影响凝血实验检测的因素分析

２０１　１年８月第９卷第２２期　・实验研究・２２５　（（２００５年版药典》栀子的含量测定，规定测定波长为２３８ｎｍ。　参考文献　３，３本试验结果表明，ＨＰＬＣ法测定肾炎灵片中栀子苷的含量，方法简　［１】国家药典委员会．中华人民共和国药典（一部）［Ｍ］．．北京：化学工　便、灵敏、重现性好，适宜生产中应用。　业出版社，２００５：１７３．　影响凝血实验检测的因素分析　杨秀娟　（河南省漯河市第六人民医院检验科，河南漯河４６２０００）　【摘要】目的探讨凝血试验检测的影响因素，以期提高检测结果的准确性　方法抽取河南省漯河市第六人民医院８０例体检者的血液标本，　分别置于３支试管中，分别在取血完毕，４ｈ、８ｈ、１２ｈ　２４ｈ分离血清，采用普利生Ｃ２０００－４血凝分析及配套试剂分别对在室温（２０￣２８’ｃ）　进行凝血试验，测得凝血酶原时间（ＰＴ）、活化部分凝血活酶时间（ＡＰＴＴ）、纤维蛋白原（ＦＩＢ）及凝血酶时问（ＴＴ），并将这３个时间段　测得的指标进行比较，结合相关文献及临床实际对凝血试验检测的影响因素进行分析。结果ＡＰＴＴ在４　ｈ内，ＰＴ在８　ｈ内测定的结果与　即刻测得的结果无明显差异（Ｐ＞Ｏ．０５）。而ＦＩＢ、ＴＴ在２４ｈ内检测结果无明显差异（尸＞Ｏ．０５）。结论凝血试验检测的影响因素有很多，　但时间是一个不可忽视的方面，标本需在４ｈ内完成检测，以确保检测结果的准确性。　【关键词】凝血试验；影响因素；时间　中图分类号：Ｒ４４６．１１　文献标识码：Ｂ　文章编号：１６７１—８１９４（２０１１）２２—０２２５—０２　凝血实验在急救和抗凝、溶栓治疗及手术前检测等方面具有重要　表１标本放置时间对凝血试验的影响　的临床意义，已越来越引起临床医师的高度重视。而检验的结果直接　影响临床工作者的准确诊断，从而影响治疗效果，甚至危及患者生　命，因此其结果的准确性、精密度也就显得尤为重要。下面本文就影　响血凝试验结果的相关因素作如下分析。　１资料与方法　１．１一般资料　异。本文研究结果表明，ＡＰＴＴ在４　ｈ内，ＰＴ在８　ｈ内测定的结果与即刻　抽取河南省漯河市第六人民医院２０１０年至７月的８Ｏ例患者，其中　测得的结果无明显差异（尸＞０．０５）。而ＦＩＢ、ＴＴ在２４　ｈ内检测结果无　男性４８例，女性３２例，年龄２３￣６２岁，平均年龄（４３．８±５．６）岁，均　明显差异（Ｐ＞０．０５）。　为在河南省漯河市第六人民医院进行体检的健康患者。于早晨抽取空　２．２标本因素　腹静脉血。　２．２．１标本的采集与制备　１．２方法　采血前患者应处于放松、平静、空腹的状态，情绪紧张、激烈运　嘱体检者于抽血前１天晚饭后，禁食、禁水，与次日清晨７点时，　动、饱食油腻会引起凝血因子、血小板和纤溶成分的激活。采血人员　用１０９ｍｍｏｌ／Ｌ枸橼酸钠真空采血管采集两管空腹静脉血，标明时间，　应熟练做到穿刺“一针见血　，以防组织损伤，外源性凝血因子进入　室温２４－２６￣２条件下，用离心机以３５００ｒ／ａｒｉｎ离　Ｃ，１０　ｍｉｎ分离血清。用　试管从而影响实验结果　Ｊ。　配套定值质量控制品在全自动血凝分析仪上进行检测确认无误后，。　２，２．２抗凝剂的选择　仪器采用ＰＬＳ　Ｃ２０００－４血凝仪型号，质控血清及校准品严格按照说明　试管中的抗凝剂过少，从正在输液的静脉导管中抽血造成抗凝剂　书的要求进行，于取血完毕，４ｈ，８ｈ，１２ｈ，２４ｈ分别对各标本进行凝　浓度降低，误用同种但不同浓度的抗凝剂，注入血液标本量过多，抗　血项目测定（室温２４￣２６￣３），做好记录，然后将各标本加盖后放置　凝标本误用普通干燥试管Ⅲ，都会造成血液的凝固。　４℃冰箱储存。　２．３仪器与试剂　１，３统计学处理　目前，实验室所使用血凝仪的型号及检测方法多种多样．使用前　用ＳＰＳＳ１３．Ｏ统计软件，记数资料采用结果以（叉±ｓ）表示，啦验做　应仔细阅读仪器说明书，参加仪器操作培训。