生长素在芦笋组培扩繁体系中的影响

第６期　华东师范大学学报（自然科学版）　Ｎｏ．６　２０１０年１１月　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｅａｓｔ　Ｃｈｉｎａ　Ｎｏｒｍａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ（Ｎａｔｕｒａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅ）　Ｎｏｖ．２０１０　文章编号：１０００－５６４１（２０１０）０６—０１０１—１０８　生长素在芦笋组培扩繁体系中的影响　王婧宇，　张雪平，　杨　如，　李小方　（华东师范大学生命科学学院，上海２０００６２）　摘要：对芦笋ＵＣ３０８侧芽增殖和生根诱导中生长素的作用规律进行研究．发现不添加任何外　源生长素，芦笋仍有较高的侧芽萌发率；而对于愈伤组织的形成，外源生长素是必不可少的．使　用０．０５　ｍｇ／Ｌ　ＮＡＡ进行侧芽诱导，浓度为１．０　ｍｇ／Ｌ　ＮＡＡ进行愈伤组织的诱导较为适宜．在　侧芽诱导过程中，ＮＡＡ浓度大于２．０　ｍｇ／Ｌ时，不会对后期的不定根的形成产生影响．比较４种　生长素ＩＡＡ，ＮＡＡ，ＩＢＡ和２，４－Ｄ对芦笋生根诱导效果，发现ＩＢＡ最为适宜，２，４一Ｄ对芦笋生根　无明显促进作用．　关键词：芦笋；生长素；组织培养；生根　中图分类号：Ｑ９４　文献标识码：Ａ　Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ａｕｘｉｎｓ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｐｒｏｐａｇａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ａｓｐａｒａｇｕｓ　ｏｆｆｉｃｉｎａｌｉｓ　Ｌ．　ＷＡＮＧ　Ｊｉｎｇ—ｙｕ，　ＺＨＡＮＧ　Ｘｕｅ—ｐｉｎｇ，　ＹＡＮＧ　Ｒｕ，　ＬＩ　Ｘｉａｏ—ｆａｎｇ　（Ｓｃｈｏｏｌ　ｏｆ　Ｌｉｆｅ　Ｓｃｉｅｎｃｅ，Ｅａｓｔ　Ｃｈｉｎａ　Ｎｏｒｍａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｓｈａｎｇｈａｉ　２０００６２，Ｃｈｉｎａ）　Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｈｅ　ｒｏｌｅｓ　ｏｆ　ａｕｘｉｎ　ｐｌａｙｅｄ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｐｒｏｐａｇａｔｉｏｎ　ｏｆ　ａｓｐａｒａｇｕｓ　ｗｅｒｅ　ｓｔｕｄｉｅｄ．Ｅｘｏｇｅｎｏｕｓ　ａｕｘｉｎ　ｗａｓ　ｎｅｃｅｓｓａｒｙ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｆｏｒｍａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｃａｌｌｉ，ｗｈｉｌｅ　ｉｔ　ｗａｓｎ’ｔ　ｎｅｃｅｓｓａｒｙ　ｄｕｒｉｎｇ　ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｓｈｏｏｔｓ．Ｔｈｅ　ｂｅｓｔ　ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｓｈｏｏｔｓ　ｗａｓ　ａｃｈｉｅｖｅｄ　ｗｉｔｈ　０．０５　ｍｇ／Ｌ　ＮＡＡ，ａｎｄ　ｍｏｒｅ　ｃａｌｌｉ　ｉｎｄｕｃ一　ｔｉｏｎ　ｎｅｅｄｅｄ　ｏｖｅｒ　１．０　ｍｇ／Ｌ　ＮＡＡ．Ｔｈｅ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　ＮＡＡ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｓｈｏｏｔｓ　ｈａｄｎ’　ｔ　ｆｕｒｔｈｅｒ　ｉｎｆｌｕｅｎｃｅ　ｏｎ　ｒｏｏｔｉｎｇ．