药品GMP检查指南生物制品

[检查要点]

药品生产和质量管理的组织机构对做好药品生产全过程监控至关重要；适当的组织机构及人员配备是保证药品质量的关键因素；人员的职责必需以文件形式明确规定；培训是实施药品GMP工作中的重要环节。

0402 生物制品生产企业生产和质量管理负责人是否具有相应得专业知识（细菌学、病毒

学、生物学、分子生物学、生物化学、免疫学、医学、药学等），并具有丰富的实践经验以确保在其生产、质量管理中履行其职责。

1．主管生物制品生产企业的生产和质量管理的企业负责人应具备医药及生物学等方面的专业知识和实践经验才能确保其在生产、质量管理中履行职责。

生物制品是药品的一大类别。生物制品是应用普通的或以基因工程

（Genetic Engineering）、细胞工程（Cell Engineering）、蛋白质工程（Protein Engineering）、发酵工程（Fermentation Engineering）等生物技术获得的微生物（细菌、噬菌体、立克次体、病毒、寄生虫等）、细胞及各种动物和人源的组织和体液等生物材料制备，其制备过程是生物学过程和无菌操作过程，并用于预防、治疗、诊断疾病的药品。我国目前生产和使用的生物制品有200多种，各生物制品生产企业所生产的品种各不相同，基于生物制品起始原辅材料、生产制备过程及质量控制等的固有特性，细菌类或病毒类疫苗（包括毒素、类菌素、抗毒素及抗血清等）生产企业的生产和质量管理负责人应具备细菌学或病毒学、生物化学、分子生物学、免疫学、流行病学等方面的专业知识；细胞因

子及其他活性生物制剂生产企业，应具备生物化学、免疫学、分子生物等方面的专业知识；DNA产品生产企业，应具备现代生物技术、分子生物学、遗传学、免疫学等方面的专业知识；体内及体外诊断试剂生产企业应具备生物学、免疫学、生物化学等方面的专业知识；血液制品生产企业，应具备生物化学、分析生物学、病毒学等方面的专业知识。

2．本项规定应具备的相应专业知识，也不可机械地局限到一个人所学的具体专业学科。

例如：医学、药学、生物学专业的，通过学习和培训可以过得和掌握分子

生物学、细菌学、病毒学、免疫学等方面的专业知识和实践经验；化学或其他学科专业的通过学习和培训同样可以获得和掌握生物学、分子生物学和微生物学等专业知识和实践经验。实践经验的多与少，也不能仅看从事工作的年限，关键在于学习和掌握的程度，学以致用，学习和掌握了相应专业知识是手段 ，最终目的是运用学习和掌握i的专业知识和实践经验，确保在生产、质量管理 中发现问题和解军问题。

0702 从事生产制品制造的全体人员（包括清洁人员、维修人员）是否根据其生产的制品

和所从事的生产操作进行专业（卫生学、微生物学等）和安全防护培训。

1．生物制品生产企业人员均进行专业培训。

“全体人员” 不仅包括所有从事制品生产和质量检验操作的生产、质量检验

人员，也包括进入车间和在实验室从事清洁及维修工作的所有清洁、维修人员和其他辅助人员，还包括进入车间和实验室调查、监督及处理问题的企业领导及其相应部门管理人员，以上人员都必须接受培训，了解和熟悉该企业所生产制品的

基本特性和注意事项。

2．“全体人员”，除进行专业培训外，还必须进行安全防护培训。

有些生物制品是采用天然的或人工改造的微生物（包括细菌、病毒等）或

动物及人源组织、体液为起始材料，这些生物活性材料，如不按规定进行特定操作和处理，对接触者有一定的感染危险性，甚至危及其生命健康，还可能污染环境，严重的可造成重大的灾难性事故。因此，对生物制品生产企业“全体人员”，特别是进入省查车间，有可能接触感染材料的人员，必须进行相应生物安全防护教育和培训，务必使进入生产车间或检验室的所有人员，了解什么地方有感染危险存在、接触后如何消毒处理、如何处理突发事故（如：感染行为、生物倾斜、接触人体、溅入眼内等），以确保生产和人员安全。

二．厂房与设施

[检查要点]

药品生产的厂房与设施是实施药品GMP的先决条件，其设计布局和建造应能有效避免交叉污染和差错事故，便于清洁及日常维护。

*2201 生产用菌毒种与非生产用菌毒种、生产用细胞与非生产用细胞、强毒与弱毒、死毒

与活毒、脱毒前与脱毒后的制品和活疫苗与灭活疫苗、人血液制品、预防制品等加工或灌装是否同时在同一生产厂房内进行。

本项所举的生物制品生产中涉及到的专业术语均有特定含义，而且又是关系到

高危致病因子的安全生产和防护的重大问题，必须明确该项规定的具体要求：

1．凡用于疫苗、毒素、类毒素、抗毒素、抗血清、DNA重组产品等生产用菌种、毒种、工程菌种、细胞、工程细胞均为生产用菌、毒种和细胞。生产用菌、毒种和细胞须经国家药品监督管理部门批准，除此之外的其他菌、毒种及细胞，均为非生产用菌、毒种及细胞。

为了确保生产的安全、有效，只有经检定符合要求并经国家药品监督管理

部门批准的上述生产用菌、毒种及细胞才能进入生产车间，其他非生产用菌、毒种及细胞一律不得进入生产车间。

2．如该疫苗生产车间或重组产品生产车间，需交替生产不同制品，必须进行有效清洁、消毒和验证后，后一种制品生产用的菌种或毒种或生产用细胞才能进入车间。

3．强毒细菌及病毒株与弱毒细菌及病毒株，决不允许混放在一起，亦不允许同时在同一实验室内进行检定实验，更不允许在同一生产车间内进行强毒和弱毒的疫苗生产制备。

强毒与弱毒是指用于生产的细菌或病毒株，为毒力和致病力截然不同的两类菌、毒株。例如：用于生产乙型脑炎灭活疫苗是采用从自然界分离的毒力强、能使人致病、抗原性好的乙型脑炎病毒株制备，经甲醛或其他灭活剂杀死活病毒制成灭活疫苗。一般生产灭活疫苗所用毒力强的菌株及病毒株为强毒株（Strong Toxixity Strain）。乙型脑炎减毒活疫苗，是采用人工减毒，并证明其残留致病力很低，毒力稳定并保留自然相应免疫原性的乙型脑炎减毒疫苗株来制备生产疫苗。一般生产减毒活疫苗所用毒力弱的菌株及病毒株为弱毒株或减毒株（Attenuated Strain）。

4．疫苗生产的活生物体阶段与灭活后死生物体阶段的生产操作区在车间布局时必须

严格分开，决不允许在同一生产区域既生产“活毒”，又生产“死毒”。

死毒与活毒是指用强毒的细菌或病毒株制备灭活疫苗的两个生产阶段。灭活疫苗生产时，第一阶段是采用从自然界分离的毒力强、抗原性好的强毒细菌菌株或病毒株进行大规模培养制备。制备出的细菌原液或病毒原液以及使用过 的培养设备和器材含有大量的活细菌或活病毒体，称之为“活毒”( Live Microorganism)，这些活培养物具有致病性，必须在规定的相互独立的洁净区生产区进行制备。在第二阶段，细菌原液或病毒原液收获后加入一定量甲醛或其他适宜灭活剂，在规定温度和时间内将活细菌或活病毒全部杀死，变成对人体安全、不含活生物体的死菌液或死病毒液，称之为“死毒”（Inactive Microorganism）。

5．类毒素生产的有毒活素性阶段与脱毒后脱去毒素性阶段的两个生产操作区域在车间布局及空调净化系统等方面都是必须严格分开的，不允许在同一生产区域，既生产脱毒前制品，又生产脱毒后制品。

脱毒前和脱毒后是指类毒素的不同生产阶段。第一阶段，将产毒素菌株（如破伤风梭菌、白喉杆菌等）在其适宜条件下进行繁殖培养，使其生产出大量外毒素。毒素对人体是有致病性的，这一生产阶段称之为“脱毒前”。毒素经加入一定量甲醛或其他适宜脱毒剂，在规定温度和时间内，将毒素脱去毒性，变成为类毒素，类毒素失去罗勒毒素的致病性，但保存相应抗原性和免疫原性。对人体安全的类毒素称之为“脱毒后”。

6．血液制品生产车间与疫苗、抗血清制品不能共用，其生产厂房必须为独立的建筑物。

血液制品（Blood Products）是由健康人血浆或特异免疫人血浆分离、提

* 2202 取得血浆蛋白组分或血细胞组分制品，有人血白蛋白、人血免疫球蛋白、人凝血因子（天然或重组的）、红细胞浓缩物等。由于血液制品使用人血浆作原料，可能存在经血液传播疾病的潜在危险性，从而影响其他产品，反之，其他各类制品也可能对血液制品有用现行的检验方法无法鉴别或检出的潜在影响。

生产用菌毒种与非生产用菌毒种、生产用细胞与非生产用细胞、强毒与弱毒、死毒与

或毒、脱毒前与脱毒后的制品和活疫苗与灭活疫苗、人血液制品、预防制品等贮存是否严格分开。

[解释说明]

因为生物制品是采用天然或基因工程等人工改造手段而获得的微生物细胞及

各种动物和人源组织、液体为原材料制备的，这些材料与无机物不一样，都是生物活性物质，其成分含有丰富的蛋白质、酶、血浆等营养物质，因此菌种一般在2~8摄氏度保存；不同病毒的菌种，有的可在-40摄氏度~ -70摄氏度保存，有的要在液氮存放；细胞要冻于-130摄氏度以下；血液制品的原料血浆需在-20摄氏度以下冰冻保存等等。不同生物制品的中间体（包括原液及半成品），血液制品的不同组成都分别规定有其适宜存放温度。生物制品的成品只有存放于上述规定的温度下才能保持其固有生物活性，才能避免污染。

在生物制品生产过程中，除细菌、病毒和细胞培养一般需要在35~37摄氏度外，

其余操作制备过程，各种制品还有各自规定的最适的温度。血浆的分离提取要在低温乙醇反应罐内进行，细菌及病毒疫苗的纯化宜在2~8摄氏度进行，重组产品的过滤、纯化、提取应在2~8 摄氏度冷柜内进行。

1．为确保生物制品生产的安全有效性，避免造成差错或重大事故，要求以下各项贮

* 2203 1存要严格分开，不允许混合贮存。

1.1 生产用菌、毒种、与非生产用菌、毒种；

1.2 生产用细胞与非生产用细胞；

1.3 强毒与弱毒的菌、毒种；

1.4 死毒与活毒的细菌原液和病毒原液；

1.5 脱毒前与脱毒后的制品；

1.6 减毒活疫苗与灭活疫苗；

1.7 预防用生物制品、基因重组制品的种子三级批；

1.8 原液、半成品和成品

2．血液制品各工序中间品要专库保存。

不同种类的活疫苗的处理，灌装是否彼此分开。

．不同种类的细菌活疫苗和不同种类的病毒活疫苗，不允许同时在同一生产车间进

行生产。

无论是细菌类减毒活疫苗（如：卡介苗、鼠疫活疫苗、炭疽活疫苗等），还

是病毒类减毒活疫苗（如：麻疹活疫苗、脊髓灰质炎活疫苗、风疹活疫苗等），在 生产制备全过程中（生产用菌种或毒种启开------复苏-------扩增培养-------发酵罐培养或转瓶培养------菌液或病毒液收集------细菌原液或病毒原液配制-------贮存------灌封------真空冷冻干燥等）都是处于活生物体状

态（即都含有大量的活细菌或病毒），并且这些活疫苗在规模化生产制备过程中，所生产出的减毒活细菌数量或病毒数量是极其巨大的，因此，不允许同时在同一生产车间进行生产。

2．有些活疫苗所采用的生产用菌、毒种的生物学特性相接近，且其生产工艺及所用培养基或细胞基质相接近（例如麻疹、风疹、腮腺炎疫苗），需要在同一车间进行交替生产时，必须在一种活疫苗生产、灌封完成后，进行有效的消毒和清洁，清洁消毒效果经验证证明是彻底的、可靠的，然后才能在该生产车间进行后一种活疫苗的处理。

3．本项中所说“活疫苗处理”的“处理”，是指各种类减毒活疫苗、菌苗的生产制

备全过程。

*2004 强毒微生物操作区是否与相邻区域保持相对负压，是否有独立的空气净化系统，

排出的空气是否循环使用。

1．“强毒微生物”是指在我国卫生部颁布的《中国医学微生物菌种保藏管理办法》

中规定的“一类、二类”菌种和毒种。

菌种分类是根据其危害性决定（包括实验室感染和感染后发病的可能性、

症状轻重及愈后情况、有无致命危险及有效的防止实验室感染方法、用一般的微生物操作坊法能否防止实验室感染、我国有否此种及曾否引起流行和人群免疫力等情况）。依其危险程度的大小，我国的菌种分为四类。

（1） 一类：实验室感染机会多，感染后发病的可能性大，症状重并能危及生命，缺

乏有效的预防方法，传染性强，对人群危害性大的烈性传染病，包括国内未发

现或虽已发现，但无有效防治方法的烈性传染病。如：鼠疫耶尔森氏菌，霍乱弧菌（包括EI-tor弧菌）；天花病毒、黄热病毒（野毒株）、新疆出血热（克里米亚刚果出血热）病毒、东、西方马脑炎病毒、委内瑞拉马脑炎病毒、拉沙热（Lassa）病毒、马堡（Marburg）病毒、埃波拉（Ebola）病毒、猴疱疹病毒（猴B病毒）；粗球孢子菌、 荚膜组织胞浆菌、杜波氏组织胞浆菌。

（2） 二类：实验室感染的机会较多，感染后症状较重及危及生命，发病后不易治疗

及对人群危害较大的传染病毒种。如：土拉弗朗西丝氏菌、布氏菌、炭？芽胞菌、肉毒梭菌、鼻疽假单胞菌、类鼻疽假单胞菌、麻风分枝杆菌、结核分枝杆菌；狂犬病病毒（街菌），森林脑炎病毒，流行性出血热病毒，国内尚未发现病人，在国外引起脑脊髓炎及出血热的俄其他虫媒体病毒，登革热病毒，甲、乙型肝炎病毒；各种立克次体（包括斑疹伤寒、Q热）；鹦鹉热、鸟疫衣原体、淋巴肉芽肿衣原体；马纳青霉菌、北美芽生菌、副球孢子菌、新型隐球菌、巴西芽生菌、烟曲霉，着色霉菌。

（3） 三类：仅具一般性危险，能引起实验室感染机会较少，一般的俄微生物实验室

采用一般实验技术能控制感染或有对之有效的免疫预防方法的菌种。如：脑膜炎奈瑟氏菌、肺炎链球菌、葡萄状球菌、链球菌、淋病奈瑟氏菌及其他致病性奈瑟氏菌，百日咳博特氏菌、白喉棒杆菌及其他致病性棒杆菌、流感嗜血杆菌、沙门氏菌，志贺氏菌、致病性大肠埃希氏菌、小肠结肠炎耶尔森氏菌、空肠弯曲菌、副溶血性弧菌、变形杆菌，李斯特氏菌、铜绿色绿脓假单胞菌气肿疽梭菌、生产荚膜梭菌、破伤风梭菌及其他致病梭菌；钩瑞螺旋体、梅毒螺旋体，雅司螺旋体；乙型脑炎病毒、脑心肌炎病毒、淋巴细胞性脉络丛脑膜炎病毒以及未列入一、二类的其他虫媒病毒、辛德毕斯（Sindbis）病毒、滤泡性口炎

病毒、流感病毒、副流感病毒、呼吸道合胞病毒、腮腺炎病毒、麻疹病毒、脊髓灰质炎病毒、腺病毒、柯萨基（A及B组）病毒、艾柯（ECHO）病毒及其他肠道病毒、疱疹类病毒（包括单纯疱疹、巨细胞、EB病毒、水痘病毒）、狂犬病固定毒、风疹病毒；致病性支原体；黄曲毒，杂色曲毒，梨孢镰刀菌、蛙类霉毒、放线菌属、奴卡氏菌属、石膏样毛癣菌（粉型）、孢子丝菌。

（4） 四类：生物制品、菌苗、疫苗生产用各种减毒、弱毒菌种及不属于上述一、二、

三类的各种低致病性的微生物菌种。

（5） 对通过分子生物学方法生产的新菌株，应按其原始亲本中的最高类别对待。

（6） 不允许进行两个菌株完整基因组的重组试验。

2． 第一类和二类“强毒微生物”，实验室感染机会多，感染后发病的可能性大

症状重，并可能危及生命名，是对人群危害性较大的传染病的菌、毒种。为确保“强毒微生物”操作区操作的活生物体不向外扩散逃逸，在建造“强毒微生物”操作间或生产制备间时，必须设置气闸和缓冲区，与其相邻区域保持相对负压，并建立处理突发事故的相应规程和有效措施。

（1）该操作实验室可与其他用途房屋设在一栋建筑物中，但必须自成一区；该区

通过适当措施与公共走廊或公共部分隔离。

（2）进入生物安全防护实验室，必须通过缓冲通道，通道设两道连锁门，在缓冲

间进行更衣。

（3）生产一类及二类强毒的操作间安装II级或II级以上生物安全柜，一类及二

类强毒微生物操作在上午安全柜内进行。

（4）操作区应设有高压灭菌锅或化学清洁装置等对废弃物进行原位清毒处理。

* 2205 （5）如需送至生物安全防护区外进行焚烧的污物和废弃物须放置于密封袋，并装

入密闭容器内直接送至焚烧炉内焚烧。

（6）相对实验操作间外部，操作间内部保持负压，相对压强以-30Pa~-40Pa为宜，

缓冲间相对压强以-15Pa~-20Pa为宜。

（7）生物安全防护操作区的通风空调系统应为直排系统，不得采用部分回风循

环系统。

（8）为确保操作区的气流由“清洁”区域流向“污染”区域，不应采用上送上

排的通风设计。

（9）操作区送风应经过初、中、高三级过滤。

（10）操作区的排风必须经过高效过滤和经验证的灭活方法进行处理，如火焰灭

活或消毒剂灭活，以不低于12m/s的速度直接向空气中排放。

（11）生物安全柜排出的经内部高效过滤或灭活处理的空气可通过系统排风管直

接排至大气中。

（12）生物制品生产过程忠的生物安全防护应按照“微生物和生物医学实验室生

物安全通用准则”办理。

芽胞菌制品操作区是否与相邻区域保持相对负压，是否有独立的空气净化系统，

排出的空气是否循环使用，芽胞菌制品的操作直至灭活过程完成之前使用专用设备。

1．有些细菌在一定条件下变成圆形或卵圆形的小体，称之为芽胞。

医学研究发现，某些需氧芽（如炭疽氧孢菌）和厌芽胞菌。（如肉毒酸

菌、破伤风梭菌等厌芽胞菌），在对其生长繁殖不利条件下，诸如营养物质缺乏，特别是氮源或碳源营养物质都缺乏，代谢产物逐渐增加，译码繁殖体的基因组受到抑制，而译码芽胞有关成分的基因组则被激活，致使原来的杆菌或梭状菌体变成圆形或卵圆形小体，称为芽胞。芽胞携有完整的核质、酶系统及合成菌体成分的各种结构，并保存细菌的全部生命必需物质，在适宜条件下可以发芽又形成细菌的繁殖体。芽胞菌在对其不利生存条件下形成芽胞，而使芽胞菌生存下来的这种固有特性是其他细菌所没有的。细菌的芽胞（Gemma Bacteria）是微生物中对外周环境抵抗力最强的生命单元，芽胞在自然界可存活数十年之久，一般细菌在70~80摄氏度热水中迅速死亡，而芽胞菌在100摄氏度可以耐受2小时以上；在70%乙醇中可存活20年；低温核干燥对芽胞菌几乎无任何影响。高压蒸汽灭菌和焚烧是杀死细菌芽胞的最有效手段。

2． 由于芽胞菌对温度、湿度、紫外线、化学消毒剂具有很强的抵抗力，一般通

用的消毒灭菌方法不能将其杀死，因此，只有在专用生产车间或实验室对其进行操作处理，使用专用设备和专用器具、物料，除此之外，没有其他切实可行的办法。

（1）生产炭疽杆菌、破伤风梭菌、肉毒梭菌等芽胞菌的建筑物须与其他生物制品生

产厂房分开。

（2）芽胞菌操作区与相邻区域保持相对负压。

（3）芽胞菌操作区须有独立空气净化系统，不得采用部分回风循环空气净化系统。

（4）芽胞菌制品的操作直至灭活完成之前必须使用专用设备。

（5）芽胞菌制品生产操作中需重复使用的物料和用具必须与其他制品生产所用的物

*2206 1 2 3*2207 1 料分开。

（6）芽胞菌菌种保存和处理须有安全防护措施和操作规程等。

各类生物制品生产过程中涉及高危致病因子的操作，其空气净化系统等设施是否符

合特殊要求。

．本项中“各类生物制品生产过程中涉及高危致病因子的操作”的“高危致病

因子”是指本《检察指南》的2204项第一款，按“中国医学微生物菌种保藏管理办法”所规定的第一类和第二类细菌和病毒。

．生物制品生产过程中涉及高危致病因子的操作，其空气净化系统、人流、物

流应全部分开。

．“其空气净化系统等设施的特殊要求”，详见本《检查指南》的2204项第2款

所述的要求。

生物制品生产过程中使用某些特定活生物体阶段的设备是否专用是否在隔离或封

闭系统内进行。

．“某些特定活生物体”是指

1）可能有病原微生物的动物脏器组织；

（ （2）《中国医学微生物菌种保藏管理办法》中所规定的第一类和第二类强毒细菌和病

毒；

（3）《中国医学微生物菌种保藏管理办法》中所规定的第一类和第二类强毒细菌和病

毒的培养物；

2．对于上述活生物体：

（１）培养和操作所用培养设备及盛装容器和离心、粉碎、过滤及纯化等设备须专用；

（２）生产操作间的建造及设施，空气净化系统须符合２２０４项第２款的要求。

只有这样，才能确保这些强毒细菌和病毒活生物体，只局限于规定的隔离

或封闭系统内，不致扩散或逃逸出来。

*2208 卡介苗生产厂房和结核菌素生产厂房是否与其他食品生产厂房严格分开，卡介苗生

产设备要专用

卡介苗（Bacillus Calmette & Guerin, BCG）是采用减毒的卡介菌制备的减

毒活疫苗，是给广大婴幼儿皮内注射接种的4种EPI制品之一，以预防结核菌感染。

1．卡介苗生产需独立建筑物和厂房。

2．卡介苗生产厂房必须与结核菌类制品生产车间严格分开。

3．卡介苗、结核菌类制品生产厂房要与其他制品生产厂房分开。

4．卡介苗、结核菌素的生产设备要专用。

*2209 炭疽杆菌、肉毒梭状芽胞杆菌和破伤风梭状芽胞杆菌制品是否在相应专用设施内生

产。

1．本《检查指南》2205项中已陈述：炭疽杆菌、肉毒梭状芽胞杆菌和破伤风梭

状芽胞杆菌等在一定条件能形成芽胞，芽胞对外界环境抵抗力极强，用一般常规清洁消毒方法不能将其杀灭，因此，生产炭疽、肉毒及破伤风芽胞菌制品必须在其专用生产厂房内进行。

2．生产炭疽、肉毒及破伤风芽胞菌制品的生产设备亦必须专用。

*2210 设备专用于生产孢子形成体，当加工处理一种制品时是否集中生产，某一设施或

一套设施中分期轮换芽胞菌制品时，在规定时间内是否只生产一种制品。

基于炭疽等芽胞菌的特性（见2205项）

1．凡芽胞菌生产均须使用专用设备。

2．芽胞菌生产车间只能专用，其他制品不能也不允许利用芽胞菌生产车间来进行生产。

3．因为目前对芽胞菌灭菌最有效的方法是高压蒸汽灭菌，对生产车间和专用设备的彻底灭菌十分困难。因此，芽胞菌类制品生产最好安排在一定时间内集中生产。

4．如要在芽胞菌生产车间分期轮换生产下一个芽胞菌制品，必须对生产车间所用专用设备和器材进行彻底高压蒸汽灭菌，必要时应对芽胞菌进行间歇灭菌（即第一次灭菌处理后，将消毒品放置37摄氏度孵放一定时间，使芽胞体繁育成繁殖体，再进行第二次高压蒸汽灭菌），这样才能将全部芽胞体杀死。

5．高压蒸汽消毒灭菌和间歇灭菌法均进行验证。

*2211 生物制品生产的厂房与设施是否对原材料、中间体和成品存在潜在污染。

1． 所有用于生产的设备，包括蒸汽灭菌柜、干烤箱、空气过滤系统、水处理

系统、除菌过滤及超滤设备、洗瓶及灌封系统、冻干机等均应定期进行维修、保养和验证。这些维修和验证工作须得到质量检验部门的认可，以确保最大限度降低潜在污染。生产设备的配置和维修应在重新装配好后再进行消毒灭菌，以防止在设备重新装配过程中发生污染。

2．洁净区内卫生设备的清洁和灭菌尤其重要，应按规定要求对生产区卫生设备

进行经常性彻底清洁。需要消毒的地方，应选择多种消毒方法交替进行以避免生产耐药菌株。

3．在生产车间或隔离区域进行活生物体操作的过程中和结束后，对有可能污染

的区域和物品，应及时原位消毒清洁，以防止污染扩散。

4．生物制品生产过程中生产的污物和废弃物，特别是带有活生物体的污染物，

如不能原位消毒处理，需运送到别处消毒时，须放置在密闭容器内，用专用运输工具走污物通道，以避免污染扩散和交叉污染。

*2212 聚合酶链反应剂（PCR）的省查和检定是否在各自独立的建筑物中进行，防止

扩增时形成的气溶胶造成交叉污染。

1．为避免靶DNA扩增时形成的气溶胶所造成的交叉污染，聚合酶链反应试剂

（PCR）生产车间应远离PCR检查实验室，应在PCR试剂生产车间外的建筑 物内设置PCR检查或检测实验室。

（！）聚合酶链反应：对于极微量的靶DNA，运用相应的引物、DNA聚合酶和寡

核苷酸，则可将DNA扩增，理论上可无限度扩增放大。引物可以识别靶DNA，以单链DNA为模板合成一条新的DNA链，使目的靶DNA的拷贝数大大增加，从而使病毒或微生物DNA分子较易检测出来，这种核酸检测技术称之谓聚合酶链反应（PCR）。PCR技术是利用现代生物技术方法在分子水平上对疾病进行诊断，其灵敏度极高。