使用中定期保养维护仪　组间比较，卡方检验做计数资料比较，以尸＜Ｏ．０５为差异有统计学意义。　器、做好室内和室问质控，确保仪器始终处于良好运行状态。试剂最　２结果　好选用与仪器相匹配的试剂，严格按照试剂说明书进行试剂配置，　ＡＰＴＴ在４　ｈ内，ＰＴ在８　ｈ内测定的结果与即刻测得的结果无明显　干粉试剂要用无菌蒸馏水或配套缓冲液溶解，轻轻混匀，室温放置　差异（Ｐ＞Ｏ．０５）。而ＦＩＢ、ＴＴ在２４ｈ内检测结果无明显差异（Ｐ＞　５－１０ｒａｉｎ后上机使用。试剂应根据每天标本量的多少现用现配。　Ｏ．０５）。具体结果见表Ｉ。　２．４操作人员因素　２．Ｉ凝血试验检测的影响因素　操作人员是影响试验结果好坏的重要因素之一。在进行抽血时嘱　２．１．１时间因素　患者处于平静、安静状态，避免情绪激动、剧烈运动，②选择一次性　目前，国内文献报道有关标本室温存放时间对ＰＴ、ＡＰＴＴ、ＴＴ　器具采血，避免或减少凝血系统活化；③正确选择较粗静脉取血，止　测定结果的影响，研究结果为稳定时间２￣２４　ｈ不等，存在一定的差　血带不可过紧，束臂不超过１　ｍｉｎ，禁止用力拍打拟穿刺部位，④抽血　２２６・实验研究・　速度应均匀，防止过快或过慢　］。因此，操作者必须具备较好的专业　理论基础，熟练的操作技术以及认真负责的态度。仔细核对每一份标　本，对不合格标本应弃之重抽。在操作过程中，严格按照操作规程执　行每一个步骤，使操作中的误差降到最小。对异常结果要及时与临床　沟通，查找原因。　３讨论　Ａｕｇｕｓｔ　２０１　１，Ｖｏ１．９，Ｎｏ．２２　大多数标本可放置２４ｈ，但对于凝血检测标本应４ｈ内完成，对于工作量　大的实验室应先测定不宜长时间放置的标本，而不能及时测定的项目应　把血浆分离出来后放置４℃冰箱保存。实验室人员不仅要知道对标本放　置时间的要求，在各个环节上把好关、注好意，做好全面质量控制，而　且还要知道其结果的变化趋势，才能更好的服务于患者和临床。　参考文献　［１］刘波，方国安，金秀国，等．ＰＴ测定中不同对照血浆和试剂对ＩＮＲ　结果的影响［Ｊ］．临床检验杂志，１９９９，１７（５）：３０４．　【２］边红放，王晓青．凝血四项检测过程中应注意的问题［Ｊ］．实用医　技杂志，２００７，１２（１４）：１６５３－１６５４，　凝血实验已广泛应用到血栓与止血性疾病的诊断、治疗疗效的观察　及患者术前、术中出血倾向的监测等诸多方面。其实验结果的准确性显　得至关重要。近年临床关于检验的标准化被越来越重视。对于检验的流　程更加的明细化、安全化和准确化，但是在医护人员的标本采集过程中　常常出现影响检测结果的现象，影响凝血实验结果的因素还很多，但总　结起来有时间因素、标本因素、操作人员因素几个方面，虽然生化室的　［３］高清萍，陈芳．静脉采血对检验结果的意义［Ｊ］．中国现代实用医　学杂志，２００４，１６（３）：５３．　４种医院制剂微生物限度检查方法验证　宾驰　颜栋林　（１浦北县人民医院，广西浦北５３５３００；２广西南宁食品药品检验所，广西南宁５３０００１）　【摘要】目的建立４种医院制剂的微生物限度检查方法。方法按常规法、培养基稀释法、薄膜过滤法的顺序逐步分析制剂抑茵活性，根　据抑茵活性强弱选择适当的检查方法，进行５种菌株的回收率实验和４种控制茵检验方法验证。结果供试品５种试验茵回收率均高于　７０％，控制茵均能正常检出。结论医院制剂必须按２００５年版中国药典微生物限度检查法要求，通过方法验证实验建立合理的检验方法，　以保证检验结果的正确性。　【关键词】医院制荆；微生物限度；方法验证；回收率　中图分类号：Ｒ３７２　文献标识码：Ｂ　文章编号：Ｉ６７１－８１９４（２０１１）２２－０２２６－０２　药品微生物限度检查是控制医院制剂质量的一项重指标，为了保　证测定方法的可靠性，必须按照中国药典２００５年版的规定Ⅲ进行方法　验证。