Ｃｏｍｐａｒｉｎｇ　ｔｈｅ　ｆｏｕｒ　ｓｏｒｔｓ　ｏｆ　ａｕｘｉｎｓ，ＮＡＡ，ＩＡＡ，ＩＢＡ　ａｎｄ　２，４－Ｄ　ｄｕｒｉｎｇ　ｒｏｏｔｓ　ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ａｓｐａｒａｇｕｓ，ＩＢＡ　ｉｓ　ｔｈｅ　ｂｅｓｔ　ｃｈｏｉｃｅ　ｂｏｔｈ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｑｕａｌｉｔｙ　ａｎｄ　ｒａｔｅ　ｏｆ　ｔｏｏ—　ｔｉｎｇ．　Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：　ａｓｐａｒａｇｕｓ；　ａｕｘｉｎ；ｔｉｓｓｕｅ　ｃｕｌｔｕｒｅ；　ｒｏｏｔｉｎｇ　０　引　言　芦笋（Ａｓｐａｒａｇｕｓ　ｏｆｆｉｃｉｎａｌｉｓ　Ｌ．）又名石刁柏、龙须菜，是百合科天门冬属多年生草本植　物，其富含天门冬酰胺、芦笋苷以及多种甾体皂苷成分，对癌症、高血压、心脏病等有特殊疗　效　，是我国重要的创汇作物之一．芦笋雌雄异株，利用种子繁殖，周期长，进口种子价格高，　这导致国内芦笋生产受到一定程度的制约．利用组织培养的技术可以保存亲本的优良品质，　收稿日期：２０１０－０１　基金项目：上海市科委专项重点项目（０７ＤＺ１２０４３）　第一作者：王婧宇，女，硕士研究生，研究方向为植物分子生物学．Ｅ—ｍａｉｌ：５１０７１３０００１５＠ｅｃｎｕ．ｃｎ．　通讯作者：李小方，女，副教授，研究方向为植物分子生物学．Ｅ－ｍａｉｌ：ｘｆｌｉ＠ｂｉｏ．ｅｃｎｕ．ｃｎ．　１０２　华东师范大学学报（自然科学版）　快速获得大量组培苗，在一定程度上降低种植成本．　在芦笋组培研究中，由于不同基因型的芦笋对培养基组成成分和激素要求不　］，每　一个新品种组培体系的建立几乎都经历一个全新的探索过程，这极大地增加了组培体系建　立的时间和成本．在组织培养众多影响因素中，生长素是一类重要的、不可或缺的激素，尤其　在脱分化和不定根诱导阶段，对多数植物来讲生长素都起着关键的作用Ｅ４，ｓ３，即使在芽诱导　中，少量的生长素也能起到促进作用．本文以芦笋ＵＣ３０８为实验材料，研究贯穿芦笋组培各　个阶段生长素在其中的作用规律，以缩小在今后工作中生长素筛选的范围．　１材料与方法　１．１　材料　芦笋ＵＣ３０８　Ｆ１种子，３０℃温水浸种２　ｄ后，经７５　酒精消毒１０　ｓ，２５％次氯酸钠消毒　１５　ｍｉｎ后，无菌水冲洗４～５次，播种在１／２　ＭＳ培养基上，（２２±２）℃，２４　ｈ光照培养，３０　ｄ　左右可获得无菌苗．　１．２方法　１．２．１　ＮＡＡ在侧芽和愈伤诱导中的影响　以ＭＳ＋０．５　ｍｇ／Ｌ　ＢＡ＋３　蔗糖＋０．５５　琼脂为基本培养基，添加ＮＡＡ浓度分别为：　０，０．０５，０．２，０．５，１．０，２．０　ｍｇ／Ｌ．取ＵＣ３０８无菌苗的幼嫩茎节，约１．５　ｃｍ，竖直插入上　述培养基，每种处理样本数大于３Ｏ个，观察其侧芽和愈伤的形成情况．外植体侧芽分化百分　率：分化侧芽的外植体数／总外植体数Ｘ　１００　；平均侧芽数：长度大于１　ｅｍ较为粗壮的芽　总数／总外植体数；愈伤形成率＝愈伤组织数／总外植体数×１００　．　不同浓度ＮＡＡ培养基上诱导的第一代侧芽，截取茎节，置于与其第一代相同的培养基　上培养，观察同种培养基上继代增殖的情况．　１．２．２诱导侧芽的ＮＡＡ浓度对生根培养的影响　将由不同ＮＡＡ浓度诱导的第二代侧芽置于生根培养基ＭＳ＋０．０２　ｍｇ／Ｌ　ＢＡ＋　１．０　ｍｇ／Ｌ　ｐｐ３３３＋０．２　ｍｇ／Ｌ　ＮＡＡ＋３　蔗糖＋０．５５　琼脂中诱导生根，１５　ｄ后，转入ＭＳ＋　０．０２　ｍｇ／Ｌ　ＢＡ＋３　蔗糖＋０．５５％琼脂中培养，统计生根情况．　１．２．３不同生长素对芦笋生根诱导的影响　将在０．２　ｍｇ／Ｌ　ＮＡＡ培养基上诱导的第二代侧芽接种到生根培养基中，诱导１５　ｄ后，　转入ＭＳ＋０．０２　ｍｇ／Ｌ　ＢＡ＋３　蔗糖＋０．５５％琼脂中培养，统计生根情况．生根培养基为　ＭＳ＋０．０２　ｍｇ／Ｌ　ＢＡ＋１．０　ｍｇ／Ｌ　ｐｐ３３３＋３％蔗糖＋０．