（2）PCR技术对目的靶DNA识别的检测灵敏度虽然极高，可以在分子水平上对

极微量检测对象------靶DNA进行识别和检测，但是对参与聚合酶链反应各种试剂纯度要求极高，试剂初度不高，尤其含有有机物等杂质，常易导致假阳性结果；另外，采用PCR技术对被检测物进行检测时，需要使目的靶DNA拷贝数大大增加，大量靶DNA可以通过气溶胶微细颗粒弥散在检测实验室大气中，造成交叉污染，导致假阳性检测结果。

2． 对于在检验过程中不会对PCR生产过程造成交叉污染的检定（如：荧光

PCR检定和经UV酶处理的PCR检定等），可以在于生产车间相同的建筑物内进行，但必须在不同区域。

*2213 生产人免疫缺陷病毒（HIV）等检测试剂，在使用阳性样品时，是否有符合相

应规定的防护措施和设施。

对使用HIV阳性样品的操作间或检测室，须按本《检查指南》2204项

第2 款所列的“微生物和生物医学实验室生物安全通用准则”的二、三级生物安全防护的设计和特殊建造要求进行，以确保该操作期间内的HIV阳性材料不会扩散逃逸出来。

（1）人免疫缺陷病毒（Human Immunodeficiency Virus, HIV）, 又称艾滋病

病毒，有I型和II型两个亚型（HIV-1和HIV-2），是20世纪70年代末到80年代初， 法国和美国学者发现的危害全人类生病健康的极其严重的传染病病原体。HIV病毒通过注射吸毒、不洁性交、母婴垂直传播及使用污染了HIV病毒的血液或血液制品等进行传播，病毒在体内大量复制，全面破坏和损伤人体免疫系统，造成HIV感染者免疫功能极度低下，甚至完全丧失免疫功能，极易导致继发感染而死亡。

（2） 目前用于艾滋病检测主要诊断试剂为人免疫缺陷病毒抗体诊断酶联免疫

分析（ELISA）试剂盒，该试剂盒由用人免疫缺陷病毒I型和II型（HIV-1和HIV-2）抗原（合成肽或基因重组蛋白）包被的微孔板和酶标记抗人IgG及其他试剂组合而成，应用间接法原理（ELISA法）来检测人血清或血浆中的HIV-1和HIV-2抗体，这种HIV的ELISA试剂盒式用于初筛检测用，如要对艾滋病确定诊断还要用艾滋病确诊试剂。

（3）HIV（1+2）ELISA这段试剂盒内除有HIV-1和HIV-2抗原组分、微孔板、

酶、显色剂（底物液A、底物液B）以外，还必须配有隐性对照血清（即HIV抗体阴性的正常人血清）和阳性对照血清（即HIV抗体阳性血清）。阳性对照血清有感染性，为确保HIV试剂生产人员和检测人员的安全和防止污染环境，阳性样品处理应在万级洁净区，并保持相对负压。

*2214 生产用种子批和细胞库，是否在规定储存条件下专库存放，是否只允许指定

的人员进入。

1．生物制品生产企业必须指派专人对其保存的生产用菌毒种和细胞的容器

贴上或固定上该菌毒种和细胞的标示明确的标签或标牌。这些固定的标签或标牌应能耐受水汽浸泡或超低温冷冻，始终保证标签或标牌的标注名称、传代代次、传代日期等内容清晰可辨。因为菌毒种和细胞的标签或标牌字迹不清往往导致发生菌毒种或细胞差错，造成不可弥补的责任事故。

2． 生产用菌毒库和生产用细胞库，应指派两人负责保管，其中任何一个人

都无法单独取得菌毒种和细胞。非指定的其他人，未经企业主管领导特别批准 一律不得进入该库重地。指派保管生产用菌毒种和细胞库的专人必须对进出库的菌毒种和细胞库的支数（ 或容器）与实际数量进行登记清点，不可有差错。

3．储存设施和方法应符合要求。

[解释说明]

（！）生产用菌毒种的种子批系统包括三级种子批。

原始种子批（Primary Seed Lot）：一定数目已验明其来源、历史和生物特性的细菌菌株或病毒株，并经临床研究证明其安全性和免疫原性良好的细菌菌株或病毒株，该原始种子应确保组成单一，并经充分签定。

主种子批（Master Seed Lot）：一定数量的来自原始种子批的细菌菌株或病毒株，每批制备时应达到一定的数量，组成均一，并经全面签定。每次生产时从主种子批中取出1支或数支用于制备生产疫苗用功能工作种子批。

工作种子批（Working Seed Lot）：从主种子批传代而得到的活细菌或活病毒，用于生产相关疫苗。一定数量的源自主种子批的细菌菌株、病毒株，每批制备应达到一定数量、组成均一，并经全面检定合格。从工作种子批中取出1支或数支用于疫苗生产。一般冻干的细菌种子批在2~8摄氏度保存，有些细菌的菌种如钩端螺旋体部分血清型菌种，真空冷冻干燥不能存活，仍需在相应斜面或半固体中保存。病毒的毒种，一般可以冻存于-40~ -80低温冰箱内保存，有些毒种则需要放置于液氮中保存，总之各种不同的细菌或病毒有其不同的最适保存条件，不可统一要求。

（2）细胞库系统亦分为三级。

原始细胞库（Primary Cell Bank）：一定数量的经过充分检查的人、动物或其他来源的细胞、源自单一组织或细胞分装于容器内，组成均一。

主细胞库（Master Cell Bank）：由原始细胞库的细胞制备而成，分装于容器内，组成均一。

工作细胞库（Working Cell Bank）：由有线传代水平的主细胞库制备而来的均一性细胞悬液，分装适宜体积于多个容器中，用于疫苗生产。

（3）各种病毒所适应不同细胞的原始细胞库、主细胞库和工作细胞库一般

保存于液氮罐内。

（4）生产用菌、毒种种子批和细胞种子库，是每个疫苗或重组产品的起始

原材料，必须指定专人保管，定期进行全面检查，以防止在传代过程

中出现差错或被外源因子污染。

（5）生产用菌、毒种种子批和细胞种子库，至少制备双份，分别贮存于两

个适宜贮存条件的专门地方，以防止因低温冰箱停电或液氮罐内液氮干涸造成生产用菌毒种和细胞等变异和死亡。

（6）生物制品生产和检定用的菌种、毒种建立种子批系统，是确保菌、毒

种历史清楚，来源可以追溯，使生产和检定用的菌种、毒种工作种子批与主种子批和原始种子批在生物学特性和遗传学特性上保持一致的重要措施。

*2215 以人血、人血浆或动物脏器、组织为原料生产的制品是否使用专用设备，是

否与其他生物制品的生产严格分开。

本项是对以人血、人血浆或动物脏器、组织为原材料生产血液制品、细

胞因子及生产药品等的生产厂房和设备的要求。

1．由于人血浆有潜在的病毒污染危害，所以不能与其他生物制品共用相同的生产设备。

众所周知，临床上广泛使用的各种血液制品，诸如人学白蛋白、免疫

球蛋白及各种凝血因子、人用血液组分制备的各种细胞因子等，都是治疗和抢救危重病人的重要生物制品，保证其使用安全是首要问题。上述以人血、人血浆为原材料制备的血液制品、细胞因子都是采用大批量混合人血浆、血液组成成分来制备，而人血液可能被各种病原体所污染，特别是被经血液传播的相关病毒污染。国内外大量检测资料已确认，人

血或血液制品可能携带并传播的病毒主要有：乙型肝炎病毒（HBV）、丙型肝炎病毒（HCV）、艾滋病病毒（HIV-1和HIV-2）、人类嗜淋巴细胞I和II型病毒（HTLV-1+2）、丁型肝炎病毒（HDV）、甲型肝炎病毒（HAV）、人类细小病毒（HPV）以及梅素螺旋体、金氏虫病、弓形体等病原体等，目前人们重点关注的主要是HIV（1+2）、HBV和HCV对人血或血液制品的污染，因为这三种病毒感染率高，危害特别严重。

2．人血浆蛋白和动物蛋白属于不用种属免疫原，如果动物蛋白混入人血浆制品，会造成严重的过敏反应。所以，也不能与其他生物制品共用生产设备。

3．为加强血液制品管理，预防和控制经血液途径传播的疾病，1996年12月30日国务院颁布的《血液制品管理条例》规定。

（1） 国家实行采血浆站统一规划、统一设置制度，未经审核批准任何单位和个

人不能从事采血浆；

（2） 必须按国家制定标准，对供血浆者进行健康检查，根据国家制定的血浆

采集技术操作标准和程序，采用机械采集血浆，并按单人份冰冻保存，不得混装。

（3） 新建、改建或者扩建的血液制品生产单位，须经国务院卫生行政主管部

门进行立项审查，依照《药品管理法》规定审核批准；

（4） 血液制品生产单位必须达到国家《药品生产质量管理规范》规定的标准，

经审查合格，方可从事血液制品生产。

（5）严禁血液制品生产单位出让、出租、出借以及与他人共用《药品生产企

业许可证》和产品批准文号；

（6）血液制品生产单位不得向无《单采血浆可许证》的单采血浆站或者未与

其签订质量责任书的单采血浆站收集原料血浆；

（7）在原浆投生产之前，必须使用有生产批准文号并经国家药品检验机构逐

批检验合格的诊断试剂对每一人份血浆进行全面复检，复检不合格的血浆不得投料生产；

（8）血液制品的生产和产品质量，必须符合国家规定的标准，血液制品出厂

前必须经过质量检定，不符合国家标准的严禁出厂。

*2216 使用密封系统生物发酵罐生产生物制品可以在同一区域同时生产（如单克隆

抗体和重组DNA制品）

1．我国现行《药品生产质量管理规范》和国际上通行的《药品生产检查互

相承认公约（PIC）药品生产质量管理规范指南》、欧共体《药品生产质量管理规范》等均明确规定：使用生物发酵罐密封系统的一些制品可以在同一区域或者同时生产，如单克隆抗体和重组DNA产品。

2．采用生物发酵罐这类密封系统生产的单克隆抗体和DNA重组技术设备的

产品，从工程菌株或工程细胞接种入发酵罐，在生物反应器（即发酵罐）内发酵培养，直到培养过程完成后菌体收集或细胞收集，发酵产物通过管道进入纯化工序等，这一生产制备全过程都是在封闭系统内进行，正常情况下不会受到外环境干扰和污染，不会渗漏出来污染周围环境。因此，可以允许一些产品在同一发酵车间内生产或者同时在同一发酵车间

的不同密封系统内进行生产。

3．非密闭系统不得在同一区域同时生产。

*2217 各种灭活疫苗（包括重组DNA产品）、类毒素及细胞提取物，在其灭活或消

毒后可以与其他无菌制品交替使用同一灌装间和灌装、冻干设施。但在一种制品分装后，必须进行有效的清洁和消毒，清洁消毒效果是否定期验证。

各种灭活疫苗、类毒素（脱毒处理后的毒素）及细胞提取物，均不含

有致病性活细菌或活病毒所具有的致病因子，因此，只要对这些制品制备过程中进行有效灭活或消毒，即可以与其他无菌制品交替使用公用的灌装间、灌装设施和冻干设施。但在一种制品分装后，必须对使用过的灌封间、灌装设备和冻干设备等进行有效的清洁和消毒，其清洁、消毒效果哟阿定期进行验证。

*2218 操作有致病作用的微生物是否在专门的区域内进行，是否保持相对负压。

1．本项“操作有致病作用的微生物”，是指本《检查指南》2204项第1款

中所用的《中国医学微生物菌种宝藏管理办法》中规定的第一类和第二类的细菌和病毒。

2．对操作上述第一类或第二类有致病作用的活细菌或活病毒，须在专门区

域 内进行，该操作区与相邻区域要保持相对负压。关于操作有致病作用微生物的操作区设计、布局、建造及该操作区空气净化及保持相对负压的要求，参见2004项第2款。

*2219 有菌（毒）操作区与无菌（毒）操作区是否有各自独立的空气净化系统，

来自病原体操作区的空气是否循环使用。

1．有菌（毒）操作区与无菌（毒）操作区，在本《检查指南》2201项第

2款中已论述，是指生产各种灭活疫苗时，生产过程的两个阶段：第一阶段是采用从自然界分离的毒力强、抗原性好的天然强毒细菌菌株或病毒株，进行大规模培养制备，这一阶段制备出的细菌原液或病毒原液，以及所有使用的培养设备和器材，有大量活的细菌或病毒，又称之谓“活菌”或“活毒”，这些活培养物（生物体）具有致病性，必须在与相邻区域保持相对负压的有生物安全防护区域进行生产操作。在第二阶段，细菌原液或病毒原液收获后，加入一定量甲醛或其他适宜灭火剂，在规定温度和规定时间内将活的细菌或活得病毒全部杀死，这时活菌体或活病毒体即变成无活菌或无活病毒了，又称之谓“死菌”或“死毒”。

2． 各种灭活疫苗生产的这来那个个阶段，是紧密相连的过程，但又是必

须严格分开的过程。为了适应灭活疫苗的生产工艺流程的连续性，在设计和建造灭活疫苗生产车间时，必须将该灭活疫苗生产车间，分隔成有菌（毒）操作区与无菌（毒）操作区两个独立的部分，有各自独立的空气净化系统。有菌（毒）区域的空气净化系统采用直排系统，不得采用部分回风循环系统。详见2204项第3款的要求。

3． 血液制品原料（人血浆）可能被经血液传播的病毒和细菌污染，因此

血浆破袋、合并血浆区与血浆蛋白分离区的生产设施、设备、用具应严格分开。

*2220 来自危险度为二类以上病原体的空气是否通过除菌过滤器排放，滤器的性

能是否定期检查。使用二类以上病原体强污染性材料进行制品生产时，对其排出污物是否有有效的消毒设施。

来自危险度二类以上病原体，是指按《中国医学微生物菌种保藏管理

办法》所规定的第一类和第二类所列的细菌或病毒。

1．在操作危险属二类以上病原体（包括细菌或病毒）的活生物体要在防护操作区域内操作，其通风空调系统应为直排系统，不得采用部分回风循环系统，该操作区通风经初、中、高三级过滤；操作区排风必须经过高效过滤或其他方法处理，以不低于12m/s的速度直接向空气中排放；生物安全柜排出的经内部高效过滤得空气可通过系统排风管排至大气中。

2．该生物安全防护操作区，应设有高压蒸汽菌锅或化学消毒装置来对废弃物进行消毒处理。如需要运至生物安全防护操作区外进行焚烧的污物和废弃物，应装入密闭容器内高压消毒后运至焚烧炉焚烧。

*2221 用于加工处理活生物体的生物制品生产操作区和设备是否便于清洁和去除

污染，能耐受熏蒸消毒。

1．加工处理活生物体的生物制品生产操作区的地面、物体、天棚、应光

洁、不产生尘粒、易于清洁消毒。因为经常要进行清洁消毒，地面、物体和天棚等应采用能耐受消毒剂或熏蒸消毒的材料。

2．用于加工处理活生物体的设备，如发酵罐、冻干机、离心杯等应能原

位消毒清洁。其他用于加工处理活生物体的玻璃器皿和不锈钢用具等亦应在操作区内先经过高压消毒或化学消毒后才能清洗。

3．欧洲共同体《药品生产质量管理规范》对生物制品设备和生产区的清

洁、消毒推荐使用熏蒸消毒法，因为在生产区有些地方用化学消毒方法不能进行彻底清洁和消毒。WHO于1994年颁布的《生物制品生产企业GMP检查指南》对生物制品生产厂房的设计亦要求能进行薰蒸消毒。

*2802 生物检定、微生物限度检查是否分室进行。

[解释说明]

生物制品不得含有杂菌（有专门规定者除外），灭活疫苗不得含有活的

该菌或活的该病毒。分装后的制品按规定要求进行无菌试验，作为最终检定。

生物检定：采用微生物、细胞或实验动物来检定或判定制品效价及安

全性的方法称为生物检定法。

微生物限度检查：微生物限度检查法系指检测非规定灭菌制剂及其原、

辅材料受微生物污染程度的一种检查方法，包括杂菌量及控制菌的检查。

1．生物制品无菌试验应在专用100级洁净室或万级洁净室中的100级洁净工作台进行。非无菌试验的其他试验不得在此无菌试验室进行。

2．对用于生产的主细胞库、工作细胞库、病毒种子批、对照细胞、培养液以及临床治疗用细胞进行支原体检查时（包括培养法或DNA染色法）应在专用100级的洁净操作室或万级洁净室中的100级洁净工作台进行。

3．进行生物制品的无菌试验和支原体检测的专用洁净室，不应进行无菌试

验，培养基和支原体培养基的灵敏度检测试验，如要做培养基灵敏度测验，必须在其他操作室进行。

4．微生物限度检查时，其被检测样品是非无菌制剂，检测标准允许有限量的真菌或非致病的杂菌存在，因此，微生物限度检查与生物制品无菌试验的目的和要求是截然不同的，可在100，000级洁净室中的100级洁净工作台进行。为确保制品无菌试验检测结果准确，不受外部环境的影响，生物制品无菌试验检测洁净室，必须要与微生物限度检测室分开，不可混用。

*3302 用于生物制品生产的动物室、质量检定动物室是否与制品生产区各自分开。

1． 该项规定，在文字表达上下不够准确合理，易使人造成不必要的疑义

和误解。如现行的人用狂犬病疫苗、肾综合征出血热灭活疫苗，乙型脑炎减毒活疫苗，乙型脑炎灭活疫苗、森林脑炎灭活疫苗、猴肾脊髓灰质炎活疫苗等，都是将疫苗生产用病毒株接种感染地鼠肾细胞或沙鼠肾细胞或猴肾细胞。这些地鼠、沙鼠和猴肾细胞均是原代细胞，只有从活得动物体内取出鲜活的肾脏，消化制备原代细胞才能用于疫苗生产，从解剖动物取肾、消化制备细胞等是有关疫苗生产的不可分开的工艺步骤，只能在疫苗的生产车间内进行。因此，3002项宜改为“用于生物制品生产的动物的繁殖饲养区、质量检定动物室是否与制品生产区各自分开”。

2． 用于生物制品生产的动物繁殖饲养区，必须与做制品质量检查用动物

室（系指制品异常毒性试验、热原试验以及效力试验动物室）各自分开，更要与制品生产区分开。

*3003 生物制品所使用动物的饲养管理要求，是否符合实验动物管理规定。

国家科技部下设中国实验动物管理委员会，各省、直辖市、自治区的

科技厅（局）设有省级试验动物管理委员会或试验动物管理中心，负责制定实验动物检测和试验动物设施评定标准，发放实验动物等级合格证书和实验动物饲养条件证书。因此，GMP认证检查时，应要求被检查单位提供省级实验动物管理部门核发的“实验动物登记合格证书”和“实验动物饲养条件可许证书”。如被检查单位所用的实验动物是外购的，应要求被检查单位提供与出售实验动物单位签订的实验动物供货合同及相应实验动物质量标准，并提供动物供应单位的“实验动物等级合格证书”（复印件）和“实验动物饲养条件许可证书”（复印件）。

解释说明

1．生物制品生产及检定所用实验动物按其所携带的微生物可分为四个不同等级。

（1）普通级动物（一级动物）：应排除人畜共患病及动物烈性传染病病原

体；实验动物设施为开放系统，要求通风良好，保持清洁。

（2）清洁级动物（二级动物）；除应排除人畜共患病及动物烈性传染病原体

外，还应排除影响动物健康的动物传染病及对动物实验结果影响大的疾病原体；清洁级动物须在有相应洁净级别的亚屏障系统内繁殖饲养。

（3）SPD动物（三级动物）：除排除普通级、清洁级动物应排除的病原体外，

还应排除动物隐性感染的所致干扰动物实验结果的病原体；SPD动物须在万级洁净级别的屏障系统内繁殖饲养。

（4）无菌动物（四级动物）：无可检定的一切微生物体，无菌动物必须在

规定洁净级别的隔离系统内繁殖饲养。

（5）悉生动物（四级动物）：无菌动物体内植入已知微生物的实验动物；

悉生动物必须如无菌动物一样在隔离系统内饲养。

上述四个等级实验动物评定标准，以及实验动物饲养设施要求，

国家实验动物管理部门均已制定有相关标准。

2．《中国生物制品规程》要求有关预防及治疗用制品生产及检定实验动物

------小鼠、豚鼠、地鼠及沙鼠为清洁级动物；鸡胚为SPF鸡胚。

由于到目前为止，能繁殖和供应清洁级以上小鼠、大白鼠和豚鼠

的，国内只有中检所等少数几家单位。要达到清洁级以上等级动物，不是建造有洁净级别的动物饲养室就能达到的，其中还要有无特定病原体动物种群的选育系统和建立对实验动物病原菌、病毒、寄生虫等的各种检定和检测方法，对动物饲养人员、管理人员和检测人员的系统培训，涉及范围很多，投资成本较高，不是短时间内就能实现的。再如日本、欧盟等国家和地区，到目前为止，对生产用胚数量巨大的流行性感冒疫苗和水痘疫苗也没有完全采用SPF鸡胚。

综上，国家食品药品监督管理局拟在《中国生物制品规程》（2005

年版）中考虑实施。

三、设备

[检查要点]

设备的设计、选型和安装应有利于避免交叉污染、避免差错并便于清洁及日常维

护。

3103 生物制品生产使用的管道系统、阀门和通气过滤是否便于清洁和灭菌，封闭

性容器（如发酵罐）是否用蒸汽灭菌。

1．药品生产检查淮南国承认公约（PIC）1992年颁布的《药品生产质量管

理规范指南》“厂房和设备”中要求：生物制品生产管路系统、阀门和通风口过滤器的设计都应便于清洁和灭菌。应鼓励使用“原位清洁”和“原位灭菌”系统。发酵罐及其阀门应采用蒸汽彻底灭菌。空气出口过滤器应是疏水的，并应验证其预计使用寿命。欧洲共同体1992年颁布的《药品生产质量管理规范》中亦有上述规定。

2．生物制品生产所用的各种反应罐、发酵罐及其管道等系统和阀门，在生

产操作结束后，如不进行彻底清洁和灭菌，在容器、管道系统和阀门处极易残留生物活性物质，是细菌或病毒生长繁殖的物质基础，必须及时进行清洁和灭菌。灭菌可以用化学消毒剂 ，如体积较小的容器、可拆卸阀门和软管道等可以完全浸没于化学消毒剂中，其消毒效果是可靠的；但大的反应罐、发酵罐和不可拆卸的管道、阀门等采用消毒剂喷雾消毒或擦拭消毒或冲洗消毒，可能有消毒不到的死角，其消毒效果不及蒸汽消毒可靠，因此，清洁完后应采用蒸汽消毒灭菌。

3．由于通风口过滤的滤材多为纸板、纤维材料或发泡材料，不宜采用蒸汽

或薰蒸消毒，可采用用臭氧消毒、环氧乙烷消毒、紫外线或辐射消毒等方法，但所用方法需经验证。

*3402 注射用水的制备、储存和分配是否能防止微生物的滋生和污染，储罐的通气口

是否安装不脱落纤维的疏水性除菌过滤，储存是否采用80摄氏度以上保温、65摄氏度以上保温循环或4摄氏度以下存放。

1．世界卫生组织（WHO）1994年颁布的《生物制品生产企业GMP检查指南》“注

射用水系统”中规定，生物制品生产注射用水应是>=80摄氏度循环贮存，如不是循环贮存，其注射用水贮存24小时后就要排放掉或转作其他用途。

WHO的上述要求与我国现行《药品生产质量管理规范》的有关规定存在不

一致的地方，只能作为一种建议列出，不作为认证检查时判定“通过”或“不通过”的依据，只是希望生物制品生产企业，能通过努力，朝着WHO的规定要求去改进。

2．该项规定中要求生产用注射用水4摄氏度下存放，但并未明确规定存放时限，

这对生物制品生产不合适。因为，如果注射用水的储存罐和运输管道消毒灭菌不彻底，可能有利于细菌或病毒的生长繁殖，因此在3404项中规定生物制品生产用注射用水储存时限是十分必要的。

*3404 生物制品生产用注射用水是否在制备后6小时内使用；植被后4小时内灭菌72

小时内使用。

1．生物制品生产用注射用水，必须在高效蒸馏制备后6小时内使用，超过6

小时未用完的注射用水须排放倒掉或转为洗涤之用，而不能用于生物制品原液、半成品和成品的配制用水（体外诊断试剂盒口服生物制剂除外）。

2．生物制品生产用注射用水，在高效蒸馏制备后6小时内使用不完的注射用

水，可以分装于清洁灭菌的容器内，在制备后4小时内再高压蒸汽灭菌一次，这种经二次灭菌的注射用水在第二次高压蒸汽灭菌后72小时内可用做生物制品的原液、半成品、成品的配制之用。

*3604 生物制品生产过程中污染病原体的物品和设备是否与未用过的灭菌物品和设备

分开，并有明显标志。

1． 已清洁灭菌过的物品和设备必须与污染病原体的物品和设备严格分开并

有明显标志。

该项规定对确保生物制品的安全生产和制品质量十分重要。在生物制

品生产过程中，特别是各类疫苗生产操作时，用过的物品和设备都会污染生产用菌或病毒，而且有的还是致病性微生物。物品和设备上污染了病原体往往肉眼不易发觉，如不与已灭菌物品和设备严格分开，就易造成生产操作时的交叉污染，甚至危及生产操作人员的生命安全。