本文根据制剂抑菌活性的强弱和对不同菌种抑菌程度的大小　采用适当的检查方法，加入５种污染菌：大肠埃希菌、金黄色葡萄球　ａｌｂｉｃａｎｓ）［ＣＭＣＣ（Ｆ）９８００１］、黑曲霉（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ　ｎｉｇｅｒ）【ＣＭＣＣ　（Ｆ）９８００３］，铜绿假单胞菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ　ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）【ＣＭＣＣ（Ｂ）　１０１０４］、沙门菌（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ　ｐａｒａｔｙｐｈｉ　Ｂ）【ＣＭＣＣ（Ｂ）５００９４】，由广　西食品药品检验所提供。　２方法与结果　２．１菌液制备　大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、沙门菌、铜绿假　单胞菌取经３５＂Ｃ培养１８￣２４ｈ的营养肉汤培养物，白色念珠菌取经２５￣Ｃ　培养２４－４８ｈ的改良马丁液体培养物，黑曲霉取经２５℃培养１周的改良　马丁琼脂斜面培养物￣Ｉ１０ｍＬ　Ｏ．９％无菌氯化钠溶液洗下霉菌孢子所得　菌液，用０．９％无菌氯化钠溶液制备成每ｌｍＬ含菌数为５０－１００ｅｆｕ的菌悬　液，备用。　２．２供试液的制备　液体制剂取原液或固体制剂取供试品ｌＯｇ，￣ＵｐＨ７．０无菌氯化钠一　菌、枯草芽孢杆菌、白色念珠菌、黑曲霉菌于４种制剂中，对各试验　菌的回收率进行验证，并以加入４种污染菌：大肠埃希菌、金黄色葡　萄球菌、铜绿假单细胞、沙门菌进行检出实验，从而建立４种医院制　剂的微生物限度检查方法。　１材１．１样料　品　①外用跌打酒（批号：０７１１２８，０７１２０２，０７１２１０）、　（２）跌打　洗液（批号：０７１１３０，０７１２０１，０７１２０２）、③胆贝蜜汁Ｅｌ服（批号：　０７１２０１，０７１２０４，０７１２０７）、④解毒抗白颗粒（批号：０８１００１，　０８１００２，０８１００３），均由南宁市中医院提供。　１．２培养基　蛋白胨缓冲液至１００ｍＬ，摇匀，成１：１０均匀混悬液作为供试液。常规　法：取供试液ｌｍＬ注皿。　培养基稀释法：　（１）取供试液ｌｍＬ注入２个平皿（Ｏ．５ｍＬ／￣）　（２）取供试液ｌｍＬ注入５个平皿（０．２ｍＬ／ｌ￣）　营养琼脂培养基，玫瑰红钠琼脂培养基，营养肉汤培养基，胆盐　乳糖培养基（ＢＬ），改良马丁培养基，改良马丁琼脂培养基，ＭＵＧ　培养基，曙红亚甲蓝琼脂培养基，甘露醇氯化钠琼脂培养基，溴化　十六烷三甲胺琼脂培养基、四硫磺酸钠亮绿培养基，沙门、志贺菌属　培养基，由广西食品药品检验所提供。　１．３试验菌株　枯草芽孢杆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ　ｓｕｂｔｉｌｉｓ）［ＣＭＣＣ（Ｂ）６３５０１］、金黄色　葡萄球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ　ａｕｒｅｕｓ）【ＣＭＣＣ（Ｂ）２６００３］、大肠埃希　薄膜过滤法：取供试液ｌｍＬ，采用薄膜过滤法，依法检查，以　０．１％蛋白胨水为冲洗液。　２．３回收率测定　试验组：取供试品原液（或１：１０）ｌｍＬ注入平皿，每个平皿分别　加入上述备用的试验菌５０－１００ＣＦＵ，立即倾注琼脂培养基，每株试验　菌平行制备２个平皿，待凝固后，置规定温度，细菌培养２４￣４８ｈ，白　菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ　ｃｏｌｉ）［ＣＭＣＣ（Ｂ）４４１０２］、白色念珠菌（Ｃａｎｄｉｄａ