５５　琼脂，添加不同种类和不同浓度　的生长素，生长素种类有：ＮＡＡ，ＩＡＡ，ＩＢＡ，２，４　Ｄ　ｒ所设浓度梯度为：０．２，０．５和１．０　ｍｇ／Ｌ￣以　不添加任何生长素的培养基作为空白对照．　１．２．４分析方法　以上所有处理样本数均大于３０，实验至少重复３次，数据采用ＳＰＳＳ统计分析软件和　ＥＸＣＥＬ进行分析．　２结果与分析　２．１　ＮＡＡ对芦笋侧芽和愈伤诱导的影响　将芦笋幼嫩茎节接种于含０．５　ｍｇ／Ｌ　６－ＢＡ并添加不同浓度的ＮＡＡ培养基中，结果发　第６期　王婧宇，等：生长素在芦笋组培扩繁体系中的影响　１０３　现，第一代芦笋茎节在接种的第７天就已经开始侧芽分化；到第１４天，低浓度ＮＡＡ处理的　茎节侧芽分化率可超过８０　；培养２８　ｄ，即使不添加任何生长素，芦笋侧芽分化率也可达　８６．８６　，说明外源生长素并不是芦笋侧芽分化所必需的条件；添加少量的ＮＡＡ可以进一　步提高外植体的侧芽分化率，在实验的ＮＡＡ浓度中，０．２　ｍｇ／Ｌ　ＮＡＡ处理的侧芽分化率最　高，可达到９４．７３　．但当ＮＡＡ的浓度＞Ｏ．５　ｍｇ／Ｌ时，外植体的分化率开始受到外源生长　素的抑制（见图１）．对２８　ｄ时外植体侧芽分化率进行卡方检验发现，在０～２．０　ｍｇ／Ｌ的范　∞　∞　＼料求　抵蕃　靶　∞如　如围内，ＮＡＡ浓度对侧芽的萌发率有极其显著的影响，　＝３０．７８５，Ｐ＝０．０００，但低浓度如　０～Ｏ．５　ｍｇ／Ｌ之间，高浓度如１．０～２．０　ｍｇ／Ｌ　ＮＡＡ处理之间并无显著差异，其转折点在　ＮＡＡ浓度为Ｉ．０　ｍｇ／Ｌ处，与０．５　ｍｇ／Ｌ处理存在显著差异，　。＝４．７９６，Ｐ＝０．０２９．在与第　一代侧芽相同的激素水平下诱导第二代侧芽仍存在相似的规律（见图２），低浓度的ＮＡＡ可　促进侧芽分化，而高浓度的ＮＡＡ抑制侧芽的形成，当ＮＡＡ浓度为０．０５　ｍｇ／Ｌ时，１Ｏ０　的　外植体都可分化出侧芽，０．５　ｍｇ／Ｌ和１．０　ｍｇ／Ｌ　ＮＡＡ之间存在显著性差异，　＝８．６６９，　Ｐ＝０．０３．对两代侧芽分化率进行卡方检验，Ｐ值均大于０．０５，两代问无显著差异，可见　ＮＡＡ对侧芽分化率存在比较稳定的影响，不因培养代数的改变而发生较大变化．对接种　２８　ｄ每个外植体分化的平均侧芽数进行统计发现，不添加外源ＮＡＡ的培养基中第一代平　均侧芽数最多，随着外源ＮＡＡ浓度的升高这一数值逐渐降低（见图３）；第二代平均侧芽数　在０．０５　ｍｇ／Ｌ　ＮＡＡ处理中明显超过其它浓度水平，可达到每个外植体形成３．５个侧芽，在　超过０．０５　ｍｇ／Ｌ　ＮＡＡ后，随外源ＮＡＡ浓度的升高而降低；从总体上来看，第二代平均侧芽　数高于第一代（见图３）．由于芦笋组培芽增殖一次后生根效率最高　］，因而在不考虑芽诱导　培养基对生根影响的前提下，选用ＮＡＡ为０．０５　ｍｇ／Ｌ的培养基进行侧芽的诱导和继代，可　以在一定程度上提高芦笋的组培扩繁率．　口０　ｍｇ／Ｌ　■Ｏ．０５ｍｇ／Ｌ　日０．２ｍｇ／Ｌ　皿０．５ｍｇ／Ｌ　口１　ｒｎｇＣｃ　口２　ｍ　Ｌ　生长天数，ｄ　图１　ＮＡＡ浓度对不同时期第一代外植体侧芽分化百分率的影响　Ｆｉｇ．１　Ｔｈｅ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ＮＡＡ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｐｅｒｃｅｎｔａｇｅ　ｏｆ　ａｄｖｅｎｔｉｔｉｏｕｓ　ｓｈｏｏｔ　ｂｕｄ　ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ　ｏｕｔ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｆｉｒｓｔ　ｅｘｐｌａｎｔ　ｏｖｅｒ　ｔｉｍｅ　对芦笋愈伤组织的形成而言，外源生长素是必不可少的，不添加生长素则无任何愈伤形　成，随着ＮＡＡ浓度的升高，形成愈伤组织的百分率逐渐升高，当ＮＡＡ浓度为２．０　ｍｇ／Ｌ　时，诱导愈伤率可达到４５．２　（见图４），明显高于其它低浓度的培养基．