2．清洁消毒过的物品要有消毒灭菌的日期标志，清洁消毒过的设备要在其状

态标志牌上标明消毒灭菌时间。

（1）消毒灭菌都要有有效时限规定。各种物品或生被德消毒有效时限，由生

产企业根据生产实践的验证结果来定。如已过消毒有效时限的物品和设备，即使没有人动用过，亦必须重新消毒灭菌后才能使用。

（2）WHO的《生物制品生产企业GMP检查指南》要求所有高压蒸汽灭菌和干热

灭菌过的物品上都要贴有热敏指示胶带，该热敏指示胶带是乳白色或淡黄色，并可在此胶带上写上灭菌日期，当物品经高压蒸汽灭菌或干热灭菌后，这一小片热敏指示胶带就变成灰褐色或棕褐色，十分醒目，热敏指示胶带未经高温高热不会变色，因此，这种指示胶带使用起来方便可靠。

四．物料

[检查要点]

物料管理系统应具有可追溯性；物料应符合标准要求、有标识（如代号、编码），并

有有效期或贮存期规定，不使用无标准的物料；遵循“先进先出”原则，近效期物料须及时复检，不使用过期物料。

* 4402 菌毒种是否按规定验收、储存、保管、使用、销毁。

1．生物制品生产企业必须使用经国家药品监督管理部门批准的菌种或病毒种进行

生产。

2．生产制品生产企业应制定专门部门对本单位菌、毒种实行统一管理，有严格的

菌、毒种管理制度，建立详细收发登记帐。

3．生物制品生产用菌、毒种，应建立种子批系统，没有原始种子批地，其主种子

批和工作种子批地生物学特征应与原始种子批保持一致。

4．生产用菌、毒种应按《中国生物制品规程》要求定期进行检定，每次检定结果

均应及时记入菌、毒种检定专用记录内；检定不合格的菌、毒种不能用于生产。

5．在操作和检定不同类菌、毒种时，应根据《中国医学微生物菌种保藏管理办法》

有关规定，在相应生物安全防护等级的操作间或实验室内进行。

６．菌、毒种经检定合格后，根据其特性选用适宜方法保存。

７．销毁一、二类菌毒种须经本单位领导审核，报请所在地卫生行政部门批准。

4403 生物制品用动物源性的原材料使用时要详细记录，内容至少包括动物来源、动物繁

殖和饲养条件、动物的健康情况。

[解释说明]

人用狂犬病疫苗、乙型脑炎减毒活疫苗、乙型脑炎灭活疫苗、肾综合征出血热

灭活疫苗、森林脑炎灭活疫苗等生产采用地鼠肾原代细胞或沙鼠肾原代细胞；麻疹活疫苗、流行性感冒灭活疫苗、腮腺炎活疫苗、黄热活疫苗等生产采用鸡胚；猴肾脊髓灰质类活疫苗采用猴肾原代细胞；生产抗血清和抗毒素通过免疫马匹获取马血浆，这些都是动物源性原材料，现行《中国生物制品规程》的“生物制品生产用动物细胞制备及检定规程”和“生物制品生产用马匹检疫及管理规程”有关规定。

1．动物的来源及其管理：

（1）用于生物制品生产的各种动物其种群来源要清楚，并可溯源。

（2）动物应明确健康状况，严格控制其饲养条件，尽量使用无特定病原体的动物，

定期进行有无相关病毒抗体检查，地鼠，沙鼠等动物应在封闭房舍内饲养，清洁级或SPF级动物须在亚屏障或屏障系统内繁殖饲养。

（3）猴应笼养或同种群混养，最近买入的猴要有6周检疫期，应进行结核菌素及

猴疱疹I型病毒（B病毒）检查。

（4）用于制备鸡胚细胞的鸡应来自无特定病原体（SPF）的鸡群。

（5）应建立相关制度，并具备一定条件。

2．生物制品生产用马匹检疫及管理：

（1）选购马匹应体质健康，营养程度良好，年龄以4~15岁为宜。

（2）不得在疫病流行地区选购马匹。

（3）选购入的新马，应进行编号、烙印和检疫，检疫期为90天，检疫期应进行马

鼻疽、马传染性贫血、布氏杆菌及马副伤寒性流感等动物传染病的检测，凡检疫结果阳性或可疑者，应立即采取有效措施隔离处理，不得用于生物制品生产。

（4）选好的马匹应予隔离，可进行破伤风类毒素预防接种。

4404 用于疫苗生产的动物是否是清洁级以上的动物。

在本《检查指南》3303项中已讲过，《中国生物制品规程》要求有关预防和

治疗用生物制品生产及检定所用动物----小鼠、豚鼠、地鼠及沙鼠为清洁级动物；鸡胚为SPF鸡胚；对家兔、狗和猴等尚未作明确要求。因为到目前为止，我国只有中国药品生物制品检定所唯一的一家刚建立清洁级家兔种群；清洁级的狗和猴种群，我国在短期内难以建立。

统一要求我国生物制品生产和检定用的小鼠、豚鼠、地鼠、沙鼠都为清洁级

动物，所有鸡胚均为SPF鸡胚，涉及面很广，投资成本高，不是短期内能实现的。

何时决定实施，有待国家药品监督管理部门做出规定，方能执行。

4405 是否建立生产用菌毒种的原始种子批、主种子批和工作种子批系统。

1．根据现行《中国生物质制品规程》的“生物制品生产和检定用菌种、毒种管

理规程”的规定可直接用于生物制品生产及检定的细菌、立克次体及病毒的菌种，毒种，均应按该规程要求建立要求原始种子批（Primary Seed Lot）、主种子批（Master Seed Lot）及工作种子批（Working Seed Lot）系统。

2．但需明确指出的是，只有该菌株或病毒株的原研发单位或最初分离检定单位，

才会有细菌或病毒株的原始种子批。设在中国药品生物制品检定所的中国医学细菌保藏管理中心所收集、保存的数十个菌属近5000多个已编成国家统一编号的菌种及毒种，从严格意义上来讲，大部分尚不能算是“原始种子批”，因为这些菌毒种是收集于国内各省、市、自治区卫生防疫单位、临床医院、医学院校及医学研究单位，还有相当一部分菌毒种源于欧美、前苏联和东欧国家。中检所获得这些早代菌种和毒种，经系统检定后，制备出一定数量、组成均一的种子批，只能称之谓“主种子批”，而不是严格意义上的“原始种子批”。从中检所分发出去的菌、毒种或通过技术转让而获取原研发单位的原始菌、毒种，由制品生产企业所建立的种子批，往往只是工作种子或主种子批。因此，在对生物制品生产企业进行GMP认证检查时，一定要根据该企业必须提供生产及检定用菌毒种原始种子批、主种子批及工作种子批三级种子批系统的资料。因有的生产企业可能只有工作种子批，而没有主种子批和原始种子批。

3．菌毒种的保存必须专库、专门人员保管，且须有严格的领用管理制度

4406 种子批系统是否有菌毒种原始来源、菌毒种特征鉴定、传代谱系、菌毒种是否

为单一纯微生物、生产和培育特征、最适保存条件等完整资料。

4407 生产用细胞是否建立原始细胞库、主代细胞库和工作细胞库系统。

1．细胞库系统，亦分为原始细胞库（Primary Cell Bank），主代细胞库（Master

Cell Bank）和工作细胞库（Working Cell Bank）三级细胞库，在本《检查指南》2214项已详细说明。还必须明确指出的是，原始细胞库只有该传代细胞的原研发单位或最初分 离检定单位才会建立，生物制品企业可能只有主代细胞库和工作细胞库。

2. 该细胞库系统是对由一原始细胞群发展成为细胞系（株）或经过克隆培养

后形成均一的细胞群体，如人二倍体细胞株和Vero、CHO等传代细胞的要求。

3.人用狂犬病疫苗、乙型脑炎疫苗、出血热疫苗、麻疹疫苗等生产所用的地鼠肾、沙鼠肾细胞及鸡胚细胞等属于原代细胞，是从新鲜、活的动物体取相应组织制备的原代细胞，原代细胞传到一定代次就会发生变异，不可能形成反复传代又能保持细胞特性稳定的细胞系，因此，原代细胞是不要求建立三级细胞库的。

4408 细胞库系统是否包括：细胞原始来源（核型分析、致瘤性）、群体倍增数、

传代谱系、细胞是否为单一纯化细胞系、制备方法、最适保存条件等。

1.二倍体细胞株细胞库德建立，应包括原始细胞来源和历史、染色体检查（核

型分析）、群体倍增数、传代谱系，细胞的细菌、真菌及病毒污染检查、致

肿瘤性检查，细胞株鉴别试验系统检查资料。

2.传代细胞系细胞库建立，应包括细胞株来源和历史细胞已传代的代次，用

于生产最高限制代数，细胞系统类型及形态特征，细胞鉴定的特殊标志，遗传特征（如HLA DNA指纹图谱），外源病毒检查，逆转录病毒检查等系统检查资料。

3.人二倍体细胞核Vero、CHO等传代细胞的细胞库建立，与生产用菌毒种种

子批系统亦存在类似情况，其原始细胞库只有该细胞原分离研发单位才能建立，我国现用的Vero、CHO等细胞株都是从国外引进的，人二倍体（2SB株）细胞株的原始细胞库只在原分离研发单位。对采用人二倍体细胞或传代细胞系进行生产的生物制品生产企业，只能根据其来源和历史情况，要求被检查单位提供在获得该细胞系（株）后所建立的功组细胞库或主代细胞库资料。

五.卫生

[检查要点]

卫生是防止和消毒药品生产过程中遭受污染的重要措施。卫生涉及环境、人员、厂

房、设备、仪器、物料、容器、洁具、清洁剂、消毒剂和工艺过程等各个方面。应制订各种书面规程，确保药品生产全过程良好的卫生状态。

5002 在含有霍乱弧菌、鼠疫菌、人免疫缺陷病毒（HIV）、乙肝病毒等高危病原

体的生产操作结束后，对可疑的污染物品是否在原位消毒，并单独灭菌后，方可移出工作区。

1.该项是要求在对《中国医学微生物菌种保藏管理办法》规定的一类和二类

高危病原体的色和那个产和检定操作结束后，其污染和可疑污染物品，都必须在操作现场进行高压蒸汽消毒或化学消毒剂浸泡消毒后，方可移出工作区。

2.根据“微生物和生物医学实验室生物安全通用准则”要求，操作一类、二

类高危病原体必须在相应生物安全防护操作间或实验室内进行，该操作区必须配备高压灭菌柜或化学消毒设备对废弃物或可疑污染物品进行消毒处理后，方可移出工作区。

5303 在生物制品生产日内，生产人员是否按明确规定的方法去污染处理后，由操

作活微生物或动物的区域到其他制品或微生物的操作区域。

该项所指的“生物制品生产日内”，是说“这一天”生产车间进行了活生

物体（包括细菌或病毒）操作和生产活动，凡进入含有活生物操作区、未按规定程序采取去除污染措施（包括脱去污染防护服、口罩、手套、防护帽和鞋，消毒手，消毒有可能污染部位等）的人，不能走出该活菌或活病毒操作区，更不允许到其他制品操作区。其目的是使“生产日内”活生物体局限于生产操作的规定区域，不允许扩散或未经处置而外逸到非污染区域。

5305 从事生物制品生产操作的人员是否与动物饲养人员分开。

1.因为目前绝大多数生产企业实验动物繁殖饲养（包括小鼠、地鼠、沙鼠、

豚鼠、家兔、狗、猴等）均为开放式，其动物种群未达到清洁级以上等级，这些实验动物程度不等地污染了多种细菌、病毒及寄生虫，甚至还隐藏某些人畜共患病的致病微生物。不仅实验动物饲养要与生产区域严格分开，

从事生物制品生产操作人员亦必须与动物饲养人员分开。

2.有关疫苗生产所需的实验动物（如地鼠、沙鼠、鸡胚等）须有专人将动物

装入专用容器内运送到生产区指定区域，对运送动物容器进行规定程序的消毒处 理后，通过专用传递窗才能进入疫苗生产区，运送动物的人是不能进入生产区的。

5602 生物制品生产及维修、检验和动物饲养的操作人员、管理人员，是否接种相

应疫苗并定期进行体检。

1.生物制品生产企业的生产人员、检验人员、清洁和维修人员，以及需要进

入生产操作区和检验实验室的管理人员、动物饲养人员都必须按规定定期进行体检，发现有传染病等疾病者或隐性传染者，应及时调离原工作岗位，进行诊治。

2.对上述所列的人员进行相应疫苗接种问题，应注意以下几点：

（1）疫苗接种要有针对性，原则上从事什么疫苗生产和检定，就接种相应疫

苗，例如：卡介苗生产人员和检定人员要接种卡介苗，破伤风制剂生产和检定人员要接种破伤风类毒素，甲肝疫苗、狂犬病疫苗、乙型脑炎疫苗等生产和检定人员要接种其相应疫苗。

（2）疫苗接种后，要根据该疫苗免疫久性和国家规定的疫苗接种程序，按规

定再接种或加强免疫。

（3）对接种相应疫苗的接种者，在完成全程接种后和疫苗接种一定时间后，

采血做相应抗体测定，以判定疫苗接种成功率，或什么时候需要加强免

疫。

5603 患有传染病、皮肤病、皮肤有伤口者和对生物制品质量生产潜在的不利影

响的人员，是否进入生产区进行操作或进行质量检验。

1. 患有传染病、皮肤病、皮肤有伤口者，有可能将其所携带的病原微生物

（细菌、病毒、真菌等）带生产操作区或检定实验室，对生物制品生产和质量控制等造成不利影响。该项规定对确保生物制品安全生产和质量控制是十分重要的。

2. 该项要求也能保护工作人员免受感染。

3. 患病的动物饲养人员也不可以进入生产操作区或检定实验室进行操作

或质量检验。

六、验证

[检查要点]

验证是证明任何程序、生产过程、设备、物料、活动或系统确实能达到预期结果的有文件证明的一系列活动。预期结果即是原则上的合格标准。

验证是药品生产企业管理运行的基础。验证文件则是有效实施GMP的重要证据。对已验证过的状态必须进行有效的监控。

详见总则。

七、文件

[检查要点]

实施GMP必须有良好的文件系统。文件系统能够避免信息由口头交流可能引起的差错，并保证生产和质量控制全过程的记录具有可追溯性，企业必须有质量标准、生产方法、指令、标准操作规程以及各种记录。

详见总则。

八、生产管理

[检查要点]

生产必须严格遵循各种文件要求，确保产品质量。

6602 生物制品是否严格按照《中国生物制品规程》或国家药品监督管理部门批

准的工艺方法生产。

1.《中华人民共和国药品管理法》第十条规定：“药品必须按照国家药品标

准和国务院药品质量的生产工艺进行生产”，“药品生产企业改变影响药品监督管理部门批准的生产工艺进行生产”，“药品生产企业改变影响药品质量生产工艺，必须报原批准部门审核批准”；《药品管理法》第四十八条还规定：“药品所含成分与国家标准规定的成分不符的”为假药；“依照本法（即《药品管理法》）必须批准而未经批准生产、进口的”按假药论处。

2.《中华人民共和国药品管理法》第三十二条规定“药品必须符合国家药

品标准”，“国务院药品监督管理部门颁布的《中华人民共和国药典》和

药品 标准为国家药品标准。”

3. 现行的《中国生物制品规程》经第三届中国生物制品标准化委员会会审

议通过，并经国家药品监督管理局批准颁布。

（1）该《中国生物制品规程》，收载通则规程14个，预防类制品规程

36个，治疗类制品规程39个，诊断类制品规程62个，总计151个生物制品 规程，都是《中华人民共和国药品管理法》第三十二条所规定的，为国家监督管理部门批准颁布的国家药品标准，是在中华人民共和国境内从事生物制品的研制、生产、经营、使用和监督管理的单位或个人，必须遵守的强制性国家药品标准。

（2）2002年10月11日至13日，在由国家药品监督管理局主持召开

的第八届国家药典委员会成立大会上，将原中国生物制品标准委员会所设的各分委员会，分别纳入第八届国家药典委员会。新一届国家药典委员会中下设细菌制品、病毒制品、血液制品、重组技术制品、体细胞治疗和基因治疗、体外诊断用生物试剂六个专业委员会，承担《中华人民共和国药典》２００５年版的生物制品国家标准起草、修订工作。国家药品监督管理局决定《中华人民共和国药典》（２００５年版）将分三部颁布出版：一部为中药；二部为化学药；三部为生物制品。因此，凡在我国从事生物制品研制、生产、经营、使用和监督管理的单位和个人，都必须严格执行现行《中国生物制品规程》，所有的生物制品生产企业，“必须按照国家药品标准和国务院药品监督管理部门批准的生产工艺进行生产”，“药品生产企业改变影响药品质量的生产工艺的，必

须报原批准部门审核批准。”

*7005 无菌药品生产直接接触药品的包装材料是否回收使用。

1.生物制品是最终不能消毒灭活的无菌药品，直接接触生物制品的内分

装容器或最终分装容器（如：安瓿、西林瓶、注射器等），是不允许回收再使用的。

2.口服生物制品，如糖丸、胶囊、片剂等剂型的制品，虽不属于严格意

义上的无菌制品，其已分装后的胶囊和铝塑包装材料等，亦不主张回收再使用。

3.因体外诊断试剂制品不进入体内，生产企业对制品反应板或反应条带

检测时，发现某些项目或单项不合格，试剂盒内配套的合格阴性和阳性对照品和其他配套试剂，可以允许分别取出装配到其他合格试剂盒内。

九、质量管理

[检查要点]

质量部门独立于生产部门，这是GMP的基本原则。质量管理包括取样、质量标

准、检验、组织、文件、物料或产品审核批准放行等方面。物料或产品未经质量部门认定合格前不得发放只用或投放市场。

7404 生物制品原辅料（包括血液制品的原料血浆）、原液、半成品、成品都是否

严格按照《中国生物制品规程》或国家药品监督滚利部门批准的质量标准

进行检定。

1.为加强生物制品生产用原辅料质量控制，确保《中国生物制品规程》实

施和执行，对现行《中国生物制品规程》中生物制品生产所涉及到的、最终生产工艺中又不能完全去除的及直接接触成品的主要原辅次材料，由中国生物制品标准化委员会审议通过，国家药品监督管理局批准并颁布了现行《中国生物制品主要原辅次阿廖质控标准》。《中国生物制品述要原辅材料质控标准》（2000年版）是我国生物制品生产过程中所用主要原辅材料质量检定的重要依据，也是法定的质量控制最低要求。凡不符合该《中国生物制品主要原辅材料质控标准》的原辅材料，不得投入生物制品生产。

该《原辅材料质控标准》是在1993年版《生物制品主要原材料试行

标准》基础上，以《中国药典》、《中国生物制品规程》和《化学试剂标准大全》为依 据，并参考国外相关标准编制的，收载了无机类、有机类、生物材料类和包装材料类各种生物制品生产用主要原辅材料的检定项目及质量标准，还附有29个通用的附录。

2. 在现行的《中国生物制品规程》中对36个预防类生物制品、39个治疗

类制品和62个诊断试剂的原辅材料、原液（Bulk）、半成品（Final Bulk）、 成品（Final Product）及其制备生产工艺和质量检测标准均有明确规定。

（1）生产所用的原辅材料，凡检定不符合《中国生物制品主要原辅材料质控

标准》的，不得投入生产。

（2）每一种生物制品的原液、半成品及成品都必须按现行《中国生物制品规

程》所规定的生产工艺和质量标准进行外，凡不符合《中国生物制品规程》所规定的生产工艺和质量标准进行生产出来的原液、半成品、不得分类成成品。

3. 血液制品的原料血浆、原液、半成品及成品生产和检定，除必须严格按

照现行《中国生物制品规程》所规定的生产工艺及质量标准进行外，还必须严格按照《血液制品管理条例》有关规定执行。凡在中华人民共和国境内从事原料血浆采集、供应、血液制品生产、经营、使用和监督管理的单位和个人，都必须严格执行国务院颁布的《血液制品管理条例》。

*7405 生物制品国家标准品是否由国家药品检验机构统一制备、标化和分发。生

产企业是否根据国家标准品制备其工作品标准。

1.《药品管理法》第三十二条规定：“国务院药品监督管理部门的药品检验

机构负责标定国家药品标准品、对照品”。《中国生物制品规程》的“色很难国务制品国家标准物质制备和标定规程”规定：“生物制品国家标准物质的植被、标定由国家药品检定机构负责。国际标准品、国际参考品由国家药品检定机构向WHO索取，并保管和使用。”“索取国家标准物质应直接向国家药品检定机构申请。国家标准物质系提供给各生物制品生产单位标定其工作标准或其接用于检定。”

2.根据“生物制品国家标准物质制备和标定规程”，生物制品国家标准物质

分为二大类：

（1）国家标准品（Biological Standards），系指用国际参考品标定的，或我

国自行研制的（尚无国际参考品者）用于衡量某一制品效价或毒性的特

定物质，其生物活性以国际单位或以单位表示。

（2）国家参考品（Biological Reference Reagents）系指用国际参考品标

定的，或我国自行研制的（尚无国际参考品者）用于微生物或其产物的鉴定或疾病诊断的生物诊断试剂、生物材料或特异性抗血清，以及用于某些不用国际单位表示的制品定量检定用的特定物质。

（3）新建国家标准物质的研制和标定，一般除国家药品检定机构外，尚需至

少2个有经验的实验室进行协作标定。参加国家标准物质协作标定的单位应采用统一的设计方案，统一的实验方法，统一的记录格式；每个协作标定实验室至少取得5次独立的有效结果，其标定结果须经统计学处理，并报国家药品监督管理部门批准。

7602 生物制品生产用物料是否对供应商进行评估并与之签订较固定合同，以确

保其物料的质量和稳定性。

生物制品 生产用物料，特别是各种含有生物活性物质的原材料和检测

用试剂，应按《中国生物制品主要原辅次阿廖质控标准》，对主要物料供应商进行质量体系评估。在购买签约前，需抽取相应物料进行质量检验，对有些生产所用的牛血清、酶、病毒或细菌培养液（培养基）、蛋白水解液等除质量检测外，还要进行适应性试验。只有供应商所提供的生产用原辅材料质量检验合格，并建立了确保物料质量稳定性的质量体系，才能与之签订较固定的供货合同。同时应进行定期评估和再评估，并建立评估档案和供应商档案。

十、产品销售与回收

[检查要点]

药品销售必须列入管理系统，使销售记录具有可追溯性，必要时能追查并及时

收回已出售的药品。药品退货、收回及处理均应遵循经批准的规程。

十一、投诉与不良反应报告

[检查要点]

应有用户投诉调查处理以及产品潜在质量问题查处的书面规程。应有能迅速、

有效地从市场撤回有质量问题或怀疑有质量问题产品的系统。应指定专门机构/人员，建立相关规程，负责药品质量的投诉和药品不良反应得监察和报告。应建立能够进行不良反应因果分析的组织，有具备专业知识、能区分质量问题与接种反应得技术人员。

详见总则。

十二、自检

[检查要点]

自检时检查、评估企业是否符合GMP的手段，自检应定期进行并对缺陷项进行

整改。

详见总则。

中国医学微生物菌种保藏管理方法

根据中国微生物菌种保藏委员会管理和组织条例的规定，为了加强医学微生物

菌种（以下简称菌种）的保藏管理，特制定本管理办法。

第一条 组织及任务

在卫生部领导下，在中国微生物菌种保藏委员会指导下，设下列医学微生物学菌种保藏管理中心：

中国医学真菌菌种保藏管理中心：由中国医学科学院皮肤病防治研究所负责。

中国医学细菌菌种保藏管理中心：由中国药品生物制品检定所负责。

中国医学病毒菌种保藏管理中心：由中国预防医学科学院病毒学研究所负责。

保藏管理中心的任务是：

（一）负责本门类微生物菌种的选择、收集、鉴定、保藏、交换和供应；

（二）开展菌种分类、鉴定及保藏管理的研究；

（三）组织学术交流和经验交流；

（四）办理国内外菌种交换；

（五）编制保管的菌种目录。

保藏管理中心下设专业实验室，承担全国性的业务工作。专业实验室对其直接领导机构和保藏管理中心负责，并定期向管理中心汇报工作情况。其具体任务是：

（一）负责本专业有关微生物菌种的选择、收集、鉴定、保藏、交换和供应；

（二）承担本专业有关疑难菌种鉴定；

（三）开展有关菌种分类、鉴定、保藏的研究，包括新技术、新方法的研究和应用；

（四）办理对外交流和交换菌种。

各专业实验室科研技术人员的编制和经费由所属主管部门负责。

生物制品生产、检定用的菌种按“生物制品生产、检定用菌种、毒种管理规程”执行，统一由中国药品生物制品检定所办理。

第二条 菌种的分类

菌种的分类根根据其危险性决定（包括实验室感染的可能性，感染后iu发病的可能性，症状轻重及愈后情况，有无致命危险及有效的防止实验室感染方法，用一般的微生物操作方法能否防止实验室感染，我国有否此菌种及曾否引起流行，人群免疫力等情况）。依其危险性程度的大小我国的菌种分为四类。

一类：实验室感染的机会多，感染后发病的可能性大，症状重并能危及生命，缺乏有效的预防方法，以及感染性强，对人群危害性大的烈性传染病，包括国内未发现或虽已发现，但无有效防治方法的烈性传染病菌种。如：

鼠疫耶尔森氏菌、霍乱弧菌（包括EL-tor弧菌）。

天花病毒、黄热病毒（野菌株）、新疆出血热（克里米刚果出血热）病毒、东、西方马脑炎病毒、委内瑞拉马脑炎病毒、拉沙热（Lassa）病毒、马堡（Marburg）病毒、埃波拉（Ebola）病毒、猴疱疹病毒（猴B病毒）。

