硫酸钠,pH 8.0 Regeneration Buffer:50mM磷酸盐,30%异丙醇,pH 8.0
注:原则上高盐上样低盐洗脱。盐可以选择硫酸钠、硫酸钾和硫酸铵,都可以促进本品对抗体的吸附。 2.2 样品准备
上柱之前要确保样品溶液有合适的离子强度和pH值,可以用结合/洗涤缓冲液对血清样品、腹水或细胞培养液稀释,或者样品用结合/洗涤缓冲液透析。
样品在上样前建议离心或用0.22μm 或0.45μm滤膜过滤,减少杂质,提高蛋白纯化效率和防止堵塞柱子。 2.3 样品纯化
将本品装入合适的层析柱,层析用5倍柱体积的Binding Buffer进行平衡,使层析介质处于与目的蛋白
相同的缓冲体系下,起到保护蛋白的作用。
将样品加到平衡好的层析介质中(保证目的蛋白与层析介质充分接触,提高目的蛋白的回收率),收集
流出液。
用10-15倍柱体积的Binding Buffer进行清洗,去除非特异性吸附的杂蛋白,收集洗杂液。 使用5-10倍柱体积的Elution Buffer,收集洗脱液,即目的蛋白组分。
依次使用3倍柱体积的Binding Buffer和5倍柱体积的去离子水平衡层析介质,最后再用5倍柱体积的
20%的乙醇平衡,然后保存在等体积的20%的乙醇中,置于4℃保存,防止层析介质被细菌污染。 2.4 SDS-PAGE检测
将使用纯化产品得到的样品(包括流出组分、洗杂组分和洗脱组分)以及原始样品使用SDS-PAGE检测纯化效果。 3. 层析介质清洗
本品可以重复使用而无需再生,但随着一些变性物质的沉淀和蛋白的聚集,往往造成流速和结合载量都下降,严重影响柱子的性能,这时需要对层析介质进行清洗。
Elution Buffer洗脱后用5-10倍柱体积的Regeneration Buffer清洗 5倍柱体积的去离子水平衡填料
最后再用5倍柱体积的20%的乙醇平衡,然后保存在等体积的20%的乙醇中,置于4度保存,防
止填料被细菌污染
4. 可耐受试剂
试剂
β-Mercaptoethanol CHAPS DTT, DTE EDTA, EGTA Ethanol Ethylene glycol HEPES Glycerol* Guanidinium Imidazole KCl MES MOPS NaCl NP-40 Phosphate SDS Tris Urea
可耐受浓度 不耐受 不耐受 不耐受 10 mM 30% 不耐受 50 mM 20%* 不耐受
200 mM (pH 7.0–8.0条件下) 500 mM 20 mM 50 mM 1.0 M 不耐受 50 mM 不耐受 50 mM 不耐受
* 上样中Glycerol(甘油)不耐受,样品缓冲液不推荐使用含甘油的缓冲液
5. 抗体纯化介质一览表
通用性抗体纯化产品
BDTL0001-1 蛋白A层析介质 (普通型、高载量、特异性优良) BDTL0001-5 BDTL0001-25 BDTL0001-100 蛋白A重力预装柱套装 (内含1支3ml重力预装柱,以及3次量的缓冲液) 1ml 5ml 25ml 100ml BDTL0001-K 套 BDTL0002-5 蛋白A高速层析介质(4FF) (高流速、高载量、特异性优良、耐压) BDTL0002-25 BDTL0002-100 5ml 25ml 100ml
BDTL0002-11 BDTL0002-51 蛋白A高速层析介质(4FF)预装柱 (预装柱、高流速、高载量、配套BioRad和GE等公司机器) BDTL0002-15 BDTL0002-55 BDTL0002-3115 BDTL0003-1 蛋白G层析介质 (普通型、高载量、特异性优良) BDTL0003-5 BDTL0003-25 BDTL0003-100 蛋白G重力预装柱套装 (内含1支3ml重力预装柱,以及3次量的缓冲液) BDTL0003-K BDTL0004-5 蛋白G高速层析介质(4FF) (高流速、高载量、特异性优良、耐压) BDTL0004-25 BDTL0004-100 BDTL0004-11 BDTL0004-51 蛋白G高速层析介质(4FF)预装柱 (预装柱、高流速、高载量、配套BioRad和GE等公司机器) BDTL0004-15 BDTL0004-55 BDTL0004-3115 BDTL0021-5 蛋白A/G高速层析介质(4FF) (用于IP、Co-IP实验) BDTL0021-25 BDTL0021-200 BDTL0022-5 蛋白L层析介质 (结合更广泛来源及亚类的抗体) BDTL0022-25 BDTL0022-200 单克隆抗体纯化产品
BDTL0005-10 蛋白A高速耐碱层析介质(4FF) (耐碱、高流速、高载量、特异性优良、耐压、高稳定性) BDTL0005-100 BDTL0005-500 蛋白A高速耐碱层析介质(4FF)预装柱 (预装柱、耐碱、高流速、高载量、耐压、高稳定性、配套BioRad和GE等公司机器) BDTL0005-11 BDTL0005-51 BDTL0005-15 10ml 100ml 500ml 1×1ml 5×1ml 1×5ml 1×1ml 5×1ml 1×5ml 5×5ml 3×1ml+1×5ml 1ml 5ml 25ml 100ml 套 5ml 25ml 100ml 1×1ml 5×1ml 1×5ml 5×5ml 3×1ml+1×5ml 5ml 25ml 200ml 5ml 25ml 200ml
BDTL0005-55 BDTL0005-3115 多克隆抗体纯化产品
预活化层析介质(抗原偶联专用) 核酸、小分子等。适合偶联抗原纯化多克隆抗体) BDTL0006-5 5ml 25ml 100ml 5ml 10ml 50ml 250ml 5×5ml 3×1ml+1×5ml (预活化层析介质,可以和氨基、巯基反应,用来偶联蛋白、BDTL0006-25 BDTL0006-100 BDTL0025-5 亲硫层析介质 (快速从血清、腹水或组织培养液中纯化抗体) BDTL0025-10 BDTL0025-50 BDTL0025-250
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