在研究中发现，诱导　愈伤的外植体可选用没有茎节的茎间部分，平放人培养基中，增大外植体与培养基的接触面　１０４　华东师范大学学报（自然科学版）　积，这样可以充分利用外植体并提高愈伤组织形成率．第二代愈伤组织形成情况与第一代相　同，在无外源生长素时仍无愈伤形成，总体上愈伤形成率随ＮＡＡ浓度的升高而增加，　０．２　ｍｇ／Ｌ－￣０．５　ｍｇ／Ｌ　ＮＡＡ的愈伤百分率间存在显著性差异，　。：４．０１２，Ｐ：０．０４５，　ＮＡＡ浓度＞／０．５　ｍｇ／Ｌ时，愈伤形成率无显著性差异．第二代愈伤形成率均大于第一代，但　卡方检验无显著差异，Ｐ值均大于０．０５（见图４）．　＼料　妞　抵阜　、　撤蘑霸　４　３　３　２　２　ｌ　加　∞　舳　∞　∞　加　０　Ｏ　５　Ｏ　５　Ｏ　５　口第一代　口第二代　０．００　０．０５　０．２０　０．５０　１．００　２　００　ＮＡＡ浓度／（ｍｇ・Ｌ－　１　图２　ＮＡＡ浓度对外植体侧芽分化百分率的影响　Ｆｉｇ．２　Ｔｈｅ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ＮＡＡ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｐｅｒｃｅｎｔａｇｅ　ｏｆ　ａｄｖｅｎｔｉｔｉｏｕｓ　ｓｈｏｏｔ　ｂｕｄ　ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ　ａｔ　２８ｔｈ　ｄａｙ　代　代　１．Ｏ　０．５　Ｏ．ＯＯ　Ｏ．Ｏ５　０．２０　Ｏ．５０　１．Ｏ０　２．ＯＯ　ＮＡＡ浓度／（ｍｇ・Ｌ－　１　图３　ＮＡＡ浓度对诱导侧芽的影响　Ｆｉｇ．３　Ｔｈｅ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ＮＡＡ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｍｅａｎ　ｎｕｍｂｅｒ　ｏｆ　ｓｈｏｏｔｓ　ｄｅｖｅｌｏｐｅｄ　ｗｉｔｈｉｎ　２８　ｄａｙｓ　２．２诱导侧芽的ＮＡＡ浓度对生根培养的影响　将前期不同浓度ＮＡＡ诱导的侧芽接种于同种生根培养基上诱导生根，由图５可见，除　浓度为２．０　ｍｇ／Ｌ的处理之外，其它浓度ＮＡＡ诱导的侧芽在生根率上并无显著性差异，由　此可见，尽管前期诱导所用不同浓度的生长素会显著影响侧芽分化率，但低于１．０　ｍｇ／Ｌ的　ＮＡＡ处理并不会明显改变所形成的侧芽对后期生根处理中激素的响应，因而在选择生根　所用外植体时，可以选择侧芽萌发率最高的诱导方式，对于ＵＣ３０８来说，在芦笋侧芽的诱导　第６期　王婧字，等：生长素在芦笋组培扩繁体系中的影响　１０５　和继代培养中选择侧芽形成率最高的０．０５　ｍｇ／Ｌ　ＮＡＡ即可．２．０　ｍｇ／Ｌ　ＮＡＡ诱导的侧芽　生根率显著低于其它浓度处理，可能与其直径较为纤细，生长状态不佳，以及前期累积的生　长素过多抑制生根有关．　∞　如　∞　如　加　ｍ　０　｛｝｛卜　求　口第一代　口第二代　接　０．００　０　０５　０＿２０　０．５０　１．００　２．００　ＮＡＡ浓度／（ｍｇ・Ｌ一１　图４　ＮＡＡ浓度对愈伤组织形成的影响　Ｆｉｇ．４　Ｔｈｅ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ＮＡＡ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｐｅｒｃｅｎｔａｇｅ　ｏｆ　ｃａｌｌｉ　ｉｎｄｕｃｅｄ　ｗｉｔｈｉｎ　２８　ｄａｙｓ　４５　ａ　ａ　４０　３５　ａ　ａ　ａ　ｏ　褂２５　裔２０　等１５　ｂ　１０　Ｏ　。　０．０Ｏ　０．０５　０．２０　０．５０　１．００　２．００　ＮＡＡ浓度／（ｍｇ・Ｌ－　图５诱导侧芽的不同ＮＡＡ浓度对生根率的影响　Ｆｉｇ．