粗球孢子菌、荚膜组织胞浆菌、杜波氏组织胞浆菌。

二类：实验室感染机会较多、感染后症状较重及危及生命危险，发病后不易治疗对人群危害较大的传染病菌种。如：

土拉弗郎西丝氏菌、布氏菌、炭疽芽胞菌、肉毒梭菌、鼻疽假单胞菌、类鼻疽假单胞菌、麻风分枝杆菌、结核分枝杆菌。

狂犬病病毒（街菌）、森林脑炎病毒、流行性出血性热病毒、国内尚未发现病人，在国外引以脑脊髓及出血热的其他虫媒病毒、等革热病毒、甲、乙型肝炎病毒。

各种立克次体（包括斑疹伤寒、Q热）。

鹦鹉热、鸟疫衣原体、淋巴肉芽肿衣原体。

马纳青霉、北美芽生菌、副球孢子菌、新型隐球菌、巴西芽生菌、烟曲霉、着色霉菌。

三类：仅具一般性危险，能引起实验室感染的机会较少，一般的微生物学实验室采用一般实验技术能控制感染或有对之有效的免疫预防方法的菌种。如：

脑膜炎奈瑟氏菌、肺炎链球菌，葡萄状球菌、链球菌、淋病奈瑟氏菌及其他致病性奈瑟氏菌、百日咳博德特氏菌、白喉棒杆菌及其他致病性棒杆菌、流感嗜血杆菌、沙门氏菌、志贺氏菌、致病性大肠埃希氏菌、小肠结肠炎耶炎森氏菌、空肠弯曲菌、副溶血性弧菌、变形杆菌、李斯特氏菌、铜绿色假单孢菌、气肿疽梭菌、产气荚膜梭菌、破伤风梭菌及其他致病梭菌。

钩端螺旋体、梅毒螺旋体、雅司螺旋体。

乙型脑炎病毒、脑心肌炎病毒、淋巴细胞性脉络丛脑炎病毒以及未列入一、二

类的其他虫媒病毒、新必斯（Sindbis）病毒、滤泡性病毒、流感病毒、副流感病毒、呼吸道合胞病毒、腮腺炎病毒、麻疹病毒、脊髓灰质炎病毒、腺病毒、柯萨奇（A及B组）病毒，艾柯（ECHO）病毒及其他肠道病毒、疱疹类病毒（包括单纯疱疹、巨细胞、EB病毒、水痘病毒）、狂犬病固定毒、风疹病毒。

致病性支原体。

黄曲毒、杂色曲毒、梨孢镰刀菌、蛙类霉菌、放线菌属、奴卡氏菌属、石膏样毛癣菌（粉型）、孢子丝菌。

四类：生物制品、菌苗、疫苗生产用各种减毒、弱毒菌种及不属于上述一、二、三类的各种低致病性的微生物菌种。

对通过分子生物学方法产生的新菌株，应按其原始亲本中的最高类别对待。

不允许进行两个菌株完整基因组的重组试验。

第三条 菌种的收集

（一）中心及各专业实验室根据工作需要，有权向国内有关单位或个人收集和索取所需之菌种，各单位或个人有义务向中心及专业实验室提供所需菌种，以不断充实我国医学菌种的生物资源。

（二）中心及各专业实验室，可根据工作开展情况有组织、有计划地与临床科研防疫部门协作分离、收集、鉴定和筛选菌种，逐步建立我国标准菌种。

（三）任何单位和个人分离、筛选得到具有一定价值的菌种，应及时将该菌种及详细资料送交中心及专业实验室鉴定、复核、保藏。

（四）凡已被选为国家的标准菌种，卫生部委托各医学微生物中心向提供菌种的单位或个人颁发证书，可向有关上级单位申请奖励。

第四条 菌种的保藏

（一）各保藏管理机构保藏的菌种，必须具有该菌种的详细历史及有关实验资料。

（二）各保藏管理机构，对负责保藏国家编号的菌种应采取妥善可靠的方法保存，避免菌种死亡或变异。凡取消某些无继续保藏价值的国家编号菌种应报保藏管理中心批准。

（三）各保藏管理机构，应制定严密的安全保管制度，建账、建卡，并指定专人负责。一、二类及专利菌种应设有专库或专柜单独保藏。

第五条 菌种的供应

（一）一、二类菌种由卫生部指定的保藏管理机构同意供应，其他任何单位或个人不得对国内外办理。

（二）三、四类菌种，除设有专业实验室负责供应所管理的菌种外，未设专业

实验室负责管理的其他菌种均由各有关保藏管理中心供应。

（三）专利菌种供应按专利菌种保藏管理办法执行。

（四）领取菌种必须持有单位正式公函，说明菌种之名称、型别、数量及用途，

向供应单位申请。

（五）索取一、二类菌种时，需经当地省、自治区、直辖市卫生局同意，部队

系统需经省级军区（或军级）卫生主管部门同意。索取一类菌种并需经卫生部批准。

（六）供应菌种时，可酌情收费。

第六条 菌种的使用

（一）使用菌种的单位，需有一定从事微生物工作的条件和设备。菌种应有专人负责管理，建立必要的制度。

（二）使用一类菌种的单位，需经卫生部批准，使用二类菌种的单位需经省、自治区、直辖市卫生局批准。使用单位要有严格的专用隔离实验室和专用下水、消毒、排气过滤及严格的防鼠、防虫设施。进行有关的昆虫试验时，应有相应的防虫及杀虫装置，进行一类菌种实验时，应设有单独隔离区，经上级主管部门呢检查符合要求后，由经过专门训练，有经验的技术人员操作，工作时应有严格的防护措施。凡有疫苗者，工作人员应进行免疫接种，未经免疫接种人员不得进入隔离区及进行菌种操作区。任务完成后应在本单位领导监督下，将菌种销毁。

凡进行菌种的动物实验时，都相应地升一级进行管理，二类按一类，三类按二类管理。

（三）自来水公司、食品加工部门等设置的实验室，如工作需要致病菌时，需经所在省、自治区、直辖市卫生局批准。工作中应有严密的措施以防止污染水源或食品。

（四）使用菌种工作时，如发生严重污染环境或实验室人身感染事故时，应及时处理，并向当地卫生局报告，同时报告卫生部有uan保藏管理中心。

第七条 菌种的领取及邮寄

（一）索取一、二类菌种应事先与供应单位联系，经同意后，一类菌种及二类菌种中的马鼻疽假单胞菌、麻风分枝杆菌，狂犬病病毒（街毒）及出血热病毒等，应派可靠人员向供应单位领取（一类应派二人领取），不得邮寄。

（二）邮寄三、四类及部分二类菌种时，必须按卫生部、邮电部、交通部、铁道部颁布的有关菌毒种邮寄与包装规定的要求办理。

第八条 菌种的对外交流

（一）国内尚未保藏的菌种，需从国外引进时，可由本单位开具清单（包括菌种名称、型别、株名、数量、国别及国外保藏单位名称或个人及其地址），填写中、英文各一式三份，分别送交有关保藏管理中心或专业实验室汇总，统一向国外索取或购买。

（二）从国外引进我国尚未发现或致病性强的医学病原微生物时，应经卫生部批准。

（三）单位或个人从国外交换索取得到的菌种，应将菌种或复制品一份，连同资料送交有关保藏管理中心或专业实验室保藏。

（四）任何单位或个人收到国外菌种后，应在三至六个月内检定完毕，并将结果函寄有关保藏中心，以便及时向卫生部汇报。

（五）国外向我国索取菌种时，可酌情收费。负责供应的单位应及时向有关保藏管理中心申报，并按照国家有关生物资源的法规办理。

（六）对国外保密、专利、一、二类及新发现还未向国外供应过的巨inzhong向国外交换供应时，应经卫生部批准。其他菌种须经省、自治区、直辖市卫生局批准。

第九条

本管理办法经卫生部批准后实施之，修改时同。

微生物和生物医学实验室 生物安全通用准则 General biosafety standard

For microbiological and biomedical laboratories

1.范围

本标准规定了微生物和生物医学实验室生物安全防护的基本原则、实验室的分级、各级实验室的基本要求。本标准为最低要求。

本标准适用于疾病预防控制机构、医疗保健、科研机构。

2.规范性引用文件

下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。

GB 14925-2001 实验动物 环境及设施

GB/T 16803-1997 采暖、通风、空调、净化设备 术语

GB 50073-2001 洁净厂房设计规范

JGJ 71-1990 洁净室施工及验收规范

3.定义

本标准采用下列定义。

3.1 实验室生物安全防护 biosafety protection for laboratories

实验室工作人员所处理的实验对象含有致病的微生物及其毒素时，通过在实验室设计建造、使用个体防护装置、严格遵从标准化的工作及操作程序和规程等方面采取综合措施，确保实验室工作人员不受实验对象侵染，确保周围环境不受其污染。

3.2 微生物危害评估 hazard assessment for microbes

对实验微生物和毒素可能给人或环境带来的危害所进行的评估。

3.3 气溶胶 aerosol

悬浮于气体介质中粒径一般为0.001um~1000um的固体、液体微小粒子形成的胶融状态分散体系。

3.4 生物安全柜 biosafety cabinet

处理危险性微生物时所有的箱形空气净化安全装置。

3.5 I级生物安全柜 class I biosafety cabinet

至少装置一个高效空气过滤对排气进行净化，工作时柜正面玻璃推拉窗打开一半，上部为观察窗，下部为操作窗口。外部空气由操作窗口吸进，而不可能由操作窗口逸出。工作状态时保证工作人员不受侵害，但不保证试验对象不受污染。

3.6 II级生物安全柜 class II biosafety cabinet

至少装置一个高效空气过滤器对排气进行净化，工作空间为经高效过滤器净化的无涡流的单向流空气。工作时正面玻璃推拉窗打开一半，上部为观察窗，下部为操作窗口。外部空气由操作窗口吸进，而不可能由操作窗口逸出。工作状态下遵守操作规程时既保证工作人员不受侵害，也保证实验对象不受污染。

3.7 III级生物安全柜 class III biosafety cabinet

至少装置一个高效空气过滤器对排气进行净化，工作空间为经高效过滤器净化的无涡流的单向流空气。正面上部为观察窗，下部为手套箱式操作口。箱内对外界保持负压。可确保人体与柜内物品完全隔绝。

3.8 物理抑制设备physical containment device

用物理或机械方法防止致病生物逸出的设备。

3.9 高效空气过滤器 HEPA（high efficiency particulate air）filter

在额定风量下，对粒径大于0.3um的粒子捕集效率在99.7%以上及气流阻力在245Pa以下的空气过滤器。

3.10 相对压强 relative pressure

绝对压强减去大气压强之值。

4 实验室生物安全防护的基本原则

4.1 总则

4.1.1 实验室生物安全防护的内容包括安全设备、个体防护装置和措施（一级防护），实验室的特殊设计和建设要求（二级防护），严格的管理制度和标准化的操作程序及规程。

4.1.2 应将每一特定实验室从立项、建设到使用维护的全过程中有关生物安全防护综合措施的内容编入各实验室的生物安全手册中。必须设有专职的生物安全负责人。

4.1.3 生物安全防护实验室根据不同的微生物和防护要求分为四个生物安全防护级别。

4.2 安全设备和个体防护

安全设备和个体防护是确保实验室工作人员不与致病微生物及其毒素直接接触的一级屏障。

4.2.1 生物安全柜是最重要的安全设备，形成最主要的防护屏障。实验室应按要求分别配备I、II、III级生物安全柜。所有可能使致病微生物及其毒素溅出或生产气溶胶的操作，除实际上不可实施外，都必须在生物安全柜内进行。不得用超干净工作台代替生物安全柜。

4.2.2 必要时实验室应配备其他安全设备，如设置配有排风净化装置的排气罩等，或采用其他不使致病微生物逸出确保安全的设备。

4.2.3

4.2.4 必须给实验室工作人员配备必要的个体防护用品。

4.3 实验室设计与建造的特殊要求

包括：实验室选址、平面布置、围护结构、通风空调、安全装置及特殊设备等设计与建造的特殊要求。

4.4 安全操作规程

4.4.1 本标准针对不同等级的生物安全防护实验室所规定的安全操作规程，包括标准的安全操作规程和特殊的安全操作规程（见附录A），必须在各实验室的生物安全手册中明列并加以执行。

4.4.2 针对不同的微生物及其毒素应补充规定相应的特殊安全操作规程，也应在各实验室的生物安全手册中明列并加以执行。

4.5 致病微生物及其毒素在实验室之间的传递

致病微生物及其毒素在实验室之间的传递必须严格按照国家现行有关管理办法执行。

4.6 管理制度

4.6.1 实验室基本管理

4.6.1.1 实验室内的布置和准入

a)在主实验室应合理设置清洁区、半污染区和污染区；

b)非实验有关人员和物品不得进入实验室；

c)在实验室内不得进食和饮水，或者进行其他与实验无关的活动；

d)实验室工作人员、外来合作者、进修和学习人员在进入实验室及其岗位

之前必须经过实验室主任的批准。

4.6.1.2 实验室工作人员的资格和培训

a)实验室的工作人员必须是受过专业教育的技术员。在独立进行工作前还

需在中高级实验技术人员指导下进行上岗培训，达到合格标准，方可开始工作；

b)实验室的工作人员必须被告知实验室工作的潜在危险并接受实验室安

全教育，自愿从事实验室工作；

c)实验室的工作人员必须遵守实验室的所有制度、规定和操作规程；

d)三级和四级生物安全防护实验室的工作人员在开始工作前必须留本底

血清进行有关的检测，以后定期复检。如有疫苗必须进行免疫注射。

4.6.2 实验室特殊管理

为避免和处理源于不安全操作引起的意外事故，必须严格执行以下原则：

4.6.2.1 针对可能的危险因素，设计保证安全的工作程序。

4.6.2.2 事前进行有效的培训恶化模拟训练。

4.6.2.3 对于意外事故要能够提供包括紧急救助或专业性保健治疗的措施，足以应付紧急情况。

4.6.2.4 实验室事故处理：工作人员在操作过程中发生意外，如针刺合切伤、皮肤污染、感染性标本溅及体表和口鼻眼内、衣物污染、污染试验台面等均视为安全事故。应视事故类型等不同情况，立即进行紧急处理。具体措施必须形成书面文件并严格遵守执行。在紧急处理的同事必须向有关专家和领导汇报，并详细记录事故经过和损伤的具体部位和程度等，由专家评估是否需要进行预防性治疗。

4.6.3.5 应填写正式的事故登记表，并按规定报告给国家相应级别的卫生主管部门。

4.7 微生物危害评估

当建设使用传染性或有潜在传染性的实验前，必须进行微生物危害评估。应依据传染性微生物致病能力的程度、传播途径、稳定性、感染剂量、操作时的浓度和规模、实验对象的来源、是否有动物实验数据、是否有有效的预防和治疗方法等诸因素进行微生物危害评估。

4.7.1 通过微生物危害评估确定对象微生物应在哪一级的生物安全防护实验室中进行操作。

4.7.2 根据危害评估结果，制定相应的操作规程、实验室管理制度和紧急事故处理办法，必须形成书面文件并严格遵守执行。

5 实验室的分类、分级及使用范围

5.1 分类

5.1.1 一般生物安全防护 实验室（不使用实验脊椎动物和昆虫）。

5.1.2 实验脊椎动物生物安全防护实验室。

5.2 分级

每类生物安全防护实验室根据所处理的微生物及其毒素的危害程度各分为四级。各级实验室的恶生物安全防护要求依次为：一级最低，四级最高。

5.3 适用范围

5.3.1 一般生物安全防护实验室

5.3.1.1 一般生物安全防护实验室

实验室结构和设施、安全操作规程、安全设备适用于对健康成年人已知无致病作用的微生物，如用于教学的普通微生物实验室等。

5.3.1.2 二级生物安全防护实验室

实验室结构和设施、安全操作规程、安全设备适用于对人或环境具有中等潜在危害的微生物。

5.3.1.3 三级生物安全防护实验室

实验室结构和设施、安全操作规程、安全设备适用于主要通过呼吸途径使人传

染上严重的甚至是致死疾病的致病微生物及其毒素，通常已有预防传染的疫苗。

艾滋病病毒的研究（血清学实验除外）应在三级生物安全防护实验室中进行。

5.3.1.4 四级生物安全防护实验室

实验室结构和设施、安全操作规程、安全设备适用于对人体具有高度的危险性，通过气溶胶途径传播或传播途径不明，目前尚无有效的疫苗或治疗方法的致病微生物及其毒素。与上述情况类似的不明微生物，也必须在四级生物安全防护实验室中进行。待有充分数据后再决定此种微生物或毒素应在四级还是在较低级别的实验室中处理。

5.3.2 实验脊椎动物生物安全防护实验室，其适用微生物范围与同级的一般生物安全防护实验室相同。

6 一般生物安全防护实验室的基本要求

6.1 一级神武安全防护实验室

6.1.1 安全设备和个体防护

6.1.1.1 一般无须使用生物安全柜等专用安全设备。

6.1.1.2 工作人员在实验室应穿工作服，戴防护眼镜。

6.1.1.3 工作人员手上有皮肤破损或皮疹时应戴手套。

6.1.2 实验室设计和建造的特殊要求

6.1.2.1 每个实验室应设洗手池，宜设置在靠近出口处。

6.1.2.2 实验室围护结构内表面应易于清洁。地面应防滑、无缝隙、不得铺设地毯。

6.1.2.3 实验台表面应不透水，耐腐浊、耐热。

6.1.2.4 实验室中的家具应牢固。为易于清洁，各种家具和设备之间应保持一定间隙。应有专门放置生物废弃物容器的台（架）。

6.1.2.5 实验室如有开启的窗户，应设置纱窗。

6.2 二级生物安全防护实验室

6.2.1 安全设备和个体防护

6.2.1.1 可能产生致病微生物气溶胶或出现溅出的操作均应在生物安全柜（II级生物安全柜为宜），或其他物理抑制设备中进行，并使用个体防护设备。

6.2.1.2 处理高浓度或大容量感染性材料均须在生物安全柜（II级生物安全柜为宜）或其他物理抑制设备中进行，并使用个体防护设备。

上述材料的离心操作如果使用密封的离心机转子或安全离心杯，且它们只在生物安全柜中开闭和装载感染性材料，则可在实验室中进行。

6.2.1.3 当微生物的操作不可能在生物安全柜内进行而必须采取外部操作时，为防止感染性材料溅出或雾化危害，必须使用面部保护装置（护目镜、面罩、个体呼吸保护用品或其他防溅出保护设备）。

6.2.1.4 在实验室中应穿着工作服或罩衫等防护服。离开实验室时，防护服必

须脱下并留在实验室内。不得穿着外出，更不能携带回家。用过的工作服应先在实验室中消毒，然后统一洗涤或丢弃。

6.2.1.5 当手可能接触感染材料、污染的表面或设备时应戴手套。如可能发生感染性材料的溢出或溅出，宜戴两副手套。不得戴着手套离开实验室。工作完全结束后方可除去手套。一次性手套不得清洗和再次使用。

6.2.2 实验室设计和建造的特殊要求

6.2.2

6.2.2.2 应设置实施各种消毒方法的设施，如高压灭菌锅、化学消毒装置等对废弃物进行处理。

6.2.2.3 应设置洗眼装置。

6.2.2.4 实验室门宜带锁、可自动关闭。

6.2.2.5 实验室出口应有发光指示标志。

6.2.2.6 实验室宜有不少于每小时3~4次的通风换气次数。

6.3 三级生物安全防护实验室

6.3.1 安全设备和个体防护

6.3.1.1 实验室中必须安装II级或II级以上生物安全柜。

6.3.1.2 所有涉及感染性材料的操作应在生物安全柜中进行。当这类操作不得不在生物安全柜外进行时，必须采用个体防护与使用物理抑制设备的综合防护措

施。

6.3.1.3 在进行感染性组织培养、有可能产生感染气溶胶的操作时，必须使用个体防护设备。

6.3.1.4 当不能安全有效地将气溶胶限定在一定范围内时，应使用呼吸保护装置。

6.3.1.5 工作人员在进入实验室工作区前，应在专用的更衣室（或缓冲间）穿着背开式工作服或其他防护服。工作完毕必须脱下工作服，不得穿工作服离开实验室。可再次使用的工作服必须先消毒后清洗。

6.3.1.6 工作时必须戴手套（两副为宜）。一次性手套必须先消毒后丢弃。

6.3.1.7 在实验室中必须配备有效的消毒剂、眼部清洗剂或生理盐水，且易于取用。可配备应急药品。

6.3.2 实验室设计和建造的特殊要求

6.3.2.1 选址

三级省区安全防护实验室可与其他用途房屋设在一栋建筑物中，但必须自成一区。该区通过隔离门与公共走廊或公共部位相隔。

6.3.2.2 平面布局

a)三级生物安全防护实验室的核心区包括实验间及与之相连的缓冲间。

b)缓冲间形成进入实验间的通道。必须设两道连锁门，当其中一道门打开

时，另一道门自动处于关闭状态。如使用电动连锁装置，断电时两道门均必须处于可打开状态。在缓冲间可进行二次更衣。

c)当实验室的通风系统不设自动控制装置时，缓冲间面积不宜过大，不宜

超过实验间面积的八分之一。

d)II级或III级生物安全柜的安装位置应远离实验间入口，避开工作人

员频繁走动的区域，且有利于形成气流由“清洁”区域流向“污染”区域的气流流型。

6.3.2.3 维护结构

a)实验室（含缓冲间）围护结构内表面必须光滑耐腐蚀、防水，以易于消

毒清洁。所有缝隙必须加以可靠密封。

b)实验室内所有的门均可自动关闭。、

c)除观察窗外，不得设置任何窗户。观察窗必须为密封结构，所有玻璃为

不碎玻璃。

d)地面应无渗漏，光洁但不滑。不得使用地砖和水磨石等有缝隙地面。

e)天花板、地板、墙间的交角均为圆弧形且可靠密封，施工时应防止昆虫

和老鼠钻进墙脚。

6.3.2.4 通风空调

a)必须安装独立的通风空调系统以控制实验室气流方向和压强梯度。该系

统必须确保实验室使用时，室内空气除通风排风管道经高效过滤排出外，不得从实验室的其他部位或缝隙排向室外；同时确保实验室内的气流由“清洁”区域流向“污染”区域。进风口和排风口的布局应使实验区内的死空间降低到最小程度。

b)通风空凋系统为直排系统，不得采用部分回风系统。

c)环境参数：相对于实验室外部，实验室内部保持负压。实验间的相对压

强以-30Pa~-40Pa为宜，缓冲间的相对压强以-15Pa~-20Pa为宜。实验室内的温、湿度以控制在人体舒适范围为宜，或根据工艺要求而定。实验室内的空气洁净度以GB50073-2001《洁净厂房设计规范》中所定的七级至八级为宜。实验室人工照明应均匀，不眩目，照度不低于500lx。

d)为确保实验室内的气流由“清洁”区域流向“污染”区域，实验室内不

应使用双侧均匀分布的排风口布局。不应采用上送上排的通风设计。由生物安全柜排出的经内部高效过滤得空气可通过系统的排风管直接排至大气，也可送入建筑物的排风系统。应确保生物安全柜与排风系统的压力平衡。

e)实验室的进风应经初、中、高三级过滤。

f)实验室的排风必须高效过滤或加其他方法处理后，以不低于12m/s的速

度直接向空中排放。该排风口应远离系统进风口位置。处理后的排风也可排入建筑物的排风管道，但不得被送回到该建筑物的任何部位。

g)进风和排风高效过滤器必须安装设在围护结构上的风口里，以避免污染

风管。

h)实验室的通风系统中，在进风和排风总管处应安装气密型调节阀门，必

要时可完全关闭以进行室内化学熏蒸消毒。

i)实验室的通风系统中所使用的左右部件均必须为气密型。所使用的恶高

效过滤器不得为木框架。

j)应安装风机启动自动联锁装置，确保实验室启动时先开排风机后开送风

机。关闭时先关送风机后关排风机。

k)不得在实验室内安装分体空调器。

6.3.2.5 安全装置及特殊设备

a)必须在主实验室内设置II级或III级生物安全柜。其安装位置应满足

6.3.2.5d)中的要求。

b)连续流离心机或其他可能生产气溶胶的设备应置于物理抑制设备之中，

该装置应能将其可能生产的恶气溶胶经高效过滤器过滤后排出。在实验室内所必须设置的所有其他排风装置（通风橱、排气罩等）的排风均必须经过高效过滤器过滤后方可排出。其室内布置应有利于形成气流由“清洁”区域流向“污染”区域的气流流型。

c)实验室中必须设置不产生蒸汽的高压灭菌锅或其他消毒装置。

d)实验间与外部应设置传递窗。传递窗双门不得同时打开，传递窗内应设

物理消毒装置。感染性材料必须放置在密闭容器中方可通过传递窗传递。

e)必须在实验室入口处的显着位置设置压力显示报警装置，显示实验间和

缓冲间的负压状况。当负压指示偏离预设区间必须能通过声、光等手段向实验室内外的人员发出警报。可在该装置上增加送、排风高效过滤器气流阻力的显示。

f)实验室启动工作期间不能停电。应采用双路供电电源。如难以实现，则

应安装停电时可自动切换的后备电源或不间断电源，对关键设备（生物安全柜、通风橱、排气罩以及照明等）供电。

g)可在缓冲间设洗手池。洗手池的供水截门必须为脚踏、肘动或自动开关。

洗手池如设在主实验室，下水道必须与建筑物的下水管线分离，且有明显标志。下水管必须安装防回流装置。不得在实验室内安设地漏。

6.3.2.6 其他

a)实验台表面应不透水，耐腐蚀、耐热。

b)实验室中的家具应牢固。为易于清洁，各种家具和设备之间应保持一定

间隙。应有专门放置生物废弃物容器的台（架）。家具和设备的边角和突出部位应光滑、无毛刺，以圆弧形为宜。

c)所需真空泵应放在实验室内。真空管线必须装置在线高效过滤器。

d)压缩空气等钢瓶应放在实验室外。穿过围护结构的管道与围护结构之间

必须用不收缩的密封材料加以密封。气体管线必须装置在线高效过滤器和防回流装置。

e)实验室中应设置洗眼装置。

f)实验室出口应有发光指示标志。

g)实验室内外必须设置通讯系统。

h)实验室内的实验记录等资料应通过传真机发送至实验室外。

6.4 四级生物安全防护实验室

四级生物安全防护实验室分为：安全柜型实验室和穿着正压服型实验室。在安全柜型实验室中，所有微生物的操作均在III级生物安全柜中进行。在穿着正压服型实验室中，工作人员必须穿着特殊的正压服式保护服装。

