影响血液凝固的因素

一．实验目的

1. 学习家兔的基本手术操作 2. 观察血液凝固现象 3. 了解血液凝固的基本过程 4. 观察某些因素对血液凝固的影响

二．实验材料

1. 实验动物 家兔

2. 器材与药品 哺乳动物实验动物手术器械一套,清洁小试管6支,水浴装置1套,冰块,棉花、液状石蜡,肝素,草酸钾,,肺组织悬液,生理盐水等

三．实验方法与步骤

1. 动物手术

(1)将家兔称重后,按5ml/kg的剂量自耳缘静脉缓慢注射20%乌拉坦 （2）麻醉完成后将家兔以仰卧位固定于兔手术台上,将颈部被毛用粗剪剪去

（3）在颈部腹面正中从甲状软骨水平至胸骨上缘(约一指)连线正中做一长5~7cm的纵形切口,依次钝性分离皮下组织、肌肉及气管表面结缔组织直至暴露气管。

（4）分离一侧的颈总动脉,将颈总动脉游离2~3cm,穿双线备用。用其中一线结扎颈总动脉远心端,近心端用动脉夹夹闭。用眼科剪在颈总动脉靠近远心端结扎线处剪一斜口(约45度)将动脉插管向心脏方向

插入动脉内约1cm,用另一线结扎,以备取血。 （5）分离气管,行气管插管术。

2. 实验准备 准备好6个试管,并对人员进行分工。 编号 1 2 3 4 5 6 7 对照 实验条件 加棉花少许 用液状石蜡润湿试管表面 置于37摄氏度水浴槽中保温 置于水浴槽中 加肝素8U 1~2滴(加血后摇匀) 加草酸钾1-2ml(加血后摇匀) 加肺组织悬液0、1ml 不加 凝血所需时间 分析讨论 3. 取血 打开动脉夹,经颈总动脉插管放血入各试管中,每支试管采血约1ml。注意及时记录采血完成时间并将各试管尽快置于其实验条件下,5,6两支试管加入血液后要充分摇匀。 4. 理化因素对血液凝固的影响及其结果观察

接触面粗糙程度、温度以及试剂对血液凝固的影响 观察各试管内血液凝固所需时间。在每支试管采血完成后开始计时,每隔15s将试管轻轻倾斜1次,观察试管中的血液就是否凝固,发现血液呈凝胶状不再流动时停止计时,以此得到各试管血液凝固所需时间。在本实验条件下,超过30min血液未凝可视为“不凝”。

四．实验结果

不同理化环境中血液凝固的时间

编号 1 2 3 4 5 6 7 实验条件 对照管 少许棉花 液体石蜡润滑试管内表面 37℃水槽中 肝素8U 2%草酸钾溶液1、5ml 肺组织液0、1ml 凝血时间 16min 15s 8min 45s 23min 11s 9min 37s 55min 11s 不凝 6min 47s 五．实验讨论 注意事项:

1、 采血时要一次性将全部试管采血完毕,多次放血可能导致动脉

插管内血液发生凝固,阻塞插管。

2、 各血管的采血量要大致相等。

3、 观察液体石蜡润滑过的试管内的血液就是否凝固时,要在倾斜试管的同时,用手指轻弹试管底部,以排除表面张力等因素造成的血液已凝固的假象。

4、 草酸钾为结晶固体,加入血液后要充分混匀

结果分析:

石蜡能使试管表面光滑从而延长凝固时间。

肝素主要就是主要就是通过与抗凝血酶Ⅲ结合引起抗凝血酶Ⅲ构型发生变化,加速凝血酶-凝血酶复合体形成而产生抗凝作用。

草酸钾作用原理就是溶解后解离的草酸根与血液中的Ca2+形成草酸钙沉淀,使Ca2+失去凝血功能,凝血过程被阻断。

肺组织激活外源性凝血途径加速凝血。