５　Ｔｈｅ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ＮＡＡ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ｕｓｅｄ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｓｈｏｏｔ　ｂｕｄ　ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｒｏｏｔｉｎｇ　ｒａｔｅ　注：经卡方检验，ａ，ｂ间Ｐ＜０．０５，存在显著性差异　２．３不同生长素对芦笋生根诱导的影响　芦笋在不添加任何生长素的对照处理下，少量个体仍可生根，生根率较低，添加生长素　ＮＡＡ，ＩＡＡ和ＩＢＡ可以显著提高生根率（见图６）．在实验所设的３种生长素浓度中，芦笋对　ＮＡＡ最为敏感，在０．２　ｍｇ／Ｌ的ＮＡＡ处理下就达到其最高生根率，其生根率为３５．４８　，　ＩＡＡ和ＩＢＡ则在浓度为０．５　ｍｇ／Ｌ时达到最高生根率２８．５７　和５３．３３　．之后随着外源生　长素浓度增加，生根率下降．２，４－Ｄ在所设浓度下未表现出对生根的促进作用．在出根时间　和根的形态上，ＮＡＡ，ＩＡＡ和ＩＢＡ这３种生长素之间也存在差异，ＩＡＡ和ＩＢＡ诱导下根形　成较早，生根处理１５　ｄ左右，即可见不定根形成，而ＮＡＡ诱导出根较晚．如图７，ＩＢＡ和　ＩＡＡ所诱导的根，其与茎的连接处无可见的愈伤组织；而ＮＡＡ诱导下，早期可见茎的末端　第６期　王婧宇，等：生长素在芦笋组培扩繁体系中的影响　１０７　３　讨　论　生长素在芦笋芽和愈伤诱导中的作用规律符合其在组培中的一般规律，即低浓度的生　长素有利于芽的生长，高浓度的生长素促进愈伤组织的形成．芦笋芽的诱导并不是其组培中　的难点，不同品种问诱导侧芽分化的激素种类及水平虽不尽相同，但多处于一个较为相近的　范围内，如徐化凌等　在耐盐芦笋组培快繁技术研究中用于芽分化的ＮＡＡ浓度为　０．２　ｍｇ／Ｌ；李祖鑫等　使用０．０５　ｍｇ／Ｌ的ＩＡＡ进行芽的分化；张元国等　在启动培养基中　不使用生长素，增殖培养基中则添加０．０５　ｍｇ／Ｌ　ＮＡＡ．从实验结果可见，当ＮＡＡ浓度Ｏ～　０．５　ｍｇ／Ｌ时外植体侧芽分化率无显著差异，即在这一范围内，外源生长素并不会打破芦笋　茎节分化侧芽所需的内源激素平衡，当生长素ＮＡＡ浓度达到１．０　ｍｇ／Ｌ时，这～平衡即被　打破，芦笋外植体细胞更倾向于脱分化的途径发育形成愈伤组织．生长素在芦笋愈伤的诱导　中是不可或缺的重要因素，赵洁等在研究也发现无外源生长素，芦笋外植体并不形成愈伤，　使用２，４－Ｄ和ＮＡＡ都可获得较高的愈伤诱导率＿】　，但２，４一Ｄ诱导的愈伤组织多属于诱导　胚性愈伤，不易进行芽的分化　成率和形态产生影响．　芦笋生根诱导是其组培扩繁的瓶颈，以往的研究发现进行继代培养　和添加赤霉素抑　制剂都可有效的提高芦笋生根率　，但不可忽视生长素仍是促进不定根形成的主要激　］，因而选用ＮＡＡ进行愈伤组织的诱导．本实验中ＮＡＡ　浓度在０．５～２．０　ｍｇ／Ｌ之间都可得到较高的诱导率，但应注意ＢＡ浓度的变化也会对其形　素＿１　．ＩＡＡ，ＮＡＡ，ＩＢＡ和２，４－Ｄ是一类人工合成的生长素类似物，其对芦笋生根的影响有　所不同，选择适当的生长素种类和浓度可促进生根率的显著提高．由实验结果可见，在４种　生长素中，单独使用时，２，４－Ｄ对芦笋生根无明显促进作用，赵洁等口叩在利用２，４－Ｄ诱导芦　笋愈伤组织生根时，所获得的生根率也是在１Ｏ　左右．ＮＡＡ在生根诱导中会产生大量的愈　伤组织，可能与它适于芦笋细胞脱分化诱导有一定的关系．ＩＢＡ更适合于芦笋生根诱导，可　能是由于其性质较ＩＡＡ更为稳定，且不易诱导芦笋细胞脱分化形成愈伤而影响根的形成和　生长．总的来看，单独的生长素诱导生根都不甚理想，在我们的实验体系中生根率最高也不　足６０　，个别单独使用ＩＢＡ诱导ＵＣ３０８使得生根率达到９０　以上　的结论很难重复出　来，因此在成功报道芦笋生根方面常常是两种或三种生长素组合搭配使用，会普遍提高其生　根率￣ｉ６，ｉ７］．　［参　考　文　献］　孙春艳，赵伯涛，郁志芳，等．芦笋的化学成分及药理作用研究进展口］．中国野生植物资源，２００４，２３（５）：卜５．　ＳＵＮ　Ｃ　Ｙ，ＺＨＡＯ　Ｂ　Ｔ，ＹＵ　Ｚ　Ｆ，ｅｔ　ａ１．