6.4.1 安全设备和个体防护

6.4.1.1 在实验室中所有感染性材料的操作都必须在III级生物安全柜中进行。如果工作人员穿着整体的由生命维持系统供气的正压工作服，则相关操作可在II级生物安全柜中进行。

6.4.1.2 所有工作人员进入实验室时都必须换上全套实验室服装，包括内衣、内裤、衬衣或连衫裤、鞋和手套等。所有这些实验室保护服在淋浴和离开实验室前均必须在更衣室脱下。

6.4.2 安全柜型实验室设计和建造的特殊要求

6.4.2.1 选址。实验室应建造在独立的建筑物内或实验室建筑物内独立的区域。

6.4.2.2 平面布局

a)实验室核心区域由安放有III级生物安全柜的房间（安全柜室）和进

入通道组成。进入通道前至少有三个部分，依次为外更衣室、淋浴室和内更衣室。任何相邻的门之间都有自动连锁装置，防止两个相邻的门被同时打开。对于不能从更衣室携带进出安全柜室的材料、物品和器材，应在安全柜室墙上设置具有双门结构的高压灭菌锅，并有浸泡消毒槽、熏蒸室或带有消毒装置的通风传递窗，以便进行传递或消毒。必须设置带气闸室的紧急出口通道。

b)安全柜室四周可设置缓冲区，为环形走廊或缓冲房间，属核心区域的

一部分。缓冲区建设要求同三级生物安全防护实验室。

6.4.2.3 围护结构

a)安全柜房间和内侧更衣室的墙壁、地板、天花板等内部应形成密封的

内壳。地板应整体密封，墙角成圆弧形。房间的内表面应防水、耐腐蚀。结构内所有的缝隙都应密封。尽量减小安全柜室和内更衣室门周围的缝隙并可密封以利消毒。安全柜室地板上所有的下水管 都直接通往液体消毒系统，下水道口和其他服务管线安装高效过滤器并防止害虫进入。

b)进入实验室的门可自动关闭，可以上锁。所有在实验室内外传递物品

的设备都必须为双开门结构，两门事件也必须有自动连锁装置。

c)任何窗户都要求防破碎并密封。

d)在实验室的墙洞上安装用于对III级上午安全柜和安全柜室传递出来

的物品进行消毒的双开门高压灭菌锅。其外门在实验室外开启。缝隙必须良好密封。

6.4.2.4 通风空调

a)必须安装精心设计建造的直排式通风系统。该系统进风和排风设计应

确保定向的气流由最小危险区流向最大潜在危险区。进风口和排风口的布局使实验区内的死空间降低到最小程度。

b)必须监测相邻区域的压差和气流流向，并安装报警器。在外更衣室的

入口处安装压强仪表盘，显示和监测实验室内各区的压强或压差和进风、排风的风量。

c)必须设计安装通风系统的自动控制和警报装置以确保实验室内不出现

正压并保持各房间压强和压差正常。III级生物安全柜的排风必须直接与排风管道相连。排风管道必须单独设置，不得与建筑物排风系统相连。

d)环境参数：安全柜室必须保持负压程度最高，其相对压强不得高于

-60Pa；安全柜室、内更衣室、淋浴室和外更衣室的相对压强依次增高，相邻房间之间应有压差，保持在10~15Pa之间。核心区域的空气洁净度以七级至八级为宜。实验室人工照明应均匀，不眩目，照度不低于500lx。

e)进风为三级过滤系统，最后一级必须经过高效过滤器过滤。

f)来自整个核心区域的排风必须连续经过两个高效过滤器处理。排风口

应远离实验室区和进风口。

g)进风和排风高效过滤器必须安装在实验室各房间设在围护结构上的风

口里， 以避免污染风管。高效过滤器风口结构必须在更换高效过滤器之前实现就地消毒。或采用可在气密袋中进行更换的过滤器结构，以后再对高效过滤器进行消毒或焚烧。每台高效过滤器安装前后必须进行检测，运行后每年也必须进行一次检测。

6.4.2.5 安全装置及特殊设备

a)安全柜室必须设置III级生物安全柜。

b)高压灭菌锅的门必须自动控制，只有在灭菌循环完成后，其外门方可

开启。

c)必须提供双开门的液体浸泡槽、熏蒸消毒室或用于消毒的通风气闸室，

对来自III级生物安全柜和安全柜室的不能高压消毒的物品进行消毒，使其安全进出。

d)如果有中央真空管线系统，不应在安全柜室以外的空间使用。在线的

高效过滤器尽可能接近每个使用点或截门处。滤器应易于现场消毒或更换。其他通往安全柜室的气、液管线要求安装保护装置以防止回流。

e)自内更衣室（含卫生间），安全柜室水池下水，地漏以及高压消毒室和

其他来源流出的液体在排往下水道之前，必需经过消毒，最好用加热消毒法。地漏必须有充满对被实验传染性物质有效的化学消毒剂的水封，它们直接通往液体消毒系统。下水道口和其他服务管线均应安装高效过滤器。自淋浴室和外更衣室、厕所排出的液体可以不经过任何处理直接

排到下水道中。对液体废弃物的消毒效果必须经过证实。

f)必须为实验室的核心区（安全柜室、内更衣室、淋浴室u和外更衣室）

的通风系统、报警器、照明、进出控制和生物安全柜设置可以自动启动的紧急电源。

6.4.2.6 其他

a)工作台表面应无缝或为密封的表面。应不透水，耐腐蚀、耐热。

b)实验室的家具应简单，为开放结构，且牢固。实验台、安全柜和其他

设备之间留有空间以便能够清理和消毒。椅子和其他设施表面应铺上非纤维材料使之容易消毒。家具和设备的边角和突出部位应光滑、无毛刺，以圆弧形为宜。

c)在安全柜室、内外更衣室近门处安装非手动操作的或自动洗手池。

d)实验室与外部必须设有通讯系统，宜设闭路电视系统。

e)实验室内的实验记录等资料必须通过传真机发送至实验室外。

6.4.3 穿着正压服型实验室设计和建造的特殊要求

6.4.3.1 选址：实验室应建造在独立的建筑物内或实验室建筑物内独立的区

域。

6.4.3.2 平面布局

a)实验室核心区域由安放有II级生物安全柜的房间（主实验室）和进入

通道组成。进入通道包括更衣区和消毒区。更衣区依次为外更衣室、淋浴室和内更衣室。消毒区为化学淋浴室，工作人员离开主实验室时首先经过化学淋浴消毒正压防护服表面。核心区任何相邻的门之间都有自动连锁装置，防止两个相邻的门被同时打开。对于不能从更衣室携带进出主实验室的材料、物品和器材，应在主实验室墙上设置具有双门结构的高压灭菌锅、浸泡消毒槽、熏蒸室或带有消毒装置的通风传递窗，以便进行传递或消毒。必须设置带气闸室的紧急出口通道。b)同本标准6.4.2.2b)中的要求。

6.4.3

6.4.3.4 通风空调

a)实验区必须保持负压程度最高，其相对压强不得高于-80Pa；实验区、

化学消毒淋浴室、内更衣室、淋浴室和外更衣室的相对压强依次增高，相邻房间之间保持10Pa~15Pa的压差。核心区域的空气洁净度以七级至八级为宜。b)除以上述条款外，其他与本标准6.4.2.3中各款的要求相同。

6.4.3.5 安全装置及特殊设备

a)主实验室必须设置至少为II级的生物安全柜。

b)进入实验室的工作人员必须穿着正压防护服，由高效过滤器提供保护

的生命支持系统供给呼吸用气。生命支持系统包括提供超量呼吸气体的正压供气装置，报警器和紧急支援气罐。工作服内气压相对周围环境为

持续正压。必须为生命支持系统设置自动启动的紧急电源。c)除上述条款外，其他与本标准6.4.2.5中各款的要求相同。

6.4.3

7 实验脊椎动物生物安全防护实验室

7.1 在设计实验脊椎动物安全防护实验室时必须同时满足标准中相应级别生物安全防护实验室和GB14925-2001《实验动物环境及设施》中的要求。

7.2 在设计实验脊椎动物生物安全防护实验室时必须充分考虑动物活动本身产生的危险（如产生气溶胶，撕咬抓挠对人的危害等），并在安全操作规程、安全设备和个体防护、实验室设计建设方面采取必要措施。

7.3 使用实验脊椎动物的生物安全防护实验室必须与一般动物繁殖设施实施物理隔离。

7.4 使用实验脊椎动物生物安全防护实验室中的动物必须置于带有净化通风装置的负压箱笼系统内。

7.5 四级实验脊椎动物生物安全防护实验室中的动物，在安全柜型实验室中必须置于III级生物安全柜中；在穿着正压服型实验室中，工作人员必须穿着正压服，动物则必须置于带有净化通风装置的负压箱笼系统内。

8 生物危险标志使用

8.1 生物危险标志

8.2生物危险标志的使用

8.2.1 在二级以上的生物安全防护实验室的入口明显位置贴有生物危险标志，并表明级别。

8.2.2 所有盛装传染性物质的容器表面明显位置处必须贴有生物危险标志，并按所在生物安全防护实验室的级别表明相同的级别。

9 新建三级和四级生物安全防护实验室的验收和现有生物安全防护实验室的检测

9.1 新建三级和四级生物安全防护实验室的验收和启用。分为工程竣工验收、专家组验收和批准启用三个阶段。工程竣工验收后，新建的三级和四级生物安全防护实验室必须先由专家组进行验收，并提出验收报告，然后经有关主管部门批准后方可启用。

9.1.1 专家组验收

专家组验收时必须进行文件审查、现场实地验收检查和对工作人员的抽查考核，并提出验收报告。

9.1.1.1 专家组验收时必须审查的文件

a)立项报告和相关文件；

b)实验微生物危害评估报告；

c)设计任务书、设计说明和设计图纸。如已纳入基建项目，基建程序所

要求必备的其他文件；

d)可部分参照JGJ 71-1990洁净室施工及验收规范进行竣工验收和检测报告；

e)第三方检测报告，包括各房间压差、洁净度、噪声和排风高效空气过滤器检漏等；

f)实验室使用和操作技术规程；

g)实验室管理制度；

h)实验微生物操作规程（每种一份）；

i）紧急情况处理规程；

j)工作人员（含本人签字）登记表；

k)实验室内仪器登记表；

l)工作 人员培训记录；

m)工作人员体检（含血清检查）和免疫接种登记表；

以上（f~m）各项应汇总装订成一册，封面标题为“生物安全手册”。登记表和记录部分应留有足够空间供后续之用。

n)实验室使用登记本（工作日志）

o）紧急情况登记和处理记录本。

9.1.1.2 实验室工作人员抽查考核。

在验收过程中应对工作人员以口试或笔试的形式进行抽查，抽查人数不得少于工作人员总数的四分之一。

9.2 现用三级和四级生物安全防护实验室和II级生物安全柜的检测

9.2.1 现用三级和四级生物安全防护实验室的围护结构、通风系统（含更高效过滤器）维修后，以及生物安全柜移动或检修后，必须进行重新检测（含生物安全柜）。检测根据本标准和JGJ 71-1990的要求和设计任务书的指标进行。

9.2.2 现用三级和四级生物安全防护实验室启用后每年进行一次年度检测。

9.2.3 各级生物安全防护实验室中使用的II级生物安全柜必须每年进行一次年度现场检测（见附录B）。

10 现用三级和四级生物安全防护实验室的使用和维护

10.1 现用三级和四级生物安全保护实验室的使用和维护必须按本标准和实验室生物安全手册的要求进行。

10.2 对已通过验收的实验室中与生物安全有关的设施和设备不能擅自进行改动。

10.3 如确需变更实验室的结构和设备，必须经有关专家论证和主管部门批准。

10.4 实验室应由专业人员在保证安全的条件下进行应急和定期检修与保养。

生物制品命名规程

Requirements for Terminology of Biologics

1 生物制品的定义

生物制品是应用普通的或以基因工程、细胞工程、蛋白质工程、发酵工程等生物技术获得的微生物、细胞以及各种动物和人源的组织和液体等生物材料制备，用于人类疾病预防、治疗和诊断的药品。目前，我国人用生物制品包括外诊断制品以及其他活性制剂（包括毒素、抗原、变态反应原、单克隆抗体、重组DNA产品、抗原一抗体复合物、免疫调节剂、微生态制剂等）。

2 生物制品的种类

根据各种制品的组成及用途分类如下。

2.1 疫苗（Vaccines）

2.1.1 细菌类疫苗（Bacterial Vaccines）

由有关细菌、螺旋体或其衍生物制成的减毒活疫苗、灭活疫苗、重组DNA疫苗、亚单位疫苗等，如卡介苗、伤寒Vi多糖疫苗、破伤风疫苗（类毒素）等。

2.1.2 病毒类疫苗（Viral Vaccines）

由病毒、衣原体、立克次体或其衍生物制成的减毒活疫苗、灭活疫苗、重组DNA疫苗、亚单位疫苗等，如麻疹减毒活疫苗、重组（CHO细胞）乙型肝炎疫苗等。

2.1.3 联合疫苗（Combined Vaccines）

由两种或两种以上疫苗抗原原液配制成的具有多种免疫原性的灭活疫苗或活

疫苗，如百日咳、白喉、破伤风联合疫苗（DTP），麻疹、流行性腮腺炎、风疹联合疫苗（MMP）等。

2.2 抗毒素及免疫血清（Antitoxin and Antisera）

由特定抗原免疫动物所得血浆制成的抗毒素或免疫血清，如破伤风抗毒素、抗狂犬病血清等，用于治疗或被动免疫预防。

2.3 血液制品（Blood Products）

由健康人的血浆或特异免疫人血浆分离、提纯或由重组DNA技术制成的血浆蛋白组成或血细胞组分制品，如人血白蛋白、人免疫球蛋白、人凝血因子（天然或重组的）、红细胞浓缩物等，用于诊断、治疗或被动免疫预防。

2.4 细胞因子（Cytokines）及重组DNA产品（Recombinant DNA Products）

由健康人血细胞增殖、分离、提纯或由重组DNA技术制成的多肽类或蛋白质类制剂，如干扰素（IFN）、白细胞介素（IL）、集落刺激因子（CSF）、红细胞生成素（EPO）等，用于治疗。

2.5 诊断制品（Diagnostic Reagents）

2.5.1 体外诊断制品

由特定抗原、抗体或有关生物物质制成的免疫诊断试剂或诊断试剂盒，如伤寒、副伤寒、变形杆菌（OX19、OX2、OXK）诊断菌 液，沙门氏菌属诊断血清，HBsAg酶联免疫诊断试剂盒等，用于体外免疫诊断。

2.5.2 体内诊断制品

由变态反应原或有关抗原材料制成的免疫诊断试剂，如卡介菌纯蛋白衍生物（BCG-PPD）、布氏菌纯蛋白衍生物（RB-PPD）、锡克试验毒素、单克隆抗体等，用于体内免疫诊断。

2.6 其他制品（Else Products）

由有关生物材料或特定方法制成，不属于上述5类的其他生物制剂，用于治疗或预防疾病。如治疗用A型肉毒毒素制剂、微生态制剂和卡介菌多糖、核算制剂等。

3 生物制品的命名

3.1 命名原则

参照中国生物制品传统命名及WHO规程命名方式，制品的基本名称一般可由三个部分组成。第一部分列出（有时不列）制法或群及型别（如重组、A群）等 冠语；第二部分列出制品所针对的疾病（如麻疹、伤寒等）或微生物名（如沙门氏菌等），或组成成分（如Vi多糖）或人名（如卡介、锡克等），或起始材料（如人血、CHO细胞等）；第三部分列出制品种类（如疫苗、抗毒素、诊断试剂等）。基本名称的模式简列如下：

（制法或群、型别）+（病名、微生物名、组分、人名或材料）+ （品种名）

以上仅为一般原则。对各个具体制品的命名，尚需参照以下方法及各类制品命名举例拟定，并可按制品特点对第一、二部分作出取舍。

3.2命名方法

3.2.1 制造方法

3.2.1.1 制法一般不标明。但一种制品存在多种制造方法者需标明，如重组DNA者，则加“重组”，以与非重组制品相区别。如麻疹减毒活疫苗、重组（酵母）乙型肝炎疫苗、人血白蛋白（低温乙醇蛋白分离法）。

3.2.1.2 液体制剂者不需加“液体”二字，如同时有液体制剂和冻干 制剂者，冻干制剂应加“冻干”二字，如只有冻干制剂，按国际惯亦可加“冻干”二字。如钩端螺旋体疫苗、伤寒Vi多糖疫苗、冻干人凝血因子VIII。

3.2.2 用法与用途

3.2.2.1 一般用法均不要标明。特定途径是用者必须标明。如皮内注射用卡介苗、静脉注射用人免疫球蛋白（pH4）。

3.2.2.2 预防用制品均不要在基本名称前标明预防用。

3.2.2.3 细菌类治疗用制品可在基本名称后加“制剂”二字。如治疗用短棒状杆菌制剂、双歧杆菌活菌制剂。

3.2.2.4 成人用或青少年用制品，可在基本名称后用括号注明。

3.2.2.5 预防人、畜共患疾病的同名同型制品应标明人用，以与兽用制品相区别。

3.2.2.6 体内诊断用制品一般不加诊断字样。如结核菌素纯蛋白衍化物（TB-PPD、锡克试验毒素。

3.2.3 多联、多价与群、型

3.2.3.1 一种制剂包含几个不同抗原成分的制品，应于制品种类前加“联合”二字。如吸附无细胞百日咳、白喉、破伤风（DTPa）联合疫苗，麻疹、腮腺炎、风疹（MMR）联合疫苗。

3.2.3.2 一种制剂包含同一制品的不同群、型别者，应与制品种类前加“多价或n价”字样，并加括号注明群、型名称。如双价肾综合征出血热灭活疫苗。

3.2.4 品种前加形容词

为进一步阐明制品的性质，必要时在基本名称的品种前加灭活、活、纯化等形容词。如麻疹减毒活疫苗、乙型脑炎灭活疫苗、I型肾综合征出血热纯化疫苗。

3.3 新生物制品名称、商品注册名称及其他

新生物制品的命名应参考上述原则及方法。各制品的商品注册名称由生产单位自定，并申报国家赝品管理当局。制品译名一律使用英语。

4 有关生物制品规程的术语及用于

为统一规程用语及术语，参照中国GMP、WHO规程及WHO《生物制品规程词汇》制定《生物制品规程部分术语及用语的含义》作为附录。

附录：生物制品规程部分术语及用于的含义

生产（制造）（Production, Manufacturing） 药品、生物制品生产（制造）过程中的全部操作步骤。。

生产单位（Production Unit，Manufacturer） 通指生产（制造）药品、生物制品的研究所、企业或公司等单位。

国家药品管理当局（NCL，National Control Authority） 主管药品、生物制品质量标准、质量保证和质量检验与监督的国家权威职能机构。

国家药品检定机构（NCL，National Control Laboratory） 隶属于NCA，负责对国产及进口药品、生物制品进行质量检验、质量控制和质量监督的国家专业机构。

药品（Pharmaceutical Products） 指用于预防、治疗、诊断人的疾病，有目的地调节人的生理机能，并规定有适应症、用法和用量的物质，包括药材、中药饮片、中成药、化学原料药及其制剂、抗生素、生化药品、放射性药品、血清、疫苗、血液制品和诊断药品等。含义详见《药品生产质量管理规范》（1992）第七十六条。

生物制品（Biological Products, Biological Substances） 含义详见本版规程通则《生物制品命名规程》。

疫苗（Vaccine） 通指用于免疫接种的病毒类疫苗（原称疫苗）、细菌类疫苗（原称菌苗或类毒素）。如麻疹减毒活疫苗、 A群脑膜炎球菌多糖疫苗、吸附破伤风疫苗等。

联合疫苗（Combined Vaccine） 指两种或两种以上疫苗原液按特定比例配合并加入适量吸附剂或稳定剂制成的具有多种免疫原性的疫苗。如白喉、破伤风联合疫苗，百日咳、白喉、破伤风联合疫苗、麻疹、流行性腮腺炎、风疹联合疫苗等。

二价疫苗及多价疫苗（Bivalent Vaccine; Polyvalent Vaccine） 由单一型（或群）抗原成分组成的疫苗通称单价疫苗。由二个或二个以上同一种但不同型（或群）抗原合并组成的含有二价或多价抗原成分的一种疫苗，则分别称为二价疫苗或多价疫苗。

重组DNA制品（Recombinant DNA Products, rDNA Product） 将分离提取得可表达有免疫原性或治疗性物质的目的基因（DNA）插入适宜的质粒载体，尔后导入选定的受体细胞（哺乳动物的、酵母的、大肠杆菌的或昆虫的）中进行增殖，由培养分泌物或细胞破碎物中提取精制目的基因产物，制成用于预防、治疗或诊断的生物制品称重组DNA制品，简称重组制品（此类制品原称基因工程制品）。

血液制品（Blood Products） 由健康人的血浆或特异免疫人血浆分离、提纯或由重组DNA技术制成的血浆蛋白组分或血细胞组分制品，如人血白蛋白、人免疫球蛋白、人凝血因子（天然或重组的）、红细胞浓缩物等，用于诊断、治疗或被动免疫预防。

国家标准品（Biological Standards） 系用WHO正式颁布的标准品标定国家或某一实验室的生物标准品，经过协作研究和检定，准确标明国际单位（IU），其稳定性高，并经国家药品管理当局批准，成为国家生物标准品（National Biological Standards）。

国家参考品（Biological Reference Reagents） 一般为生物学诊断试剂或诊断用生物物质，或用于鉴定微生物及其衍生物或诊断疾病的高度特异血清。这些生物参考品未经定其国际单位，一般只用于鉴别试验，不用于活性或效价的定量测定，然而，某些参考品（例如用于麻疹疫苗滴定或类毒素絮状单位测定的参考品）

用于定量测定。国际生物参考品由WHO分发；国家生物参考品由国家药品管理当局认可和分发。

物料（Materials） 泛指原料、辅料、单一收获物（液）、原液、中间产品、半成品、包装材料等。

原料（Raw Materials, Source Materials） 药品、生物制品生产过程中使用的所有投入物料，包括生物材料和化学材料，辅料除外。

辅料（Additives, Supplement Materials） 指生产药品、生物制品调配处方时所用的赋形剂和附加剂。

包装材料（Packaging Materials） 指成品内外包装物料、标签、防伪标志和使用说明。

血液（或称全血）（Blood，Whole Blood） 采集于含有抗凝剂溶液中的血液。抗凝溶液中可含或不含营养物（如葡萄糖或腺嘌呤等）。

血浆（Plasma）血液采集于含有抗凝剂的接收容器中，分离血细胞后保留的液体部分；或在单采浆过程中抗凝血液经连续过滤或离心分离后的液体部分。

单采血浆术和单采细胞术（Plasmapheresis and Cytapheresis） 用物理学方法由全血分离出血浆或一种或多种血细胞组分，并将其余组分回输给供血员的操作技术。

载体（Carrier） 系一种通常为蛋白质的分子。将其作为载体，使另一微生物多糖以化学方法连接其上，以诱生T-细胞免疫应答，改善多糖的体液免疫应答。

载体（DNA）（Vector） 系一种DNA片段，它可在宿主细胞内引致自身复制，其他DNA分子也可与之连接扩增。很多载体是细菌质粒，在某些情况下，一种载体在导入细胞后可与宿主细胞染色体整合，并在宿主组织生长和繁殖过程中保持其模式。

质粒（Plasmid） 系一种能自主复制的环状额外染色体DNA元件。它通常携带一定数量的基因，其中有些基因可授予抗生素的抗性，该抗性常用于判断生物体是否含有此种质粒，从而识别生物体。

减毒株（Attenuated Strains）一种细菌或病毒，其对特定宿主的毒力已被适当减弱或已消失。

原始种子批（Primary Seed Lot） 一定数量的已验明其来源、历史和生物学特性并经临床研究证明其安全性和免疫性良好的病毒株（或菌株）或用于制备原疫苗 （Original Vaccine）的活病毒（或菌体）悬液。该悬液应加工为单一批，以确保其组成均一，并经充分鉴定。原始种子批用于制备主种子批。

原疫苗（Original Vaccine）指按生产单位技术规范制备的疫苗，在临床试验中使安全和有免疫原性的。

主种子批（Master Seed Lot） 一定数量的来自原始种子批地病毒株（或菌株）或用于制备原疫苗（Original Vaccine）的活病毒（或菌体）悬液。该悬液应加工为单一批，以确保其组成均一，并经全面鉴定。主种子批用于制备疫苗生产用的工作种子批。

工作种子批（Working Seed Lot） 按NCA批准的方法，从主种子批传代而得

到的活病毒或细菌。工作种子批用于生产疫苗。

细胞株（Cell Strains） 系复制能力有限的细胞群。该细胞群接种于实验动物时不能产生肿瘤，并具有来源组织的胞核性和贴壁细胞依赖性。

细胞库（Cell Bank） 系用来培养生产连续多批制品的细胞系统，该细胞系来源于经充分鉴别和证明无外源因子的一个原始细胞库（Primary Cell Bank ,PCB）和一个主细胞库（Master Cell Bank，MCB）。从主细胞库中取一定数量容器的细胞制备工作细胞库。关于有限传代次，应验证超过常规生产所到达的有效传代次或群体倍增数。

