标本采集、办理、状态对生化查验
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标本采集、办理、状态对生化查验
结果的影响
1.标本采集对生化查验结果的影响
1.1采集时间
同一患者在不同时间所采集标本的查验结果会有显然的差别,为了尽可能取得查验条件的一致性,生化查验原则上都是于清早早餐前或进食12h后采集。这是因为进食后血液中的某些化学成分有较大幅度的波动,而饮水还可使血液稀释,所以此期间血液成分的波动不应忽略,别的在临床上血液生化指标参照值的检查与界定,往常以空腹血样的检测值为统计样本。可是在某些急诊情况下,为了争取抢救时间,接诊后需立刻进行治疗,且同时需要进一步生化检查以判断病情的发展和预后,此时应当注意输液及药物对生化查验结果的影响,尽量在输液及药物治疗以前采取标本并立刻送检。
1.2采集部位实际工作中有时能碰到患者短时间内生化结果出现较大幅度的
波动,剖析其原因除患者病情的急巨变化和静脉补充液体的影响外,血标本的采集部位也是一个重要原因。临床上常有危重患者需要多通道输液,在采集他们的血标本出现困难时,有些标本是从输液侧肢体甚至输液的同一条静脉取血,这样血液稀释和输液药物的影响将会使查验结果出现很大的误差。所以在采集血标本时应尽可能防止在补液侧肢体采血。
1.3抗凝剂草酸盐、枸橼酸盐、EDTA的抗凝原理是与血液中的凝血因子ⅣCa2+发生反响进而阻断凝血反响,因此使用抗凝剂将会使血清中的Ca2+、Mg2+含量下降;抗凝剂本身还常含有某些的离子成分如K+、Na+,它们在使用抗凝剂后的血清浓度会升高;某些酶的活化还需要Ca2+、Mg2+的协助,当使用上述抗凝剂后,这些抗凝剂与标本和试剂中的离子联合,使得游离Ca2+、Mg2+的含量显然减少,进而抑制这些酶的活性;别的草酸盐可与乳酸、丙酮酸发生竞争性抑制,又能与LDH、烟碱辅酶腺嘌呤二核苷酸(NADH)、尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+)形成复合物。因此用这些抗凝剂分别的血浆一般不合用于酶活性的测定。肝素为含硫酸基团的粘多糖,对ALT、AST、LDH、酸性磷酸酶(ACP)无影响,合用于急诊时快速分别进行测定,但值得注意的是肝素对CK等酶有轻微的抑制作用,因此临床上生化检测除纤维蛋白原测定外,基本都是采用血清标本。
2.标本办理对生化查验结果的影响
2.1标本办理
查验科收到标本后如果先45℃水浴10min,再3000rpm离心5min即可使血清LDH、K+浓度显著升高[1],因此只需要低速离心分别血清即可。
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2.2标本储藏
标本分别前放置太久可造成溶血,此外,由于葡萄糖的酵解作用和细胞对葡萄糖的利用致使标本采集后的血液葡萄糖浓度进行性下降,有报道全血样品中葡萄糖在室温下条件下,每小时约酵解5%;Na+、Cl-、K+静置2-3h后则会有显然上涨的趋势。血清蛋白对酶蛋白有一定的稳定作用,如果没有细菌污染,大多数酶存在于清蛋白中可在室温下保留1-3天而活性不受影响,可是也有有些酶如
CK放置4h后其活性显然下降;前列腺酸性磷酸酶极不稳定,在离体后较短的时间内活性即显然下降,别的大多数酶在低温下比室温更稳定,但有些酶如醛缩酶(ALD)在低温下特别是-20℃冰冻时,可惹起不可逆性失活;LDH在低温下反而不如室温稳定。标本分别后放置太久,其水分容易蒸发,使标本浓缩而结果偏高。因
此标本应赶快剖析,关于暂时不能剖析的标本应当先密封然后保留于4℃冰箱中。