Ｔｈｅ　ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ　ｏｆ　ｃｈｅｍｉｃａｌ　ｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ　ｉｎ　Ａｓｐａｒａｇｕｓ　ｏｆｆ，＂ｃｉｎａｌｉｓ　ａｎｄ　ｔｈｅｉｒ　ｍｅｄｉａｌ　ｅｆｆｅｃｔｓ［Ｊ］．Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｗｉｌｄ　Ｐｌａｎｔ　Ｒｅｓｏｕｒｃｅｓ，２００４，２３（５）：１－５．　张慧军，岳建雄，王永杰，等．芦笋离体培养快速繁殖技术研究［Ｊ］．北京农业科学，２００１（１）：２１　２２．　ＺＨＡＮＧ　Ｈ　Ｊ，ＹＵＥ　Ｊ　Ｘ，ＷＡＮＧ　Ｙ　Ｊ，ｅｔ　ａ１．Ｉｎ　ｖｉｔｒｏ　ｃｌｏｎａｌ　ｐｒｏｐａｇａｔｉｏｎ　ｏｆＡｓｐａｒａｇｕｓ　ｏｆｆｉｃｉｎａｌｉｓ￣Ｊ］．Ｂｅｉｊｉｎｇ　Ａｇ—　ｒｉｅｕｈｕｒａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，２００１（１）：２１—２２．　ＬＩ　Ｂ　Ｃ，ＷＯＬＹＮ　Ｄ　Ｊ．Ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ　ａｎｄ　ｇｅｎｏｔｙｐｅ　ａｆｆｅｃｔ　ａｓｐａｒａｇｕｓ　ｓｏｍａｔｉｃ　ｅｍｂｒｙｏｇｅｎｅｓｉｓ［Ｊ￣．Ｉｎ　Ｖｉｔｒｏ　Ｃｅｌｌｕｌａｒ　ａｎｄ　Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｌ　Ｂｉｏｌｏｇｙ　Ｐｌａｎｔ，１９９６，３２（３）：１３６—１３９．　江玲，管晓春．植物激素与不定根的形成［Ｊ］．生物学通报，２０００，３５（１１）：１７－１９．　Ｌ１　Ｌ，ＧＵＡＮ　Ｘ　Ｃ．Ｐｌａｎｔ　ｈｏｒｍｏｎｅｓ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｆｏｒｍａｔｉｏｎ　ｏｆ　ａｄｖｅｎｔｉｔｉｏｕｓ　ｒｏ０ｔｓ［Ｊ］．Ｂｕｌｌｅｔｉｎ　ｏｆ　Ｂｉｏｌｏｇｙ，２０００，３５（１１）：　１　７—１　９　１０８　华东师范大学学报（自然科学版）　２０１０拄　［５］　ＤＥ　ＫＬＥＲＫ　Ｇ　Ｊ，ＡＲＮＨＯＬＤＴ—ＳＣＨＭＩＴＴ　Ｂ，ＬＩＥＢＥＲＥＩ　Ｒ，ｅｔ　ａ１．Ｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｒｏｏｔｓ，ｓｈｏｏｔｓ　ａｎｄ　ｅｍｂｒｙｏｓ：　ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌ，ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ　ａｎｄ　ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　ａｓｐｅｃｔｓ［Ｊ］．Ｂｉｏｌｏｇｉａ　Ｐｌａｎｔａｒｕｍ，１９９７，３９（１）：５３—６６．　［６］　沈火林，赵娜，韩清霞，等．芦笋离体快速繁殖中嫩茎增殖培养对根分化的影响Ｉ－Ｊ］．华北农学报，２００６，２１（增　刊）：４６—４９．　ＳＨＥＮ　Ｈ　Ｌ，ＺＨＡＯ　Ｎ，ＨＡＮ　Ｑ　Ｘ，ｅｔ　ａ１．Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｓｔｅｍ－ｓｅｇｍｅｎｔ　ｉｎｃｒｅａｓｅｄ　ｃｕｌｔｕｒｅ　ｏｎ　ｒｏｏｔｉｎｇ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ　ｄｕｒ—　ｉｎｇ　ｑｕｉｃｋ　ｒｅｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ａｓｐａｒａｇｕｓ　ｉｎ　ｖｉｔｒｏ［Ｊ］．Ａｃｔａ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｅ　Ｂｏｒｅａｌｉ—Ｓｉｎｉｃａ，２００６，２１（ｓ１）：４６—４９．　