原始细胞库（Primary Cell Bank ,PCB） 一定量经过充分鉴定的人、动物或其他来源的细胞；源自单一组织或细胞分装于容器内，组成应均一，冻存于-130摄氏度或以下，其中一支（瓶）或多支（瓶）可用于制备主细胞库（Master Cell Bank，MCB）。

主细胞库（Master Cell Bank，MCB） 经过充分鉴定一定量的人、动物或其他

来源且保存适宜的细胞，一般是由原始细胞库（Primary Cell Bank）的细胞制备而成，分装于容器内，组成应均一，保存于-130摄氏度或以下，通常用于制备工作细胞库（Working Cell Bank, WCB）。

工作细胞库（Working Cell Bank, WCB） 由有限传代水平的主细胞库制备而来

的均一性细胞悬液，分装适宜体积于多个容器中，适当保存，常冻存于-130摄氏度或以下，其中一支（瓶）或多支（瓶）可用于生产。所有容器处理相同，其中一支（瓶）或多支（瓶）一旦由贮存库中移出后，不得返回原种子贮存库中。实际上，细胞种子是通过亚培养扩增至一定代次（或适宜的群体倍增数）后，由制造单位选

定并由国家药品管理当局批准。此细胞合并后分装于安瓿，并低温保存于WCB。

细胞系（Cell Line） 系由第一次亚培养或由系列传代培养中任何阶段制备的

细胞群（非原始培养细胞）。该细胞群通常是非均质的。

传代细胞系（Continuous Cell Lines, Established Cell Lines） 系在体外

能无限繁殖的细胞群，不具有来源组织的胞核性和贴壁细胞依赖性。

外源因子（Adventitious Agents, Extraneous agents） 存在于接种物，细胞

基质及（或）生产制品所用的原材料及制品中的污染物，包括细菌、真菌、支原体和外源性病毒。

原始细胞培养物（Primary Cell Culture） 直接由组织制备的细胞培养物。

单一收获物（Single Harvest） 在单一轮生产或一个连续工时中，用同一病毒

或细菌株接种于基质（一组动物或一批细胞或一批培养基）并一起培养、收货的一定量病毒 或细菌悬液、病毒或其他目的生物物质。

原液（Bulk） 系指用于制造最终配制物（Final Formulation）或半成品（Final

Bulk）的均一物质。由一次或多次单一收获物而得到，一般需要纯化并可能配制一批或多批半成品。如属微生物，通常视为原悬液（Bulk Suspension）。如原液已浓缩，经稀释成为半成品。对于多价制品（如三价脊灰疫苗），原液是由单价原液配制而成。

半成品（Final Bulk） 由一批或多批原液（有效期相同或相近的）合并配制的、

组成均一的并且是无菌的完工中间制品，分装于一个或多个中间容器中。半成品可分装至最终容器。

分装批（Filling Lot，Final Lot） 由同一批半成品在同一工时内分装（或

冻干）、密封于最终容器中的分装后制品。在分装（或冻干）过程中，其单支（瓶）可能污染的机会是均等的。在同一冻干机的为一个分装批或亚批。

批（Lot ,Batch） 在同一生产周期中，用同一批原料、同一方法生产出来的恶

一定数量的一批制品，在规定限度内，它具有同一性质（均一性）和同一质量。

亚批（Sub-lot） 一批均一的半成品分装于若干个中间容器中，即成为若干个

亚批，尔后再分装于最终容器；或一批均一的半成品，通过若干个分装机分装于最终容器，即成为若干个亚批。故亚批是分装批的一部分。

批号（Lot No.） 系用于识别产品“批”的标志，常用一组数字或字母加数字

表示，此数字常用以反映年、月、日。

亚批号（Sub-Lot No.） 系用于识别“亚批”的标志，常在批号数字后加-1，

-2，-3等表示。

成品（Final Products） 半成品分装（或经冻干）、密封于最终容器后，再经

目检、贴签、包装，并经全面检定合格，签发上市的制品。

失效周期（Expiry Date） 指在特定条件下保存的制品，到此日期后一般已不

可能继续符合相应规程的各项要求，特别是效价要求，故不应继续使用。失效日期应注明在成 品容器标签上。并按国家药品管理当局许可的有效期（Validity Period）确定天数、月数或年数。

有效周期（Validity Period） 指由国家药品管理当局许可用以签发制品供临

床使用的最大有效期限。该效期是根据在产品开发过程中进行稳定性研究获得的贮

存寿命（Shelf Life）而确定。

抗原性（Antigenicity） 指在适宜的体外免疫学试验中，某物质和相应抗体

相互反应的能力，如絮状反应、免疫凝胶扩散反应、酶联免疫测定等。

免疫原性（Immunogenicity） 指某一制品使用后诱生免疫应答反应的能力。在

疫苗接种情况下，此种反应导致出现理想的特异体液免疫（由B细胞产生抗体）或细胞免疫应答（各种T细胞增殖）或二者兼之，一般情况下使 被接种个体获得对相关传染病的保护。

同质性、均一性（Homogeneity） 就一种或多种特定性质而论，某一制品或物

质的组成和结构相同。

最小致死量（MLD） 在一定时间内使一定体重的试验动物全部死亡的最小毒素

或毒菌剂量。

PBS 磷酸盐缓冲生理盐水。

PB 磷酸盐缓冲液。

生物制品生产和检定用菌、毒种管理规程 Requirements for Bacterial Viral Strains Used for Manufacture and Quality Control of Biologics

1 总则

1.1 本规程所称之菌、毒种系指直接用于制造和检定生物制品的细菌、立克次体或病毒等，

以下简称菌、毒种。菌、毒种按《中国医学微生物菌种保藏管理办法》第二条分类。

1.2 各生产单位按规程生产或检定生物制品所用之菌、毒种由国家药品检定机构或国家药品管理当局委托的单位保存、检定及分发。凡增加、减少或变更生产及检定用菌、毒种，及各生产单位自行分离或收集的菌、毒种，拟用于生产或检定者，均须经国家药品检定机构审查、国家药品管理当局认可。新生物制品所用的菌、毒种按国家药品管理当局《新生物制品审批办法》办理。

1.3 生物制品生产应采用种子批系统。原始种子批（Primary Seed Lot）应验明其记录、历史、来源和生物学特征。从原始种子批传代、扩增后保存的为主种子批（Master Seed Lot）。从主种子批传代、扩增后保存的为工作种子批（Working Seed Lot）。工作种子批的生物学特征应与原始种子批一致，每批主种子批和工作种子批均应按规程要求保管、检定和使用。

1.4 各生产单位应指定专门部门对本单位的菌、毒种施行统一管理，每年向单位领导书面报告管理情况，并抄报国家药品检定机构。

2 菌、毒种登记程序

2.1 菌、毒种由国家药品检定机构统一进行国家菌、毒种编号，各单位不得更改及仿冒。未经统一编号的菌、毒种不得用于生产和检定。

2.2 保管菌、毒种应有严格的登记制度，建立详细的总帐及分类帐。收到菌、毒种后应立即进行编号登记，详细记录菌、毒种的学名、株名、历史、来源、特性、用途、批号、传代冻干日期、数量。在保管过程中，凡传代、冻干及分布，均应及时登记，并定期核对库存数量。

2.3 收到菌、毒种后一般应及时进行检定。用培养基保存的菌种应立即检定。

3 菌、毒种的检定

3.1 生产用菌、毒种应按各项制品规程要求定期进行检定。

3.2 所有菌、毒种检定结果应及时记入菌、毒种检定专用记录内。

3.3 不同属或同属菌、毒种的强度及弱毒株不得同时在同一无菌室内操作。一、二类菌、毒种及芽胞菌、真菌必须在严格隔离的专用实验室及动物室内操作，并应加强对操作人员的防护。活菌、活毒操作必须严格执行《活菌、活毒操作管理制度》。

3.4 三、四类菌、毒种的操作应按各项制品规程的规定在专用或适宜的实验室内进行。

3.5 各单位的质量检定部门应定期了解本单位的菌、毒种保管、检定及使用情况，必要时进行抽查，或会同制造部门进行抽查。

4 菌、毒种的保管

4.1 菌、毒种经检定后，应根据其特性选用适当方法及时保存。最好冻干，低温保存。

4.2 不能冻干保存的菌、毒种，应保存2份或保存于2种培养基，一份供定期移种或传代用，另一份供经常移种或传代用。用培养基保存的菌种管应用石蜡密封或熔封。

4.3 保存的菌、毒种传代或冻干均应填写专用记录。

4.4 菌种管上应有牢固的标签，标明菌、毒种编号、代次、批号、日期。

5 菌、毒种的销毁

5.1 销毁无保存价值的一、二类菌、毒种的原始种子批、主种子批和工作种子批须经单位领导批准，销毁三、四类菌、毒种须经部门领导批准，并在帐上注销，写明销毁原因和方

式。

5.2 保存的菌、毒种传代、移种后，销毁原菌、毒种之前，应仔细检查新旧菌、毒种的标签是否正确。

6 菌、毒种的交换

6.1 菌、毒种最好冻干、真空封口发出，如不可能，毒种亦可以组织块或细胞液形式发出，菌种亦可用培养基保存发出，但管口必须密封。

6.2 各生产单位或其他机构之间相互索取的菌、毒种，凡直接用于生产及检定者，均须经国家药品检定机构审查认可。

7 菌、毒种的索取与分发

7.1 索取或邮寄菌、毒种，必须按《中国医学微生物菌种保藏管理办法》执行。

7.2 分发生物制品生产和检定用菌、毒种，应附上详细的历史记录及各项检定结果。

生物制品国家标准物质制备和标定规程 Requirements for Preparation and Calibration of National Standard Substances of Biologics

1 标准物质的种类和定义

标准物质分为二类。

1.1 国家标准品

系指用国际标准品标定的，或我国自行研制的（尚无国际标准品者）用于衡量某一制品效价或毒性的特定物质，其生物活性以国际单位或以单位表示。

1.2 国家参考品

系指用国际参考品标定的，或我国自行研制的（尚无国际参考品者）用于微生物（或其产物）鉴定或疾病诊断的生物诊断试剂、生物材料或特异性抗血清以及用于某些不用国际单位表示的制品的定量检定用特定物质。

2 标准物质的制备和标定

2.1 标准物质的制备、标定由国家药品检定机构负责。国际标准品、国际参考品由国家药品检定机构向WHO索取，并保管和使用。

2.2 新建标准物质的研制

2.2.1 原材料选择

生物标准物质原材料应与待检样品同质，不应含有干扰性杂质，应有足够的稳定性和高度的特异性，并有足够的数量。

2.2.2 标准物质的配制、分装、冻干和熔封

2.2.2.1 根据各种标准物质的要求，进行配制、稀释。需要加保护剂等物质者，该类物

质应对标准物质活性、稳定性和试验操作过程无影响，并且其本身在干燥时不挥发。

2.2.2.2 经一般质量检定合格后，精确分装，精确度应在±1﹪以内。

2.2.2.3 需要干燥保存者分装后立即进行冻干和熔封。冻干者水分含量应不高于3﹪。

2.2.2.4 整个分装、冻干和熔封过程，必须密切注意各安瓿效价和稳定性的一致性。

2.2.3 标定

2.2.3.1 协作标定

新建标准物质的研制或标定一般需有至少3个有经验的实验室协作进行。参加单位应采用统一的设计方案，统一的方法，统一的记录格式，标定结果须经统计学处理（标定结果至少需取得5次独立的有效结果）。

2.2.3.2 活性值（效价单位或毒性单位）的确定

一般用各协作单位结果的均值表示，由国家药品检定机构收集各协作单位标定结果，统一整理统计并上报国家药品管理当局批准。

2.2.4 稳定性研究

研制过程应进行加速破坏试验，根据制品性质放不同温度（一般放4℃、22℃、37℃、-20℃）、不同时间，作活性测定以评估其稳定情况。标准物质建立以后应定期与国际标准物质比较，观察活性是否下降。

2.3 标准物质替换批的制备与标定

2.3.1 由国家药品检定机构负责制备与标定

2.3.2 制备标准物质替换批的原材料，其生化和生物学特性指标尽可能与上批标准相同或接近。

3 标准物质的审批

3.1 新建标准物质由国家药品检定机构对协作标定的结果进行审查并认可后，报上级主管机构批准，发放批准证书。

3.2 标准物质替换批由国家药品检定机构审查批准。

3.3 新建标准物质在取得批准证书后，方可发出使用。

4 标签

4.1 符合规定的合格标准物质由国家药品检定机构的质量保证部门核发标签。

4.2 标签内容一般包括：①中文名称；②批号；③标示量（含1个国际单位的固体量，或每1mg含国际单位数量，或安瓿内所含国际单位的数量）；④保存条件；⑤分发单位；⑥失效日期。

5 标准物质的索取和保管

5.1 索取标准物质应直接向国家药品检定机构申请。国家标准物质系提供给各生产单位标定其工作标准或直接用于检定。

5.2 标准物质应储存于适应的温度、湿度等条件下，其保存条件需定期检查并记录。

5.3 标准物质需由专人保管、发放。

生物制品分批规程

Requirements for Defining Batches of Biologics

1 生物制品之间成品均应按照本规程分批。有专门规定者除外。

2 生物制品之批号由生产部门编制，质量检定部门审定。

3 生物制品批号的编码原则为年＿月＿流水号。年号应写公历年号4位数，月份写二位数。例如2000（年）05（月）18（流水号）。

4 生物制品之某一批号，其所含内容 必须完全一致，即同一批的任何一瓶制品之来源与质量必须与其他任何一瓶完全相同，于抽检若干瓶数后，能对整批制品作出评定（单人或少数人份血液、血浆制备的制品除外）。

5 批号的确定

5.1 制品分装前最后一道工序为稀释、混合、吸附、混合后过滤或稀释后过滤时，应在此时编定制品之批号。如在上述工序之后，该批制品必须分做若干大瓶时，应于每瓶记载之批号后，加上亚批号。非同日或同次稀释、混合、吸附、过滤的制品不得做为一批。

5.2 混匀或稀释后的制品如用两个以上滤器过滤时，应按滤器划分为不同批（或亚批）号，同一制品分次过滤时，亦应按次数划分为不同批（或亚批）号。

5.3 用大罐稀释后直接分装的制品，每罐为一个批号，并按分装机分为亚批号。

5.4 同一批制品如用不同冻干机进行冻干，或分为数次冻干时，应按冻干机或冻干次数划分为亚批号。

5.5 在分装过程中更换注射器后应另编亚批号。

6 制品分批后，每批所用器械及用具未经洗净灭菌，不得用于另一批制品。

7 同一制品的批号不得重复。

8 凡经检定合格的成品，每批应保留足够2次检定用的数量。

生物制品分装规程

Requirements of Filling of Biologics

在生物制品剂型中主要为注射剂，故本规程针对注射剂制定。其他胶囊剂、片剂、散剂、滴眼剂、栓剂及本规程未提到之剂型的分装要求和实际装量等，均按现行《中国药典》制剂通则的有关规定执行。

1 质量检定部门认可

符合质量标准的半成品经质量检定部门认可后，方可进行分装（有专门规定者除外）。

2 分装容器及用具

2.1 分装制品的玻璃容器，应一律为硬质中性玻璃制成，其检查方法及标准应符合现行《中国药典》规定。玻璃容器至少经高压蒸汽120℃灭菌1小时，或干热180℃灭菌2小时，或能达到同样效果的其他灭菌方法处理，不得有玻璃碎片掉下和碱性物质析出。

2.2 凡接触制品的分装容器及用具必须单独刷洗。血清类制品、血液制品、卡介苗、结核菌素等分装用具应专用，未经严格处理，不得用于其他制品。

3 分装车间

3.1 分装车间应符合中国GMP要求。

3.2 分装洁净室与其他区域应保持一定压差，并有显示压差的装置。

3.3 分装车间应光线充足，但须避免光线直接射入。室内应经常保持干燥。冻干制品

封口之洁净室的相对湿度应不超过60﹪。

3.4 分装车间内的设备、器具应力求简单，避免积藏尘埃污垢。室内不应用竹、藤、木器，以防真菌生长。

3.5 分装车间用的清洁器具应符合洁净室的要求。

4 分装人员

直接参加分装的人员，每年至少健康检查一次。凡有活动性结核、急性传染性肝炎或其他有污染制品危险的传染病患者，应禁止参加分装工作。

5 关于待分装制品的规定

5.1 待分装之制品，其最近一次无菌试验不得超过6个月，超过6个月者，应由有关部门重新抽检。

5.2 待分装制品的标签必须完整明确，品名、批号须与分装通知单完全相符，瓶口需包扎严密，瓶塞须完整，容器无裂痕，制品之外观须符合该制品制造及检定规程中的要求。

6 分装要求

6.1 分装前应加强核对，防止错批、混批。分装规格、制品颜色相同而品名不同或活疫苗与其他制品不得在同室同时分装。

6.2 全部分装过程中应严格注意无菌操作。制品尽量由原容器内直接分装（有专门规定者除外），同一容器的制品应当日分装完毕。原容器为大罐当日未能分装完者，可延至次日分装完毕。不同亚批的制品不得连续使用同一套灌注用具。

6.3 制品分装应做到随分装随熔封。分装于瓶子者，须加橡皮塞并用灭菌的铝盖加封。

6.4 分装活疫苗及其他对温度敏感的制品时，分装过程中制品应维持在25℃以下，分装后之制品应尽速采取降温措施（有专门规定者，按有关制品的要求进行）。

6.5 含有吸附剂的制品或其他悬液，在分装过程中应保持均匀。

6.6 分装时，可根据不同制品的具体情况，采取适当措施除去微量沉淀。

7 制品实际装量

制品的实际装量应多于标签标示量，分装100ml者补加4ml，分装50ml者补加2ml，分装20ml者补加1ml，分装10ml者补加0.5ml，分装5ml者补加0.3ml，分装2ml者补加0.2ml，分装1ml者补加0.1ml，分装0.5ml者补加0.1ml。保证做到每安瓿的抽出量不低于标签上所标明的数量。抗毒素出上述规定外按单位计算另补加10﹪或20﹪。

8 分装卡片和记录

分装后之制品要按批号填写分装卡片，写明制品名称、批号、亚批号、规格、分装日期等。并应立即填写分装记录，注明分装、熔封、加塞、加铝盖等主要工序中直接操作人员及复核人员的姓名。

9 抽取无菌试验样品

分装后制品每批或亚批（大罐分装的制品应以分装机为单位分为亚批）按本版规程通则《生物制品无菌试验规程》规定，在分装过程的前、中、后三个阶段任意抽取样品，送质量检定部门检定。样品之瓶样、装量及分装情形须与同批内其他安瓿一致，不得选择。质量检定部门也可到分装部门抽取样品。

生物制品包装规程

Requirements for Packaging of Biologics

1 经质量检定部门检定合格和综合审评符合质量标准的制品才能进入包装车间（有专门规定者除外）。

2 同一车间有数条包装生产线同时进行包装时，各包装线之间应有隔离设施。外观相似的制品不得在相邻的包装线上包装。每条包装线均应标明正在包装的制品名称、批号。

3 熔封后的安瓿，须经破漏检查。破漏检查可采用减压或其他方法。用减压法时，应避免把安瓿泡入液体中。真空熔封的冻干制品，应测定真空度。充氮熔封的冻干制品，应测定氮气含量。

4 制品在包装前必须按照各制品制造及检定规程中的要求做外观检查。制品透视要求和标准如下。

4.1 透视灯光尽量采用20W日光灯，其背景按制品的颜色调整。

4.2 透视人员视力应每半年检查一次，视力应在1.0以上，无色盲。

4.3 凡制品颜色、澄明度异常，浓度过浓或过淡，有异物、摇不散的凝块、结晶析出、安瓿封口不严，有黑头、裂纹等应全部剔除（有专门规定者应按该制品制造及检定规程执行）。

5 包装前应按质量检定部门开出的包装通知单所载有效期准备瓶签或印字戳。瓶签上字迹要清楚。

瓶签上应载明制品名称、批号及亚批号、失效日期、主要有效成分的含量或效价。包装盒上须印有制品名称、批号及亚批号、规格、失效日期、保存温度、注意事项、生产单位名称、注册商标及生产批准文号。批号的号码应用热打码机（或其他打码机）直接打印在包装盒上。

6 在包装时要与质量检定部门发出的包装通知单仔细核对批号是否相符，防止包错包混。在包装过程中如发现制品的外观异常、容器破漏或有异物者应剔除。

7 包装制品应在25℃以下进行（有专门规定者应按该制品制造及检定规程执行）。

8 瓶签要求贴牢，直接印字的制品要求字迹清楚，不易脱落或模糊。

9 每盒制品应附有使用说明。各种制品的瓶签及使用说明，最好用不同颜色或式样，以资识别。

10 某些治疗用生物制品由于适应证不同，其使用说明由各生产单位根据国家药品管理当局批准的内容编写，必须包括制品名称、商品名称、组成和性状、规格、质量标准、药理作用、适应证、用法与剂量、禁忌、副反应及处理、注意事项、保存、运输及使用期限、生产批准文号、生产单位及地址等项目。

11 包装箱外要注明制品名称、批号、规格、数量、失效日期（年、月、日）、生产单位名称、保存温度及运输中应注意事项。以上内容必须直接印在包装箱上。批批号的号码应用热打码机（或其他打码机）直接打印在包装箱上，字迹应清楚，不易脱落和模糊。

12 包装结束后应彻底清场，并写清场记录。

13 制品包装全部完成后，在未收到产品合格证前，应在待检区封存。收到合格证后，

方可填写入库单，交成品库。

生物制品储存、运输规程 Requirements for Storage and Transportation of Biologics

1 各生产单位应有冷藏设备，供储存原液、半成品及成品之用。

2 下列各项原液、半成品、成品须分别储存。如条件可能时应单设储存库，否则应按中国GMP要求隔开放置，以免混淆。

2.1 尚未或正在除菌、灭菌、解毒之原液、半成品，必须由制造部门隔离储存。

2.2 已经除菌、灭活或解毒之原液、半成品，在尚未得出检定结果前，仍由制造部门分别储存。

2.3 待分装制品及分装后在检定中或检定合格尚未包装之制品，由分装室、包装室分别储存。

2.4 已经检定合格包装后之制品，应交成品库储存。

3 储存原液、半成品、成品的容器应有明显标志，注明品种、批（亚批）号、规格、数量以及储存日期。

4 储存的半成品、成品应填写库存货位卡及分类帐，由专人负责保管、整理，进出均须及时填写并签字。

5 各种原液、半成品瓶口须严密包扎或封口。

6 各种原液、半成品、成品按各自制品制造及检定规程所规定的温度、湿度及避光要求储存，应定时检查和记录储存库的温度、湿度。

7 半成品、成品储存库应指定专人负责管理。

8 有疑问之原液、半成品或成品须加明显标志注明“保留”字样，待决定后再作处理。

9 检定不合格之原液、半成品或成品，应及时按有关规定处理。

10 超过规定储存时间之原液、半成品或已过有效期之成品，应及时按有关规定处理。

11 生物制品在运输期间应遵守下列原则。

11.1 应采用最快速的运输方式，以缩短运输时间。

11.2 应用冷藏方法运输。

11.3 冬季运输应注意防止制品发生冻结。

生物制品生产用动物细胞制备及检定规程 Requirements for Preparation and Control of Animal Cell Substrates Used for Production of Biologics

本规程适用于生产和（或）检定疫苗等生物制品的细胞培养，其中包括二倍体细胞、传代细胞和原始细胞培养。本规程对这些细胞的性质、质量及安全性检定提出了明确要求。

A 对各类细胞培养总的要求

1 细胞库的建立

来自人或动物的细胞，已经通过全面检定，并得到国家药品管理当局批准，方可用于生物制品生产及检定。

1.1 原始细胞库

由一个原始细胞群体，发展成细胞系（株）或经过克隆培养而形成均一的细胞群体，通过检定证明适用于生物制品生产及检定。为了保证能持续使用而建立原始细胞库。目的是使得制品每一生产周期，都能提供一个已标定好的相同质量的细胞源。因此，在特定条件下由有一定数量、成分一致的细胞，按一定量均匀分装于安瓿，于液氮或-100℃以下冻存备用，即为原始细胞库。

1.2 主细胞库（MCB）

取原始细胞种子，通过相应方法进行细胞传代，增殖一定数量细胞，将所有细胞均匀混合成一批，定量分装安瓿，保存于液氮或-100℃以下备用。这些细胞必须以其自身的特定质控要求进行全面检定，全部合格后即为主细胞库，为建立工作细胞库用。

1.3 工作细胞库（MCB）

工作细胞库的细胞由主细胞库细胞传代扩增而来。主细胞库之细胞经传代增殖，达到一定代次水平的细胞，全部合并成一批均质细胞群体，再按要求的细胞数量分装安瓿，保存于液氮或-100℃以下备用。冻存时细胞的传代水平须确保细胞复苏后传代增殖的细胞数量能满足生产一批或一个亚批产品。此时传代的水平必须在该细胞用于生产限制最高代次之内。工作细胞库细胞，必须按该细胞的检定要求，逐项进行全面检定，合格后方可用于生产。

1.4 生产用细胞培养

取出冻存的工作细胞库中一个或多个安瓿，混合后培养，传递一定代次后供生产制品使用。其代次不得超过对该细胞用于生产的最高限制代次。从工作细胞库取出的细胞种子增殖出来的细胞，不再回冻保存和再用于生产。

1.5 体外培养细胞龄的计算

二倍体细胞以细胞群体倍增计算，以每个培养容器细胞群体细胞数为基础，每增加一倍作为一世代，即1瓶细胞传2瓶（1：2分钟率）再长满瓶为一世代；1瓶传4瓶（1：4）为二世代；1瓶传8瓶（1：8）则为三世代。生产用细胞龄限制在细胞寿命期限的前2/3内。