3.标本状态对生化查验结果的影响
3.1溶血溶血是临床生化查验中最常有的一种影响因素,它能惹起好多指注明显异样。惹起标本溶血的原因有好多:注射器或容器内不洁净;抽血时使用的针头过小、抽血使劲过大、较长时间地使用止血带、产生过多的泡沫;抽血后未取下针头直接将血液注入容器内、混匀抗凝剂时使劲过大等。因此有研究者主张抽血时不束扎止血带,因扎带可造成局部淤血、缺氧、水肿、溶血等而影响查验结果,若确需扎带,则不宜过紧,且不能超过1分钟。溶血的扰乱机理有以下三种:一是血细胞中高浓度组分逸出,使测定结果增高,血细胞内浓度比血浆中浓度明显高的物质有LDH、ACP、AST、K+,只需轻微溶血就能够对这些项目产生很大影响。此外若某些物质的血细胞内浓度低于血清浓度时,则溶血相当于血清被稀释,因而使这些血清成分特别是发生重度溶血时的检测值降低,这类项目主要有
Ca2+、Na+、Cl-、UA等。二是血细胞成分进入血清中后因化学反响而惹起其他物质的浓度改变,如溶血后红细胞的磷脂进入血清被血清中的磷酸酯酶水解,其结果造成血清无机磷浓度显著增高。三是血红蛋白本身颜色对检测的光学扰乱,血红蛋白的颜色在431nm和555nm波长邻近能使比色、比浊法的吸光度增高,如溶
血惹起重氮单试剂法胆红素测定结果显然升高。实际上,以上三类扰乱在溶血标本中
同时存在并可相互作用,因而使受影响的检项更加复杂,这在超微量、高精度和多指
标的检测剖析中显然不可忽略,因此,严控标本溶血是保证查验质量的重要方面。
3.2脂血血液脂浊可散射光芒,所以对吸光度一般产生正向扰乱,致使某些项目如ALB、UA、总蛋白(TP)等测定结果偏高,此时即便使用两点法或连续监测法也不能清除脂血扰乱。而在pH10以上的环境中,乳糜中的TG会皂化可使血清渐渐变清,使很多比色法测定如Ca2+、Cr、ALP、TP等结果产生负误差,此时可
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以用双波长法或设计样本空白除去扰乱。在某些实验室用乙醚办理脂血以除去脂浊对生化查验结果的影响,可是乙醚办理的脂浊标本虽然能够清除脂浊对ALT、
AST、TP等指标的扰乱,可是不能清除对ALB、GGT、LDH、BUN、GLU、Ca2+等指标的扰乱。
3.3黄疸胆红素对反响结果产生黄色化合物的比色剖析影响很大,一般能够用样本空白或两点比色法、连续监测法来除去胆红素对黄色结果的影响,但由于胆红素不稳定,随着胆红素被氧化为胆绿素、胆褐素而变色,此时如果使用两点法、连续监测法同样也不能清除胆红素对结果的扰乱。别的胆红素作为一种复原剂对氧化反响有扰乱,如氧化酶法测定GLU、TG、UA、胆固醇等,因为胆红素能够与上述过程中H2O2分解产生的新生态氧发生反响,进而使新生态氧与氧化酶法反响中的色源物质联合减少,致使结果偏低。此时也可用双波长法或设计样本空白除去扰乱,亦或当外观检查发现是黄疸血清时可先除蛋白,然后加胆红素氧化酶预先将胆红素氧化成较稳定的氧化产物胆褐素,可大大减低甚至除去胆红素的扰乱。
综上所述,影响生化查验结果的标本因素确实好多,亦很复杂,因此剖析前的标本质量问题不能忽略。查验人员除了应当不断的加强专业学习外,还应当多向临床各科室宣传和解说剖析前标本的质量控制对保证查验结果的重要性。临床医疗人员也应当认识标本因素对查验结果的影响,在剖析病情时应清除这些影响因素。临床科室与查验科携手合作,共同把好剖析前的质量关,保证查验结果的正确性,为临床提供可靠的诊断依据。
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