［７］　徐化凌，陈纪香．耐盐芦笋的组培快繁技术研究［Ｊ］．北方园艺，２００９（２）：９２—９４．　ＸＵ　Ｈ　Ｌ，ＣＨＥＮ　Ｊ　Ｘ．Ｒｅｓｅａｒｃｈ　ｏｆ　ｑｕｉｃｋ　ｃｕｌｔｉｖａｔｅ　ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ　ｏｎ　ｓａｌｔ—ｔｏｌｅｒａｎｔ　Ａｓｐａｒａｇｕｓ　ｏｆｆｉｃｉｎａｌｌｓ［Ｊ］．Ｎｏｒｔｈｅｒｎ　Ｈｏｒｔｉｃｕｌｔｕｒｅ，２００９（２）：９２—９４．　［８］　李祖鑫，葛斌，王泽义，等．芦笋组织培养口］．江西农业大，１９９２（４）：３２９—３３２．　Ｌ１　ｚ　Ｘ，ＧＥ　Ｂ，ＷＡＮＧ　Ｚ　Ｙ，ｅｔ　ａ１．Ｔｉｓｓｕｅ　ｃｕｌｔｕｒｅ　ｏｆ　ａｓｐａｒａｇｕｓ（Ａｓｐａｒａｇｕｓ　ｏｆｆｉｃｉｎａｌｉｓ　Ｌ．）［Ｊ］．Ａｃｔａ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｅ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｉｓ　Ｊｉａｎｇｘｉｅｎｓｉｓ，１９９２（４）：３２９—３３２．　［９］　张元国，刁家连，李芳，等．紫芦笋茎尖组培快繁技术研究［Ｊ］．中国农学通报，２００４，２０（３）：１９０—１９２．　ＺＨＡＮＧ　Ｙ　Ｇ，ＤＩＡＯ　Ｊ　Ｌ，ＬＩ　Ｆ，ｅｔ　ｓ１．Ｓｔｕｄｙ　ｏｎ　ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ　ｆｏｒ　ｓｈｏｏｔ　ｔｉｐ　ｃｕｌｔｕｒｅ　ｏｆ　ｐｕｒｐｌｅ　ａｓｐａｒａｇｕｓ［Ｊ］．Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅ　Ｂｕｌｌｅｔｉｎ，２００４（０３）：１９０—１９２．　［１Ｏ］　赵洁，程井辰．生长调节物质对石刁柏愈伤组织诱导及根芽分化的影响［Ｊ］．植物生理学通讯，１９９１，２７（４）：２５３－　２５５．　．　ＺＨＡＯ　Ｊ，ＣＨＥＮＧ　Ｊ　Ｃ．Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｇｒｏｗｔｈ　ｒｅｇｕｌａｔｏｒｓ　ｏｎ　ｆｏｒｍａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｃａｌｌｕｓ，ｒｏｏｔｓ　ａｎｄ　ｂｕｄｓ　ｉｎ　Ａｓｐａｒａｇｕｓ　ｏｆｆｉｃｉｎａ—　ｌｉｓ［Ｊ］．Ｐｌａｎｔ　Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ　Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎ，１９９１，２７（４）：２５３—２５５．　［１１］　李代丽，康向阳．植物愈伤组织培养中内外源激素效应的研究现状与展望口］．生物技术通讯，２００７，１８（３）：５４６—　５４８．　ＬＩ　Ｄ　Ｌ．ＫＡＮＧ　Ｘ　Ｙ．Ｔｈｅ　ｓｔａｔｕｓ　ａｎｄ　ｐｒｏｓｐｅｃｔ　ｏｆ　ｅｘｏｇｅｎｏｕｓ　ｈｏｒｍｏｎｅ　ａｎｄ　ｅｎｄｏｇｅｎｏｕｓ　ｈｏｒｍｏｎｅ　ｉｍｐａｃｔ　ｉｎ　ｐｌａｎｔ　ｃａｌ－　ｌｕｓ　ｔｉｓｓｕｅ　ｃｕｌｔｕｒｅ［Ｊ］．Ｌｅｔｔｅｒｓ　Ｉｎ　Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，２００７，２８（３）：５４６—５４８．　［１２］　ＳＡＮＤＡＬ　Ｉ，ＫＵＭＡＲ　Ａ，ＢＨＡＴＴＡＣＨＡＲＹＡ　Ａ．Ｇｒａｄｕａｌ　ｄｅｐｌｅｔｉｏｎ　ｏｆ　２，４－Ｄ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｖｕｌｔｕｒｅ　ｍｅｄｉｕｍ　ｆｏｒ　ｉｎｄｉｒｅｃｔ　ｓｈｏｏｔ　ｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ　ｆｒｏｍ　ｌｅａｆ　ｅｘｐｌａｎｔｓ　ｏｆ　Ｃａｍｅｌｌｉａ　ｓｉｎｅｎｓｉｓ（Ｌ．）