传代细胞系则以一定稀释倍数进行传代，每传一次为一代。依据每个细胞系的实践经验数据，确保细胞质量及安全，确定生产使用细胞最后限制代次。

有的原始细胞可以传少数几代（一般不应超过5代），尚可用于生产，但要以该细胞生产特性及对病毒繁殖敏感性不发生改变为基础。

2 生产管理

2.1 细胞生产质量管理

细胞培养操作必须按照GMP要求，防止污染。在生产区内不能进行非生产用细胞、微生物的操作，生产人员要定期检查身体。在同一工作日于操作细胞前，不得操作或接触有感染性的微生物或动物。用于制品生产的培养物中不准加青霉素或β—内酰胺（β—Lactam）抗生素。虽允许少量使用其他抗生素，但最好不使用任何抗生素。

2.2 原材料的选择

各种类型细胞的供体材料均不应有任何外源因子污染。二倍体细胞的供体包括胎儿的父母应为无传染性疾病和严重的遗传病，也无不确定病因的疾病。

培养细胞用牛血清，来源地区应没有牛脑海绵体脑病的健康牛群，应检查无外源因子污染方可使用，应符合《中国生物制品主要原辅材料质控标准》中牛血清的有关规定。

消化细胞用胰蛋白酶应进行检测，证明无细菌、真菌、支原体和感染性病毒，特别是胰蛋白酶来源的动物可能携带的病毒，如牛、猪的细小病毒等。

3 细胞培养的检查

包括细胞种子、细胞库细胞的各项检查。

3.1 细胞养用原材料检查

3.1.1 牛血清的检查

牛血清应从健康牛群中的小牛或胎牛中采集。生产单位对牛血清应进行细菌、真菌、支原体检查，按本版规程通则《生物制品无菌试验规程》进行；病毒检查应特别重视牛腹泻病毒的检查；噬菌体检查应注意大肠杆菌噬菌体的检查。检查结果应能证明无任何外源或内源因子污染。

3.1.2 胰蛋白酶检查

消化分散细胞用胰蛋白酶应按本版规程通则《生物制品无菌试验规程》检查细菌、真菌和支原体。生产厂家应对胰蛋白酶来源的动物可能携带的病毒（如牛和猪的细小病毒）进行检查。

3.2 细胞培养物的检查

3.2.1 细菌、真菌检查

细菌培养上清液样品，按本版规程通则《生物制品无菌试验规程》A项进行。

3.2.2 支原体检查

按本版规程通则《生物制品无菌试验规程》B项进行。

3.2.3 病毒检查

应注意检查细胞株中有无细胞来源物种可能潜在感染的病毒，以及由于操作带入的外源性病毒。特别要注意逆转录病毒的检查。

3.2.3.1 细胞培养直接观察及红细胞吸附试验

取混合瓶细胞样品，接种小瓶，待细胞长成单层换维持液，观察两周，镜检细胞，应保持正常形态特征。培养至少14天，分别取1/3细胞培养瓶，用0.2﹪～0.5﹪豚鼠红细胞混合悬液做红细胞吸附试验，加入红细胞后先置于4～8℃，后置于20～25℃各30分钟，两次观察结果均应为阴性。新用红细胞在2～8℃保存不得超过7天，溶液中不应含有钙或镁离子。

3.2.3.2 不同细胞传代培养检查

细胞培养上清液混合样品，至少接种3种细胞（猴源细胞、人源细胞和同种不同批细胞），接种样品量应占维持液的1/4以上，培养至少14天时，进行学吸试验（同3.2.3.1项）。培养7天的上清液接种于同种细胞培养，盲传一代，全部观察共14天，应无细胞病

变，血吸试验应为阴性。

3.2.3.3 动物和鸡胚检查

用乳鼠、成鼠、家兔、豚鼠和鸡胚（两组不同日龄）共计6组。每组动物或鸡胚接种待检细胞样品不应少于107细胞/ml。按表1所列方法进行试验和观察。如试验到期有80﹪以上动物或鸡胚健存，此试验成立，再经其他检测以确定结果。

表1

动物组 要求 数量 接种途径 接种细胞观察天数 结果 液量ml/只 乳鼠 24小时10（2窝） 脑内 0.01 21 应健存 内〉= 腹腔 0.1 成鼠 12~14g 10 脑内 0.03 21 应健存 腹腔 0.5 豚鼠 350~500g 5 腹腔 5.0 42 应健存，解剖无结核病变 家兔 1.5~2.5kg 5 皮下 9.0 21 无异常，健存 皮内 0.1*10 鸡胚 9~11日龄 10 尿囊腔 0.2 3~4 尿液血凝试验阴性 鸡胚 5~6日龄 10 卵黄囊 0.5 5 应存活 ①

豚鼠注射前和观察4周做结核菌素试验应为阴性。

②

每只家兔于皮内注射10处，每处0.1ml。

③

应用豚鼠和鸡红细胞混合悬液做直接血凝检查。

3.2.3.4 逆转录病毒检查

（1）透射电镜检查

（2）逆转录酶活性测定：采用敏感的方法（如PERT法）检测逆转录酶活性。

3.3 致肿瘤性检查

某些传代细胞系已证明具有致肿瘤性者，可不必做肿瘤性检查。而有的细胞系已证明在一定代次内不具有致肿瘤性者，则需要进行致肿瘤性检查。对需要做致肿瘤性试验的细胞系，包括原始细胞库、主细胞库及工作细胞库细胞。被检查的细胞需要增殖达到或超过生产用体外细胞龄限制的传代水平。

可以采用体内法检查，下述两法可任选其一。

3.3.1 无胸腺小鼠，至少10只，每只皮下或肌肉注射107细胞；设阳性对照细胞，用 Hela或Hep—2，注射106细胞；阴性对照细胞用二倍体细胞株。

3.3.2 乳鼠（3～5日龄）或8～10g小鼠6只，经过抗胸腺血清（ATS）处理，每只皮下接种107活细胞，设对照组如上。

3.3.3 结果观察：动物观察14天，检查有无结节或肿瘤形成。如有结节或可疑病灶，应观察至少1～2周，然后解剖做病理及组织学检查。未发生结节的动物半数观察21天，掊检；另外半数动物观察12周，进行病理检查，剖检接种部位。观察各淋巴结和各器官有无结节形成，如有怀疑，进行病理组织检查，不应有移植瘤形成。二倍体细胞观察21天，结果应为阴性。

3.4 细胞鉴别试验

新建细胞系或株、细胞库和生产结果时的细胞应进行鉴别试验，以确认为本细胞。可采用遗传特征、DNA指纹图谱、染色体标记、免疫学、HLA和生化法（如同功酶）测定，任选其中一种方法。有简便而能鉴别的方法亦可采用，但需经国家药品检定机构认可。

B 生物制品生产用人二倍体细胞株

人二倍体细胞株来源于正常人胎肺或其他组织，主要用于培养病毒制备疫苗等。

1 细胞株的要求

用于疫苗生产的人二倍体细胞株须按下列要求进行全面检定。新建细胞株，应按《新生物制品审批办法》进行审批。

1.1 建立细胞株必须具备下列资料。

1.1.1 建立细胞株所用的胎儿的胎龄和性别，终于妊娠原因。

1.1.2建立细胞株所用的胎儿父母的年龄、职业及健康状况（经医生出具证明），胎儿父及母系三代应无明显遗传缺陷疾病历史。在取胎儿组织前，应做出详细调查，申报审批前，应对上述背景资料进行一次重复调查。

1.1.3 原始组织种类，原始细胞培养的细胞数量与生长的状况。

1.1.4 细胞培养方法、历史、生长特征和寿命的世代数。

1.1.5 细胞生长液的成分

1.2 细胞株的检定

1.2.1 染色体检查

1.2.1.1 新细胞株建株过程中，每8～12世代应作为一次染色体检查，一株细胞整个生命期内连续培养过程中，至少有4次染色体检查结果。

每次染色体检查，应从同一世代不同培养瓶中取细胞混合再培养，制备染色体标本片。染色体片应长期保存（直至褪色不能用为止）以备复查。

每次染色体检查，至少应随机取1000个分裂中期细胞，进行染色体数目、形态和结构检查，并做出有助于复查的记录。其中至少选择50个分裂中期细胞进行显微照相，作出核型分析。并应粗数500个分裂中期细胞，检查多倍体的发生率。

可用G分带或Q分带技术检查50个中期细胞染色体带型，应用照相图片作出带型分析。

1.2.1.2控制标准

1000个和500个中期细胞标本中，检查异常率，合格的上限（可信限90﹪Poison）法如表2。

表2

异常 检查细胞数 1000 500 100 染色体单体和染47 色体断裂 26 8 结构异常 17 10 2 超二倍体 8 5 2 亚二倍体 180 90 18 多倍体 30 17 4 ① 亚二倍体如超过上限，可能因制片过程人为的丢失染色体，应选同批号标本重新计数。

② 一个中期细胞内超过53条染色体即为一个多倍体。

1.2.2 细菌、真菌、支原体及病毒检查

细胞株不应有细菌、真菌、支原体及病毒等污染。每8～12世代细胞培养物，应进行下列检查。

1.2.2.1 细菌、真菌检查

按本版规程通则《生物制品无菌试验规程》A项进行。

1.2.2.2 支原体检查

按本版规程通则《生物制品无菌试验规程》B项进行。

1.2.2.3 病毒检查

按A3.2.3项进行。

二倍体细胞株传代过程中，至少对2个不同世代水平进行包涵体、乙型肝炎、丙型肝炎、EB病毒及艾滋病病毒进行检查和电镜检查等，结果均应为阴性。同时还要进行逆转录酶检查。

1.2.3 致肿瘤性检查

每8～12世代，做一次细胞株异种移植试验，观察细胞株有无致瘤性质，试验方法按A3.3项进行。结果应无致肿瘤性。

1.2.4细胞株鉴别试验

按A3.4项进行。

2 生产用细胞的要求

2.1 细胞库的要求

用于生物制品生产的二倍体细胞株，不应有外源因子污染，细胞核学应属正常，对病毒敏感性好，有足够量的符合质量要求的细胞种子，并经国家药品管理当局批准。

2.1.1 原始细胞库

在细胞株传代过程的早期，应选适当世代水平（2～8世代）增殖出大量细胞，制成细胞悬液，分装安瓿置于液氮中或-100℃以下冻存，即为原始细胞库，供制备主细胞库用。

2.1.2 主细胞库

取原始细胞库之细胞，传代增殖到适当世代，有足够量细胞，按一定量分装安瓿，置于液氮中或-100℃以下冻存，供建工作细胞库用。

2.1.3 工作细胞库

取主细胞库之细胞，传代增殖到适当世代，累积足够量的细胞，按一定量分装安瓿，置于液氮中或-100℃以下冻存，为生产备用。

2.2 细胞库的管理

2.2.1 每个细胞库的细胞安瓿应注明细胞株名、世代次、安瓿号、数量、冻存日期，并应记录放置位置、容器编号等。

2.2.2 冻存的种子细胞存活率应在90﹪以上。冻存后的细胞，至少作一次复苏培养并连续传代至衰老期，应在不同传代水平检查细胞生长情况。

2.2.3 对主细胞库和工作细胞库的细胞，应进行全面检查。

2.3 细胞库细胞的检查

2.3.1 细菌、真菌、支原体和病毒检查

按A3.2项进行。

2.3.2 致肿瘤性检查

按A3.3项进行。

2.3.3 染色体检查

细胞库细胞复苏后，至少粗数500个分裂中期细胞染色体，计算多倍体，细数100个分裂中期细胞染色体，精确计数断裂率、结构异常发生率等，按B1.2.1.2项评价。染色体标本需永久保存。

2.3.4 细胞鉴别试验

按A3.4项进行。

2.4 生产过程细胞培养的检查

2.4.1 用于生产的细胞世代，应在细胞整个寿命的2/3世代以内。

2.4.2 正常细胞外源因子检查

于接种病毒当天或在连续传代种毒的最后一次细胞接种病毒时，此批细胞留取2﹪～5﹪的细胞不接种病毒，换维持液作为正常细胞对照。与接种病毒细胞在相同条件下培养，

观察2周。镜下观察应无异常改变，然后按A3.2.3.1项作血吸试验，结果应为阴性。

2.4.3 不同细胞传代培养检查

用作对照的细胞，在换维持液时，收取细胞培养上清液分别接种一株人源传代细胞、一株猴源传代细胞及另一株人二倍体细胞，接种样品量应占维持液量1/4以上，观察14天，按A3.2.3.2项判定结果。

2.4.4 染色体检查

在生产用细胞世代水平或其后数代内（至少10代以上），检查300个中期细胞，计数多倍体；作100个中期细胞染色体检查，核型应正常。

C 生物制品生产用传代细胞系

传代细胞系一般是由人或动物肿瘤组织或正常组织传代转化而来，可悬浮培养或用

载体培养，能大规模生产。这些细胞可无限传代，但到一定代次后，致肿瘤会增强。所以对生产用传代细胞系应进行严格检查。

1 细胞系的历史及一般特征

1.1 历史

生物制品生产用任何一个细胞系均需得到国家药品管理当局的批准，并提供如下资料。

1.1.1 细胞系来源、供者的种属、年龄、性别和健康状况的描述。

1.1.2 细胞传代培养方法、生长特征、传代数，用于生产的最高限制代数，所用生

长液以及传代史等描述。

1.1.3 初步确证实验以及可能存在的所有外源因子检查结果。

1.2 细胞的一般特性

1.2.1 细胞系的生长类型及形态学特征、细胞鉴定的特殊标志、遗传特征（如HLA、DNA指纹图谱）。

1.2.2 提供细胞系用于预定目的的资料。

1.2.3 细胞系的生产用限制代次和超过该限制代次10代以上的生物学特征，要作出说明。

2 细胞库

2.1 细胞库的建立

一旦选定某一细胞系作为生物制品生产的细胞基质，即应建立细胞库为原始细胞库，以确保在制品的连续生产期中，能充分供应质量均一的细胞。细胞需作进一步检定，以保证没有细胞的交叉污染及外源因子污染。该细胞库应得到国家药品管理当局批准，并按A1.2和A1.3要求建立主细胞库和工作细胞库。

2.2 细胞库的管理

主细胞库和工作细胞库都应详细记录细胞代次，安瓿的存放位置，识别标志，冻存日期及库存量；建议主细胞库和工作细胞库分别放置在生产区中相距较远的两处、多个容器存放，以防意外，避免细胞系丢失。非生产用细胞严格与生产用细胞分开存放。

2.3 细胞库细胞的检查

对主细胞库和工作细胞库细胞均应进行全面检查。

2.3.1细胞库细胞的细菌、真菌和支原体检查

按A3.2.1

2.3.2 特殊外源病毒检查

有些细胞系可根据其来源，检查可能造成污染的本种属动物携带的病毒。

2.3.2.1 小鼠、大鼠及地鼠抗体检测，检测啮齿类动物细胞系可能存在的特有病毒，可用杂交法、PCR法、 单抗或电镜检测。

2.3.2.2人源细胞系可用体外诊断试验检测病毒性抗原，如EB病毒、巨细胞病毒、乙型和丙型肝炎病毒、艾滋病病毒等。常用方法有杂交法、PCR法、单抗检测和电镜检测。

2.3.3 逆转录病毒检查

按A3.2.3.4项进行。

2.3.4 致肿瘤性检查

按A3.3项进行。

2.3.5 细胞鉴别试验

按A3.4项进行。

2.4 生产中细胞培养的检查

2.4.1 用于生产的细胞代次

用于生产的传代细胞系，代次都有一定限制。用于生物制品生产的细胞最高限定代次，需经国家药品管理当局批准。细胞传代增殖到限定代次内，停止细胞继续传代，用于接种病毒。

2.4.2 正常细胞对照的病毒检查

按A3.2.3.1项进行。

2.4.3 不同细胞传代培养检查

按A3.2..3.2进行。

2.4.4 细胞鉴别试验

按A3.4项进行。

D 生物制品生产用原代细胞

原代细胞来源，包括猴肾、鸡胚、地鼠肾、沙鼠肾、家兔肾、狗肾和鹌鹑胚，以及其他组织等。原代细胞是用正常组织，以适当的消化液分散细胞进行培养。原代细胞没有建立细胞库的可能，只能限于原始或少数几代内使用，不能事先标定。由于这些与可传代细胞不同，应在管理和操作措施上规范，以包镇保证制品质量。

1 定义和术语

原代细胞培养是以适当的消化液消化正常动物组织以分散细胞，培养成单层细胞直接

用于生产，只限于原代或少数几代（一般1～5代）内，用于生产的细胞以生物学性状不发生改变为原则。

细胞生长液：是供细胞生长繁殖的培养液，可含少量动物血清，多为小牛或胎牛血清。

细胞维持液：是供细胞维持正常新陈代谢的培养液，不含动物血清，只维持细胞正常生存，可满足病毒复制。

2 动物组织来源和其他材料

2.1 动物组织来源

动物必须健康。对各种动物都应有明确健康状况和洁净级别要求。严格控制种群饲养动物；应尽量使用无特定病原体动物；对拟用于生产的动物种群，应定期检查有无相关病毒抗体，应严格筛选。

2.2 猴群管理

都采用非洲绿猴、恒河猴等，我国以恒河猴为主。应为正常健康猴，以笼养或小群混养。动物用于制备细胞前，应有6周以上的检疫期，检疫期中出现病猴或混入新猴，应重新检疫。从外面新引入猴群应做结核菌素试验及猴疱疹I型病毒（ B病毒）的检查。

胎猴肾可用于生产，对其母猴应进行检疫。

2.3 地鼠等其他动物的管理

用于制备生产用细胞的动物均应在封闭式房舍内饲养，应使用清洁级或SPT级动物，

种鼠至少检疫三个月。种鼠和子代鼠都不应做过其他试验。

2.4 无特定病原体鸡群

用于制备鸡胚细胞的鸡蛋应来自无特定病原体（SPF）的鸡群。

3 原始细胞培养的检查

用于细胞制备的动物剖检应正常，取留的器官组织亦应正常，如有异常，不能用于制备细胞。

3.1 细胞培养原材料检查

细胞培养用牛血清、胰蛋白酶等原材料应符合《中国生物制品主要原辅材料质控标准》要求。

3.2 细胞培养物的检查

3.2.1 细胞形态检查

细胞在接种病毒或用于生产前，培养物都应进行外观和镜下检查。应无任何可疑、异常和病变，否则不得用于生产。

3.2.2 细胞污染物检查

每批细胞培养留取5﹪～10﹪（至少留有500ml）悬液，不接种病毒，细胞浓度和处理均与生产制品过程相同，至少观察14天，并做下列各项检查，结果均应为阴性。

3.2.2.1 细菌、真菌检查

按本版规程通则《生物制品无菌试验规程》A项进行。

3.2.2.2 支原体检查

按本版规程通则《生物制品无菌试验规程》B项进行。

3.2.2.3 直接血吸附病毒检查

对观察到期的细胞，按A3.2.3.1项做血吸附试验。

3.2.2.4 不同细胞传代培养检查

收取对照细胞上清混合液，接种人源、猴源传代细胞和另一批同种原代细胞培养物，按A3.2.3.2项进行。

3.2.2.5 原代细胞培养特定病毒检查

如原代猴肾细胞培养，要着重检查SV40病毒、猴艾滋病毒和B病毒，应用Vero细胞或原始绿猴肾细胞、兔肾细胞检查。地鼠肾原代细胞培养，应用BHK21 细胞培养检查，观察细胞形态，如有可疑应在同种细胞上盲传一代继续观察。

生物制品生产用马匹检疫及管理规程 Requirements for Quarantine and Control of Horses Used for Production of Biologics

本规程适用于生物制品生产用马、骡的检疫与饲养管理。

马匹的饲养管理中免疫区及检疫区应严格划分，其设备、用具应固定专用，禁止

外来人员与牲畜进入该区。马匹的检疫、饲养管理、治疗及剖检等工作的一切技术事宜由兽医负责。

1 选购与运输

1.1 马匹的选购

1.1.1 马匹应体质健康、营养程度中等以上，年龄以4～15岁为宜。不得采购青毛、全白等淡色的马匹用于生产治疗、预防制品。

1.1.2 不得在疫病流行的地区采购马匹。

1.1.3 在采购当地应对马匹进行鼻疽菌素点眼试验。条件允许时可进行马传染性贫血及马副伤寒性流产等检查

1.1.4 使用过青霉素及人血液制品的马匹不得购入。

1.2 选好的马匹应予隔离，可进行破伤风预防接种。

1.3 运输马匹应有专人护送，注意安全。车运时应先检查、消毒车厢。

2 检疫

2.1 新马的检疫

2.1.1 新马直接进入检疫区进行编号、烙印、检疫调教及进行必要的预防接种。

2.1.2 检疫期为90天。在检疫期间，除作系统临床观察外，并进行下列各项检查，方法及判定标准按中华人民共和国农业部颁布的有关检疫规定执行。

2.1.2.1 鼻疽

鼻疽菌素点眼试验。必要时可作其他变态反应试验或补体结合试验。

2.1.2.2 马传染性贫血

补体结合试验或琼脂扩散试验。亦可采用荧光抗体试验。

2.1.2.3布氏杆菌病

试管凝集试验。

2.1.2.4 马副伤寒性流产

试管凝集试验。

2.1.2.5 必要时做其他传染病检查及一般常规检查。

2.2 免疫马匹每年检查鼻疽1～2次，马传染性贫血至少2次（蚊蝇活动季节前后各1次）。必要时也应做其他传染病及恶性肿瘤检查。

2.3 检疫结果为可疑或阳性的马匹，应立即采取有效措施处理，不得用于生产。

3 管理

3.1 免疫马匹应得到富含蛋白质、维生素的饲料，每马日料量含可消化蛋白不得低于 720g（约需精料4kg）。马匹应适当运动。马厩、运动场、饲槽、水槽及马匹体表应保持清洁卫生。马厩、运动场等定期消毒。定期称体重及削蹄。工作人员要爱护马匹，注意马匹的健康状况。

3.2 马匹患非传染性疾病时，须经兽医检查同意后方可进行采血或免疫。

3.3 马匹饲养管理区应注意安全生产。饲草贮存场地禁止烟火。注意防止草料霉烂。

3.4 发现马匹有传染病时，依下列原则处理，并制定详尽的防止措施。

3.4.1 早期检出病马、阳性马并立即处理；对可疑马进行隔离观察；阴性马进行有效的预防。

3.4.2 改善马群营养，加强管理。

3.4.3 凡属烈性传染病，阳性马尸体应予焚烧或深埋，其粪便和环境严格进行消毒，搜索疫源，杜绝传染。并应立即上报及与当地兽医机关联系，按农业部颁布的有关规定处理。

3.5 凡属下列情况的免疫马匹可予全采血。

3.5.1 免疫反应严重、体质衰弱不能维持免疫者。

3.5.2 非传染性疾病救治无效者。

3.5.3 肝脏破裂者。

3.5.4 其他特殊情况者。

3.6 剖检

3.6.1全采血马匹或病死马匹（不包括传染病），均须于专设解剖室内经兽医剖检后处理，必要时作病理检查。

3.6.2 凡经剖检证实有传染病、恶性肿瘤等马匹的血液或血浆应予废弃。

3.6.3 马匹尸体的处理按国家颁布的《肉品卫生检验试行规程》中的有关规定

执行。

生物制品无菌试验规程

Requirements for Sterility Test of Biologics

生物制品不得含有杂菌（有专门规定者除外），灭活疫苗不得含有活的本菌、本毒。在制造过程中应由制造部门按制品制造及检定规程规定进行无菌试验，分装后的制品须经质量检定部门做最后检定。各种生物制品的无菌试验除有专门规定者外，均应按照本规程的规定进行。

A 细菌及真菌检查

1 抽样

1.1 原液及半成品

原液及半成品应每瓶分别进行无菌试验，其抽样量应至少为0.1﹪，但不得少于10ml。

1.1.1 大罐稀释的制品抽样量不得少于10ml。

1.1.2 原液及半成品每开瓶一次，应如上法抽验。

1.1.3 体外用诊断制品半成品每批取样至少3ml。

1.2 成品

每亚批均应进行无菌试验，样品应随机抽取，应具有代表性（包括分装过程的前、中、后样品）。

1.2.1 分装量在100支（瓶）或以下者抽检不得少于5支，101～500支（瓶）者抽检不得少于10支（瓶），501～10000支（瓶）者抽检不得少于20支（瓶），10001支（瓶）以上者抽检40支（瓶）。

1.2.2 每瓶装量20ml以上的冻干血液制品，每柜冻干200瓶以下者抽检2瓶，200瓶及以上者抽检4瓶。每瓶装量6～20ml抽检数量加倍。5ml和5ml以下者按1.2.1项抽检。

2 无菌试验用培养基（培养基处方见附录1）

2.1 检查制品中本菌是否存活应采用适于本菌发育生长的培养基（在半成品时检查，有专门规定者除外）。

2.2 检查需氧性和厌氧性杂菌应采用硫乙醇酸盐培养基。检查不含汞类防腐剂制品中的需氧性和厌氧性杂菌时，该培养基中可不加硫乙醇酸盐。

检查真菌和腐生菌应采用改良马丁培养基。

检查混浊制品可采用不含琼脂的硫乙醇酸盐培养基。检查活疫苗时可加大琼脂含量，做成斜面。

2.3 生物制品无菌试验用干燥培养基或经国家药品检定机构认可的其他培养基。

2.4 无菌试验培养基的灵敏度：乙型溶血性链球菌（CMCC32210）应达到10-8，短芽胞杆菌（7316株）和生孢子梭状芽胞杆菌（CMCC64941）应达到10-7，白色念珠菌（ATCC10231）和腊叶芽枝霉（7702株）应达到10-6。

2.5 生物制品无菌试验培养基由质量检定部门与培养基制造部门会同进行灵敏度和变色单位试验。每当更换主要原材料时，应进行灵敏度试验，合格后方可应用（灵敏度试验法见附录2、3、4）。

