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组培苗抗旱模拟试验

2020-04-03 来源:易榕旅网
比较了在固体培养基中分别添加5%,10%,15%,20%的PEG-8000模拟干旱胁迫和对照处理下(不含PEG-8000)组培苗生长指标的变化,对供试品种组培苗的株高、最大根长、茎鲜质量、根鲜质量、茎干质量、根干质量和植物水分含量共7个生长指标进行测定和分析。结果表明,随着胁迫处理PEG-8000浓度的增加,所有材料的组培苗表现出受干旱胁迫现象越严重,当固体培养基中PEG-8000浓度为15%时,11个品种间的差异最大,所测的7个指标值均显著低于对照,是鉴定马铃薯品种组培苗对干旱胁迫反应的最佳浓度。

PEG-8000配置方法

1、营养琼脂→ 高压灭菌→ 倒培养基→ 平衡24h → 弃去余液

PEG-8000→过晒(0.22um)→→→→→↑(Corine M,2000)

具体做法是,将大约20ml的PEG-8000溶液倒入等体积已凝固的培养基上,平衡24小时,然后倒掉平衡过剩的PEG溶液。一般认为,24小时内,PEG会扩散到琼脂内,于是琼脂MS培养基的水势会降低,24小时是足够长的时间使得MS培养基的上下水势一致。

2、PEG模拟水分胁迫 采用聚乙二醇(PEG-8000)模拟水分胁迫法。参考Gopal和Iwama

的方法,将固体 PEG溶解至无菌液体培养基中( 含1/2MS培养基和MES缓冲剂) ,PH值调至5.8+-1,之后把含PEG的液体培养基等体积倒入含有固体培养基( 琼脂8g/L,蔗糖30g/L)的培养瓶中,固体培养基和液体培养基平衡48h,即PEG完全渗透到固体培养基中

后,把上层液体培养基从培养瓶中倒掉,所得的固体培养基即为含PEG固体培养基。

生物量的测定 干旱胁迫3周后,用无菌水把植物根部含PEG的培养基清洗干净,用吸水纸吸去附着在植物上的水分。测定相关生长指标( 根长、根鲜质量、根干质量、茎鲜质量、茎干质量、株高) ,将根与茎叶部分从根基部剪开,测量最大根长和株高,用分析天平称取茎叶和根两部分鲜质量并记录,将植株置于80℃烘箱内烘干24h,至植物干质量为恒重为止,称取干质量并记录。

干旱胁迫下的相对值计算参考王俊娟等的方法,公式如下:

相对生长指标=( 处理生长指标/对照生长指标)*100%

植物含水量= ( 鲜质量 - 干质量)/鲜质量*100%

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