０．Ｋｕｍｔｚｅ［Ｊ］．Ｐｌａｎｔ　Ｇｒｏｗｔｈ　Ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ，２００５，　４７：１２１－１２７．　［１３］　陈婉芬，周燮．ＧＡ３及￥３３０７对石刁柏生根的影响口］．植物生理学通讯，１９９４，３０（１）；２６—２８．　ＣＨＥＮ　Ｗ　Ｆ，ＺＨＯＵ　Ｘ．Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ＧＡ３　ａｎｄ￥３３０７　ｏｎ　ｒｏｏｔ　ｆｏｒｍａｔｉｏｎ　ｉｎ　Ａｓｐａｒａｇｕｓ　ｏｆｆｉｃｉｎａｌｉｓ［Ｊ］．Ｐｌａｎｔ　Ｐｈｙｓｉｏｌｏ—　ｇＹ　Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｓ，１９９４，３０（１）：２６—２８．　Ｅ１４］　王金祥，严小龙，潘瑞炽．不定根形成与植物激素的关系［ｊ］．植物生理学通讯，２００５，４１（２）：１３３—１４２．　ｗＡＮＧ　Ｊ　ｘ，ＹＡＮ　Ｘ　Ｌ，ＰＡＮ　Ｒ　Ｚ．Ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ　ｂｅｔｗｅｅｎ　ａｄｖｅｎｔｉｔｉｏｕｓ　ｒｏｏｔ　ｆｏｒｍａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｐｌａｎｔ　ｈｏｒｍｏｎｅｓ［Ｊ］．　Ｐｌａｎｔ　Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ　Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｓ，２００５，４１（２）：１３３—１４２．　［１５］　董静，曹君迈，周根余，等．芦笋组培快繁技术优化的研究［Ｊ］．河南科技大学学报（自然科学版），２００８，２９（６）：　５７—５９．　ＤＯＮＧ　Ｊ，ＣＡＯ　Ｊ　Ｍ，ＺＨＯＵ　Ｇ　Ｙ，ｅｔ　ａ１．Ｍｅｄｉｕｍ　ｓｉｅｖｅ　ｏｆ　ａｓｐａｒａｇｕｓ　ｅｘｐｌａｎｔ　ｃｕｌｔｕｒｅ［Ｊ］．Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｈｅｎａｎ　Ｕｎｉｖｅｒ—　ｓｉｔｙ　ｏｆ　Ｓｃｉｅｎｃｅ　ａｎｄ　Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ（Ｎａｔｕｒａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅ），２００８，２９（６）：５７—５９．　［１６］　孔萌萌，周根余．芦笋组织培养生根技术［Ｊ］．上海师范大学学报（自然科学版），２００６，３５（２）：９１—９４．　ＫＯＮＧ　Ｍ　Ｍ，ＺＨＯＵ　Ｇ　Ｙ．Ｔｈｅ　ｒｏｏｔｉｎｇ　ｔｅｃｈｎｉｑｕｅ　ｏｆ　ａｓｐａｒａｇｕｓ　ｉｎ　ｖｉｔｒｏ［Ｊ］．Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｓｈａｎｇｈａｉ　Ｎｏｒｍａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　’　（Ｎａｔｕｒａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ），２００６，３５（０２）：９１—９４．　［１７］　冯晓棠，邢定一，王为民，等．芦笋组织培养生根技术研究［Ｊ］．中国蔬菜，１９９１，１４（２）：２０—２２．　ＦＥＮＧ　Ｘ　Ｔ．ＸＩＮＧ　Ｄ　Ｙ，ＷＡＮＧ　Ｗ　Ｍ，ｅｔ　ａ１．Ｔｈｅ　ｒｅｓｅａｒｃｈ　ｏｆ　ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ　ａｓｐａｒａｇｕｓ　ｒｏｏｔｉｎｇ　ｔｈｒｏｕｇｈ　ｔｉｓｓｕｅ　ｃｕｌｔｕｒｅ　［Ｊ］．Ｃｈｉｎａ　Ｖｅｇｅｔａｂｌｅｓ，１９９１，１４（２）：２０—２２．