2.6 无菌试验取样、移种等全部操作，应在洁净度为100级的室内或相应级别的条件下进行，无菌操作室应经常保持清洁，在每次操作前，应彻底消毒。

2.7 各生产单位的质量检定部门应定期抽检无菌试验培养基的灵敏度，国家药品检定机构应定期抽检各生产单位的无菌试验培养基。

3 细菌及真菌检查

3.1 细菌类疫苗、病毒类疫苗、抗毒素类制品、重组DNA制品及粘稠不易过滤的血液制品应用直接接种法进行无菌试验。凡能够过滤的血液制品应用薄膜过滤法进行无菌试验。

3.2 直接接种法

3.2.1 细菌类疫苗、病毒类疫苗、抗毒素类制品及重组DNA制品。

3.2.1.1 每安瓿装量5.0ml以上者（不含5.0ml）取样不应少于1.0ml，装量在5.0ml以下者（含5.0ml）取样不得少于0.5ml，装量不足0.5 ml者，全部吸取。

3.2.1.2 含防腐剂的制品，接种量与培养基的比例：苯酚或氯仿作防腐剂者至少为1：20，用汞作防腐剂者或制品内含有甲醛、抗生素者至少为1：50。先按此比例接种于硫乙醇酸盐培养基内增菌，增菌培养基不得少于200ml。于20～25℃培养3～4天后移种至硫乙醇酸盐培养基、乙醇酸盐适宜的琼脂斜面、改良马丁培养基各2管，每管0.5ml。将硫乙醇酸盐培养基、适宜的琼脂斜面各1管置30～35℃培养，其余各管置20～25℃培养，增菌

管及移种管培养时间全程不得少于14天。

3.2.1.3 不含防腐剂制品，装量在5.0 ml以下者（包括5.0ml）每10支安瓿混合，装量在5.0ml以上者每7支安瓿混合，将混合后的样品直接接种培养基，分别置20～25℃、30～35℃培养，培养时间不得少于14天。

3.2.1.4 混浊和接种后不能判定结果的制品，可取规定量的样品接种于不含琼脂的硫乙醇酸盐培养基（200ml）内进行增菌培养，3～4天后移种。培养基种类和支数、培养温度同

3.2.2 血液制品

取规定抽样数，按下列规定，从每瓶抽取样品，并全部接种完。

3.2.2.1样品每瓶装量不足1.0ml者，抽取全量，1～20ml者（不含20ml），抽取1.0ml以上。培养基每支装量为15ml，接种1.0ml。

3.2.2.2 样品每瓶装量20～100ml者（不含100ml），抽取5.0ml以上，100ml及以上者按15﹪抽样。培养基每支装量为40ml，接种5.0ml。

3.2.2.3 应接种的培养基支数依取样的总量而定。接种硫乙醇酸盐培养基与改良马丁培养基支数之比为2：1。

3.2.2.4 接种后将硫乙醇酸盐培养基总支数的1/2置30～35℃培养，其余置20～25℃培养。改良马丁培养基置20～25℃培养，培养时间不得少于14天。

3.2.3 体外诊断制品

只做半成品无菌试验。既半成品在加防腐剂之前，除菌过滤时留样做无菌试验，用直接接种法，培养8天，观察结果。如有菌生长，制品需经除菌处理后再做无菌试验，若再有菌生长应废弃。

3.3 薄膜过滤法

滤膜孔径为0.22μm或0.45μm。

3.3.1剪膜培养法

取规定抽检样品数，每瓶装量100ml及100ml以下者取全量，100ml以上者取半量加入灭菌薄膜过滤器内，加压或减压过滤。如为含汞防腐剂者，在样品过滤后，应用灭菌生理盐水或其他适宜溶剂冲洗滤膜3次，每次100ml。过滤后，无菌取出滤膜，分别放入硫乙醇酸盐培养基2支及改良马丁培养基1支（每支装量不得少于40ml，高度不得低于7cm）。如果使用一个过滤装置，则将该膜剪成三等分，分别放入规定培养基中。将滤膜放入培养基后，一支硫乙醇酸盐培养基置30～35℃培养，其余各支培养基置20～25℃培养。培养时间不得 少于14天。

3.3.2 全封闭式集菌培养法

按规定量过滤样品后，每只培养杯加相应培养基100ml，其余要求同3.3.1项。

3.4 检查厌氧性杂菌用培养基需加热驱氧者，必须冷却到45℃以下再进行接种。

3.5冻干制品按使用说明书或瓶签规定的稀释量稀释后进行无菌试验。

4 结果判定

4.1无杂菌生长判为合格（有专门规定者除外）。

4.2无菌试验发现杂菌生长，可复试。复试样品量应加倍，无杂菌生长判为合格。若复试仍有杂菌生长，该制品判为不合格。

4.3成品无菌试验不合格的亚批数占整批的30﹪以上时，由质量检定部门会同有关部门根据具体情况，全部或部分废弃。

B 支原体检查

支原体检查采用培养法和DNA染色法。对主细胞库、工作细胞库、病毒种子批、对照细胞、培养液以及临床治疗用细胞进行支原体检查时，上述两种方法应同时进行。疫苗成品中的支原体检查，可选用其中一种方法。也可采用经国家药品检定机构认可的其他方法。

1 抽样

按A1项进行。应在半成品时按亚批进行检查，成品可不再做。

2 培养基（培养基处方见附录1）

2.1采用猪胃消化液或牛心消化液的半流体及液体培养基，或经国家药品检定机构认可的其他支原体专用培养基。

2.2 培养基的灵敏度：肺炎支原体（ATCC15331株）变色单位应达到10-8，口腔支原体（ATCC23714株）应达到10-4。支原体培养基变色单位试验方法见附录4。

3 支原体检查方法

3.1待检样品如在24小时内进行支原体检查者可贮存于2～8℃；超过24小时才能接种

者，样品应在-20℃以下贮存。

3.2培养法

检查支原体采用支原体半流体和液体培养基。半流体培养基在使用前煮沸10～15分钟，冷却至56℃左右，加入未灭活马血清或灭活小牛血清和酵母浸液（培养基：血清：酵母浸液为7：2：1），并可酌情加入适量青霉素或醋酸铊，充分摇匀。液体培养除无需煮沸外亦应同样补加上述成分。将待检样品0.5～1.0ml分别种人每支10ml半流体（已冷至35～37℃）和10ml液体培养基中，每种培养基接种4支，置35～37℃培养21天。于接种后的第7天取4支中的两支进行次代培养，每一培养基转种半流体及液体培养基各2支，置35～37℃下培养21天，每隔3天观察一次。

3.3 DNA染色法

待检样品接种指示细胞（无污染的Vero细胞或经国家药品检定机构认可的其他细胞）后用特异荧光染料染色，如样品污染支原体，则附在细胞表面的支原体DNA着色，在荧光显微镜下判定。

3.1.1加样

指示细胞培养5天左右，生长到约50﹪成片时，接种待检样品。接种待检样品后的细胞至少传代一次，传代后的指示细胞生长在盖玻片上以便染色。

3.3.2 染色

待检细胞片经甲醇与冰醋酸混合液固定，经二苯甲酰胺（bisbenzimide）染色后镜检。

4 结果判定

4.1 每次试验应包括1份阴性对照（不接种样品）及2份阳性对照。当阴、阳对照成力时，试验方可成立。

4.2 样品阳性者不复试，该批制品判为不合格。

附录1 无菌试验培养基处方

1 硫乙醇酸盐培养基

胰酪蛋白胨（或酪素胰酶消化液，以总氮计2000mg） 15g酵母浸出粉（或酵母透析液200ml） 5g葡萄糖 5g氯化钠 2.5gL—胱氨酸（或半胱氨酸盐酸盐） 0.5g硫乙醇酸钠（或硫乙醇酸0.6ml） 0.5g琼脂 0.65新鲜配制的0.1﹪刃天青溶液（或0.2﹪美蓝溶液0.5ml） 1.0ml去离子水（或蒸馏水） 1000ml最后Ph值 7.142 硫乙醇酸盐培养基（不含琼脂）

～0.75g

±0.2

胰酪蛋白胨（或酪素胰酶消化液，以总氮计2000mg） 15g

酵母浸出粉（或酵母透析液200ml） 5g

葡萄糖 5g

氯化钠 2.5gL—胱氨酸（或半胱氨酸盐酸盐） 0.5g硫乙醇酸钠（或硫乙醇酸0.6ml） 0.5g去离子水（或蒸馏水） 最后Ph值 7.143 改良马丁培养基

葡萄糖 20g蛋白胨 5g酵母浸出粉（或酵母透析液100ml） 2g磷酸氢二钾 1g硫酸镁（含7分子结晶水） 0.5g去离子水（或蒸馏水） 最后pH值 6.4

加至1000ml

±0.2

加至1000ml

±0.2

4 猪胃消化液培养基

猪胃消化液 500ml

牛肉浸液（1：2） 500ml

氯化钠 2.5g

葡萄糖 1g

精氨酸 2g

酚红（0.2﹪） 10ml

将上述成分混合溶解，按需要分装，于116℃高压灭菌20分钟。使用时，于每70ml内加入：

青霉素G溶液（10万U/ml） 1.0ml

12.0ml

﹪醋酸铊溶液

无10ml

菌酵母浸液

无20ml

菌马血清

该培养基最终pH值 7.4±0.2

5 猪胃消化液半固定培养基

将猪胃消化液培养基中酚红去掉，加入3～4g琼脂即为半固定体培养基。

6 牛心消化液培养基

牛心消化液 1000ml

酵母浸液 1g

精氨酸 2g

酚红（0.2﹪） 10ml

将上述成分加热使完全溶解，按需要分装，于116℃高压灭菌20分钟。使用时，于每70ml内加入：

青霉素G溶液（10万U/ml） 1.0ml

1﹪醋酸铊溶液 2.0ml

无菌酵母浸液 10ml

无菌马血清 20ml

该培养基最终pH值 7.4±0.2

7 牛心消化液半固体培养基

将牛心消化液培养基中酚红去掉，加入3～4g琼脂即为半固体培养基。

附录2 需氧菌和厌氧菌无菌试验培养基灵敏度试验法

1 菌种

1.1 需氧菌

乙型溶血性链球菌（32210株），短芽孢杆菌（7316株）。

1.2 厌氧菌

生孢子梭状芽孢杆菌（64941株）。

以上菌株由国家药品检定机构分发。

2 培养基

凡应用于无菌试验的培养基（增菌和试验用）都应进行灵敏度试验。

3 操作

3.1 不应在同一无菌操作室内同时操作2个菌株。

3.2 将菌种接种于适宜的培养基，经30～35℃培养一定时间（乙型溶血性链球菌和生孢子梭状芽孢杆菌培养24～48小时，短芽孢杆菌培养18～20小时）后，将乙型溶血性链球菌和短芽孢杆菌分别刮入灭菌的生理盐水内制成均匀菌液，生孢子梭状芽孢杆菌先将菌液吸入灭菌的试管内，再用灭菌生理盐水稀释适宜浓度制成均匀菌液，再将菌液稀释至与标准比浊管相同之浓度，然后用0.1﹪蛋白胨水作10倍系列稀释。

3.3 将稀释度为10-6～10-8的短芽孢杆菌、10-6～10-8生孢子梭状芽孢杆菌和10-7～10-9乙型溶血性链球菌菌液各1ml分别接种到9ml（用于厌氧菌的培养基在试管中装量高度不

得低于7cm）试验用培养基中，每个稀释度至少接种3管，并用未接种的培养基做对照，将接种乙型溶血性链球菌、生孢子梭状芽孢杆菌的培养基，置30～35℃培养3天，接种短芽孢杆菌的培养基培养5天，记录结果。

4 结果判定

以接种后培养基管数的2/3以上呈现生长的最高稀释度为该培养基的灵敏度，3次试验中，以2次达到的最高灵敏度为判定标准。

附录3 真菌无菌试验培养基灵敏度试验法

1 菌种

白色念珠菌（ATCC10231株）、腊叶芽枝霉（7702株），由国家药品检定机构分发。

2 培养基

凡应用于真菌试验用的培养基都应进行灵敏度试验。

3 操作

3.1操作真菌的无菌室应与其他无菌室隔离，有2个以上菌株试验时，不应在同一无菌操作室内同时进行。

3.2 将菌接种在土豆培养基上，20～25℃培养5～7天后用灭菌生理盐水洗下菌苔，移入装有玻璃珠的大管中将孢子打散，经装有脱脂棉的注射器过滤。将菌液稀释至与标准比浊管相同之浓度，然后做10倍系列稀释。

3.3将10-5～10-7菌液各10ml分别接种到9ml试验培养基中，每个稀释度至少接种3管，

并用未接种过的培养基作对照，20～25℃培养5天，逐日观察结果。

4 结果判定

以接种培养基管数的2/3以上呈现生长的最高稀释度为该培养基的灵敏度，3次试验中以2次达到的最高灵敏度为判定标准。

附录4 支原体培养基变色单位试验法

1菌种

肺炎支原体（ATCC1533株），口腔支原体(ATCC23714株)。

由国家药品检定机构分发。

2 培养基

凡应用于检查支原体的培养基都应进行变色单位试验。

3 操作

3.1 凡操作支原体应在专门的无菌操作室内进行，

3.2 将菌种接种于适宜的支原体培养基，经35～37℃培养至培养基变色，盲传两代后，将培养物接种到被试培养基中，作10倍系列稀释，肺炎支原体稀释至10-7～10-9，口腔支原体稀释到10-3～10-5。每个稀释度3支试管，35～37℃培养7～14天观察培养基变色结果。

4 结果判定

以接种稀释后培养基管数的2/3以上呈现生长变色的最高稀释度为变色单位判定标准。

生物制品热原质试验规程

Requirements for Pyrogen Test of Biologics

本试验系将一定剂量的供试品静脉注入家兔,在规定期间内观察家兔体温升高情况,以判定供试品中所含热原质的限度是否符合规定的一种方法.

1 供试验用家兔

1.1 应健康无伤,雌者无孕,体重1.7~2.5kg.

1.2 测温前至少3日应用同一饲料喂养.在此期间内,体重应不减轻,精神、食欲、排泄等不得有异常.

1.3 未曾用于热原质试验的家兔,应在试验前1~3日内预检体温挑选一次,挑选条件与检查供试品时相同,但不注射供试品.测温探头插入肛门深度约6cm,间隔1小时测温1次,连续4小时.4小时内各兔体温约在38.0~39.8摄氏度,且最高最低温差不超过0.5摄氏度者,方可供试验用.

1.4 凡热原质试验用过的家兔,若供试品判为符合规定,家兔休息48小时后可重复使用.对血液制品、抗毒素和其他同一过敏原的供试品在5天内可重复使用.

2 试验前准备

2.1 试验用的注射器、针头及一切与供试液接触的器皿,洗净后应经250摄氏度至少30分钟或180摄氏度至少2小时干烤灭热原质.

2.2 测温探头的精确度应为+{-} 0.1摄氏度.

2.3 热原质检查前1~2日,供试验用家兔尽可能处于同一温度环境中.实验室温度保持在15~25摄氏度.试验全过程室温变化不得大于3摄氏度,并应保持安静,避免强光照射和噪声干扰.空气中氨含量应低于20？

3 试验

3.1 供试品

供试品或稀释供试品的无热原质注射液,在注射前应预热至38摄氏度.供试品的注射剂量见各制品规程的规定.但注射体积家兔每1kg体重不得少于0.5ml和不得大于10ml.

3.2 每批供试品初试用3只家兔,复试用5只.

3.3 试验前家兔应禁食2小时以上再开始测量.正常体温,共测两次,间隔30~60分钟,两次温差不得大于0.2摄氏度,以此两次体温的平均值为该兔的正常体温,同组兔间正常体温之差不得大于1.0摄氏度.家兔固定30~60分钟后开始检温.

3.4 测家兔正常体温后15分钟内,按规定剂量自耳边静脉缓缓注入预热至38摄氏度的供试品,每隔30分钟测量体温1次,连续6次.

3.5 若第6次较第5次升温超过0.2摄氏度并超过正常体温时,应连续测量,直至与前一次相比升温不超过0.2摄氏度.

4 结果判定

每只兔的正常体温与注射供试品后最高升温之差，为该兔的应答。出现负值以零计算。

4.1 初试结果判定

4.1.1 符合下列情况者，判为合格：

3只兔升温均低于0.60摄氏度，并且3只兔升温总和不超过1.40摄氏度。

4.1.2 有下列情况之一者，复试一次：

3只兔中1只体温升高0.60摄氏度或0.60摄氏度以上；3只兔升温总和超过1.40摄氏度。

4.1.3 有下列情况之一者，判为不合格：

3只兔中2只体温升高0.60摄氏度或0.60摄氏度以上；3只兔升温总和为1.80摄氏度或超过1.80摄氏度。

4.2 复试结果判定

4.2.1 符合下列情况者，判为合格：

初、复试8只兔中，2只或明或2只以下升温0.60摄氏度或0.60摄氏度以上，并且升温总和不超过3.50摄氏度。

4.2.2 有下列情况之一者，判为不合格：

初、复试8只兔中，2只以上升温0.60摄氏度或0.60摄氏度以上；初、复试8只兔升温总和超过3.50摄氏度。

生物制品细菌内毒素试验规程

Requirements for Bacterial Endotoxin Test of Biologics

采用凝胶法检查细菌内毒素。本法系用 试剂与细菌内毒素产生凝结反应的机理，以判断供试品中细菌内毒素的限量是否符合规定的一种方法。内毒素的量用内毒素单位（EU）表示。

1 试验器皿和试剂

1.1器皿

试验所用器皿应经250摄氏度至少1小时或180摄氏度至少2小时灭活可能污染的外源性内毒素。

1.2试剂

1.2.1 细菌内毒素国家标准品

系自大肠杆菌提取精制的内毒素，用于标定细菌内毒素工作标准品效价和标定、复核、仲裁鲎试剂灵敏度。

1.2.2 细菌内毒素工作标准品

系以细菌内毒素国家标准品为基准进行标定，确定其重量的相当效价。每1ng工作标准品效价应在2~50EU之间。细菌内毒素工作标准品用于鲎试剂灵敏度复核、干扰试验及试验阳性对照。

1.2.3 鲎试剂

应使用有国家药品管理当局批准文号的鲎试剂。

1.2.4 细菌内毒素检查用水

系指与灵敏度为0.03EU/ml或更高灵敏度的鲎试剂，在本37摄氏度+（-）1摄氏度24小时不产生凝结反应的灭菌注射用水。

2 试验

2.1鲎试剂灵敏度复核

鲎试剂灵敏度系指鲎试剂在试验条件下能检出内毒素标准溶液中的内毒素最低量，用EU/ml表示。

根据鲎试剂灵敏度的标示量？，将细菌内毒素国家标准品或工作标准品，用细菌内毒素检查用水溶解，在旋涡混合器上混合15分钟，然后制成2.0?、1.0?、0.5?、和0.25?的内毒素标准溶液，每稀释一步均应在旋涡混合器上混合30秒钟，按2.3项进行试验，每一稀释液平行做4管，如最高浓度4管均为阳性，最低浓度4管均为阴性，按下式计算鲎试剂灵敏度测定值（？）：

式中X为反应终点内毒素浓度的对数值。

当？在0.5?~2.0?(包括0.5?和2.0?)时，方可用于细菌内毒素检查，并以？为该批鲎试剂的灵敏度。

每批鲎试剂在使用前均应进行灵敏度的复核。

2.2 供试品干扰试验

用供试品（未检出内毒素的样品）或供试品的最大有效稀释液（MVD液）和细菌的内毒素检查用水同时将细菌内毒素国家标准品和工作标准2.0?、1.0?、0.5?和0.25?的稀释液，按2.1项进行试验。

供试品的最大有效稀释倍数（MVD）按下式计算：

MVD=CL/？

式中L为供试品的细菌内毒素限值；C为供试品的浓度或供试品复溶后所得溶液的浓度。其中当L以EU/ml表示时，C为1.0ml/ml；当L以EU/mg或EU/u表示时，C为ml/ml或u/ml。

如果有供试品和无供试品测得的鲎试剂灵敏度（？）均在0.5?~2.0?（包括0.5?和2.0?）时，则认为供试品在该浓度下不干扰试验，否则需要进行适当处理后重复本试验。使用更灵敏的鲎试剂，对供试品进行更大倍数稀释，是排除干扰的简单而有效的方法。

当鲎试剂来源、供试品的生产原料、配方及生产工艺改变时，应重新做干扰试验，每种产品至少做3批。

2.3 供试品内毒素检查

取10mm×75mm灭菌除热原质的试管5支，每支加入0.1ml鲎试剂：其中2支各加入0.1ml供试品（无干扰者）或最大有效稀释的供试品作为供试品管；1支加入2.0？内毒素标准水溶液0.1ml作为内毒素阳性对照管；1支加入供试品或供试品的最大有效稀释液制成的2.0？内毒素液0.1ml作为供试品阳性对照管；1支加入细菌内毒素检查用水0.1ml作为阴性对照管。将各管溶液混匀，封闭管口，垂直放入37℃±1℃水浴中，保持60分钟±2分钟。保持和拿取试管过程应避免受到振动造成假阴性结果。

3 结果判定

将试管从水浴中轻轻取出，缓缓倒转180°时，管内凝胶不变形，不从管壁滑脱者为阳性，将记录（+）；凝胶不能保持完整并从管壁滑脱者为阴性，记录为（-）。供试品两管

均为（-）应判为符合规定；如两管均为（+），应判为不符合规定；如两管中1管为（+），1管为（-），应按上述方法进行复试。复试样品做4管，4管中有1管为（+），即判为不符合规定。内毒素和供试品阳性对照为（-）或阴性对照为（+），试验无效。

生物制品异常毒性试验规程

Requirements for Abnormal Toxicity Test of Biologics

异常毒性试验是指各制品的特异性毒性试验以外的一般安全试验，目的是通过动物试验检查制品中外源性毒性物质的污染情况以及是否存在意外的不安全因素，以保证人体使用安全。

异常毒性试验应进行小鼠和豚鼠两种动物试验（有专门规定者除外）。

试验使用的小鼠和豚鼠应达到清洁级标准。

1 小鼠试验

1.1 动物

体重18～22g小鼠。

1.2 方法

注射前称取每只小鼠体重。每批样品用5只小鼠，每只小鼠腹腔注射0.5ml（另有规定者除外），观察7天。

1.1结果判定

在观察其内，小鼠应全部健存，无异常反应，到期每只小鼠体重增加，判为合格。如不符

合上述要求，用10只小鼠复试一次，判定标准同前。

2. 豚鼠试验

1.1 动物

体重250～350g豚鼠

1.2 方法

注射前称取每只豚鼠体重。每批样品用2只豚鼠，每只豚鼠腹腔注射5.0ml（另有规定者除外），观察7天。

1.3 结果判定

在观察期内，豚鼠应全部健存，无异常反应，到期每只豚鼠体重增加，判为合格。如不符合上述要求，用4只豚鼠复试一次，判定标准同前。

生物制品病毒外源因子检查规程 Requirements for Detection of Viral Adventitious Agents in Biologics

病毒类制品新用毒种，由于在生产前和生产过程中需经动物或细胞培养选育和扩增，有可能造成外源因子（特别是外源病毒）的污染。为了保证产品质量，需对生产用毒种和新用的细胞进行外源因子检查。

A 毒种外源因子检查

至少取10ml毒种经高效价的特异单克隆抗体或非同源性特异免疫血清中和后接种以下3种细胞：人源、猴源及制备毒种的同种不同批细胞，同时设3种细胞对照。置35～37℃培养至少14天，进行下列检查。

1 血吸附外源因子检查

于培养第14天各取1/4上述细胞瓶，进行血吸附试验。用0.2％～0.5％豚鼠红细胞溶液覆盖于细胞表面，20～25℃放置30分钟进行血吸附试验。所用红细胞在2～8℃保存不应超过7天，溶液中不应含有钙、镁离子。

2 非血吸附外源因子检查

上述3种细胞于第14天观察末，根据细胞形态判定是否有细胞病变，如有阴性，则应收获对照细胞培养物，混合后至少用上述3种细胞中任一种在同种细胞上传一代。传代样品应为含10？以上细胞的混合培养物，在传代过程中，样品稀释度不得大于1：4，每3cm？细胞面至少有1ml传代样品，并留一瓶细胞不接种作为对照，在35～37℃培养14天。观察期间细胞的非特异损失不得超过20﹪，试验方可成立。传代后细胞按上述方法再次观察血吸附及细胞病变。

上述任何试验如有出现阳性结果时，该批毒种应废弃。

B 对照细胞外源因子检查

每批生产用细胞应留取5﹪（不少于500ml）作为对照细胞不接种病毒，加入与疫苗生产相同的细胞维持液，与接种病毒的细胞在相同条件下培养至少14天或维持到最后一次收获病毒时（取二者较长者）作下列检查。

1 血吸附外源因子检查

按A 1项进行。

2 非血吸附外源因子检查

2.1 在第14天观察期末或最后一次收获病毒时，用显微镜检查外源因子引起的细胞病变，如为阴性，则要收取对照细胞培养物，混合后作传代样品接种人源、猴源及生产疫苗用同种不同批3种细胞，每种细胞至少要接种含10？细胞的混合培养物，接种时传代样品的稀释度不得大于1：4。每3cm？细胞面至少有1ml传代样品。每种细胞至少要留一瓶不接种样品作为对照，在35～37℃培养至少14天观察细胞形态，不得出现任何细胞病变。对CMV敏感的细胞（如二倍体细胞）应延长观察至第4周。也可用检查CMV特异核酸序列方法代替延长培养。

2.2传代后细胞观察期末同上所述按要求进行细胞病变及血吸附检查。

2.3 观察期间细胞的非特异性损失在20﹪以下时，方可成立。

2.4 上述任一试验显示外源因子阳性时，用该批细胞生产所收获的病毒应废弃。